Proceedings of the KSAR Conference (한국동물번식학회:학술대회논문집)
The Korean Society of Animal Reproduction
- Semi Annual
Domain
- Agriculture, Fishery and Food > Science of Animal Resources
2004.06a
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First of all, in vitro production (IVP) of porcine embryos is an important as initial step to improve bio-technical applications such as transgenesis and cloning for xenotransplantation. In recent years, considerable progress has been achieved in the IVP embryos using advanced methods for in vitro maturation (IVM) and fertilization (IVF). (omitted)
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Science에서는 2002년을 small RNA를 'molecule of the year'에 선정되었다. 이어서 2003년에는 전 과학분야를 대상으로 10대 중요 과학적 성과를 발표하였는데 그 중에 siRNA (small interfering RNA)는 RNAi(RNA interference) 현상을 유도할 수 있는 기술로 선정되었으며 그 이후로 많은 과학자들의 관심을 끌게 되었다. (중략)
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단백질체(Proteome)이란 말은 어원적으로 단백질(protein)에 전체란 뜻을 가진 어미(-body, -some)가 연결된 합성어로 주어진 순간에 세포나 조직이 발현하는 모든 단백질의 총체를 의미하고 이를 연구하는 학문은 Proteomics라 일컫는다. 2001년 2월 International Human Genome Project에 의해 human genome sequence가 밝혀짐으로써 유전체 연구는 일단락 완성되었지만, 염기서열만 가지고는 이 유전자 산물의 기능을 알 수 없었고, 이것이 전사되고 최종적으로 완벽한 모양이 갖추어진 단백질을 분석해야만 그 기능을 알 수 있었다. (중략)
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DNA 메틸화는 chromatin의 remodeling에 관여하고 유전자의 silencing 안정화 등, epigenetics 조절기구로서 중요하다. 포유류의 몸을 구성하는 다양한 조직과 세포는 각각 고유의 DNA 메틸화 패턴을 형성하고 있는 것이 최근의 연구에서 밝혀지고 있다. 개체발생 세포의 분화에 DNA 메틸화가 중요한 역할을 하고 있는 것이다. 본 강연에서는 DNA 메틸화 시스템에 대하여 개설하고, DNA 메틸화 전이효소(Dnmt1) 발현의 epigenetics 제어에 대하여 설명한다. Dnmtl은 제lexon의 구분에 따라 만들어지는 3종류의 iso-form이 존재한다. (중략)
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In the bovine embryo transfer industry, sexing preimplantation embryos is an important management tool. Several methods for bovine embryo sexing utilizing polymerase chain reaction (PCR) have been developed. However, they were not popularized because the methods requiretechnical skills and expensive instruments, and are time consuming. PCR also has the risk of false positives due to DNA contamination during the electrophoresis. (omitted)
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Lee, So-Young;Park, Mi-Ryeung;Cho, Seong-Keun;Park, Yun-Jung;Kwon, Deug-Nam;Lee, Eun-Kyeong;Son, Woo-Jin;Kim, Jin-Hoi 186
In this study, we generated 40 somatic cell cloned (scNT) piglets. Of these, three displayed congestion in both liver and lung, and died within the first week of life. Two-dimensional gel electrophoresis experiments revealed changes in the responses of several detoxification-related proteins to stress and inflammation. As a result, congestive livers and lungs displayed extensive hepatopneumonic apoptosis.(omitted) -
Gene delivery is one of the keen interests in animal industry as well as research on gene function. Some of the in vivo gene delivery techniques have been successively used in various tissues for the gene therapy and transgenesis. Despite intensive efforts, it still remains to overcome problems of limited local and regional administration and low transgene expression. (omitted)
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Park, K.W.;Lee, H.;Kim, S.U.;Choi, S.S.;Choi, S.K.;Chung, Y.S.;Hong, J.Y.;Hong, S.;Jung, J.Y.;Park, C.S.;Lee, S.H. 188
근래에 많은 형질전환 실험동물이 생산되어 인간을 대체하여 전임상실험에 사용되고 있으며, 그 요구는 점차 증가되고 있다. 그러나 지금까지 생산된 것은 소형 실험동물에 국한되고 있어, 사람과의 그 크기와 기능에 거리가 있었던 것이 사실이다. 본 실험은 중형 실험동물이자 사람과 여러 기관 및 조직이 유사하다고 알려진 돼지로부터 난자를 채취하여 난자의 핵을 GFP가 발현된 세포의 핵으로 치환하여 태어난 산자를 재복제하여 생산된 돼지 신생자를 이용하여 각 기관 및 조직에서 GFP의 발현을 RT-PCR, Northern blot 및 immunocytochemistry 방법으로 분석하였다. (중략) -
Histone acetylation as epigenetic marker plays a critical role in gene expression through the interaction of nucleosomes with DNA, modulating the efficiency which RNA-polymerase can interact with promotors to initiate transcription. After fertilization, highly acetylated chromatin takes place and maintain during 1cell stages. The hyperacetylation may lead minor genome activation for survival and cleavage, and then may affect embryonic genome activation and development to balstocyst. (omitted)
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Park, J.K.;Lee, Y.K.;Lee, P.Y.;Kim, S.W.;Jeon, I.S.;Lee, H.G.;Han, J.H.;Park, C.G.;Lee, S.E.;Beak, K.N.;Chang, W.K. 190
Tissue plasminogen activator (tPA) plays important roles in the brain after excitotoxic injury. This study was conducted to produce transgenic pig harboring human tissue plasminogene activator (htPA) gene. Recombinent htPA(rhtPA) genes containing bovine-β-casein promoter (bBC) were prepared for microinjection and testified the expression level of htPA protein from the Chinese hamster ovary (CHO) cell lines before NDA microinjection into the porcine pronuclei. (omitted) -
Han, J. H.;Kim, S.W.;Lee, Y.K.;Lee, P.Y.;Park, C.G.;Lee, S.E.;Baek, K.N.;Lee, H.G.;Lee, J.Y.;Chang, W.K.;Park, J.K. 191
Transgenic animals are produced primarily by microinjecting exogenous DNA into the male pronuclei of a zygote. Microinjection method for gene transmitting is successful in mice but not efficient in farm animals, limiting it's general utility such as a large scale facility and labour. Based on our finding that sperm cells bind with exogenous DNA, sperm was used as a vector for producing transgenic animals to introduced green fluorescence protein(GFP) gene. (omitted) -
Embryonic germ (EG) cells are undifferentiated stem cells isolated from cultured primodial germ cells (PGC). These cells share many characteristics with embryonic stem cells including their morphology and pluripotency. Undifferentiated porcine EG cell lines demonstrating capacities of both in vitro and in vivo differentiation have been established. (omitted)
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Gene targeting is an in situ manipulation of endogenous gene with precise manner by the introduction of exogenous DNA. The process of gene targeting involves a homologous recombination reaction between the targeted genomic sequence and an exogenous targeting vector. In elucidating the function of many genes, gene targeting has become the most important method of choice. (omitted)
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Tissue-specific expression of the desired gene product in the targrt tissue is central to the concept of bioreactor. One approach is to use a tissue-specific promoter to drive desired gene. To investigate the feasibility of tissue-specific gene expression for bladder using the porcine uroplakin(UPII) promoter and its transcriptional control the efficacy of this promoter as well as well as fragments in regulating gene expression were cell lines using DNA transfection. (omitted)
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To discover germ cell-specific transcripts, we prepared a cDNA library from adult testes of 35-day old mice and subtracted it with mRNA from the testes of juvenile mice. Real-time RT-PCR analysis indicated that 42 cDNA clones in the subtracted library were expressed more intensely in the adult testes than in the juvenile testes. One clone identified by subtraction is expressed preferentially in the late spermatid and is located on chromosome 17E3 in mouse and 2p22 in human. (omitted)
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By use of RT-PCR coupled with DHPLC technique (WAVE analysis), pattern of isoforms of porcine cytochrome P450 aromatase gene was investigated. Relatively higher expression of aromatase mRNA was observed in testis than in ovary and this result accounted for the previous findings of higher blood estrogen level in male compared with female in this species. (omitted)
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Woo, Jei-Hyun;Chung, Hak-Jae;Kim, Bong-Ki;Ko, Yeoung-Gyu;Kim, Jeom-Soon;Jung, Jin-Kwan;Chang, Won-Kyong 197
The purpose of this experiment was to investigate the protein profiles in the placenta of Korean native cows(KNC) transferred cloned embryos and KNC artificially inseminated placental tissues were collected from the cows after cesarean section around parturition, and placental proteins were analyzed. Using two dimensional polyacrylamide gel eletrophoresis and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry. (omitted) -
Lee, Hwa-young;Kim, Bong-Ki;Cui, Xiang-Chun;Hwang, Kyu-Chan;Chung, Hak-Jae;Ko, Yeoung-Gyu;Jung, Jin-Kwan;Chang, Won-Kyong;Kim, N. H. 198
The identification of embryo-specific genes would provide insights into early embryonic development. However, the current methods employed to identify the genes that are expressed at a specific developmental stage are labor intensive and suffer from high rates of false positives. Here we employed a new and accurate reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) technology that involves annealing control primers(ACPs) to identify the genes that are specifically expressed in porcine blastocysts compared to 2-cell stage embryos. (omitted) -
This study was conducted to investigate cytoskeleton alterations during vitrified (Open Pulled Straw method) porcine immature oocytes, to utilize Taxol/sup TM/ (polymerization of tubulin molecules) and Cytochalasin B (CB, depolymerization of actin filaments) during vitrification to stabilize microtubule and microfilaments (MT and MF), and to determine in vitro maturation, fertilization and development of cytoskeletal-stabilized and vitrified porcine immature oocytes. (omitted)
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Lee, Hyosang;Yin, Xijun;Lee, Youngho;Jeon, Sejin;Suh, Yongil;Jo, Sujin;Choi, Eugene;Min, Wongi;Oh, Donghan;Kong, Ilkeun 200
The purpose of this study was carried out to determine the possibility of in vitro maturation of tiger oocytes. Immature oocytes were recovered from a pairs of ovaries. A total of 78 oocytes were collected, of which forty threes were identified as compact cumulus cells and uniform cytoplasm. 43 COCs were in vitro matured at 39℃, 5% CO₂ in air atmosphere for 48 h in a IVM medium (TCM-199 supplement with 10% FBS, 0.6 mM cysteine, 0.2 mM pyruvic acid and 10 IU/㎖ HMG). (omitted) -
Park, Sae-Young;Kim, Deok-Im;Tae, Jin-Cheol;Kim, Deok-Im;Park, Sae-Young;Kim, Eun-Young;Lee, Won-Don;Park, Sepill;Lim, Jin-Ho 201
In this study we examined whether vitrified Hanwoo (Korean cattle) IVM/IVF/IVC blastocysts can survive in vitro/in vivo by a quick one-step dilution method and these embryos result in live births. Blastocysts produced in vitro were vitrified by serial exposure to glycerol (G) and/or ethylene glycol (EG) mixtures of 10% (v/v) G for 5 min, 10% G plus 20% EG (v/v) for 5 min, and 25% G plus 25% EG (v/v) for 30 see. (omitted) -
고양이 체세포 복제산자의 생산은 Shin등(2002, Nature 415: 859) 1마리의 "Cc"를 성공한 이래 재현 생산한 보도가 없다. 그리하여 본 실험에서는 체세포 복제산자 생산을 위한 기초 실험으로서 난자의 체외성숙, 체세포핵이식 수정란의 체외발달율을 검토하고자 수행하였다. 성성숙한 고양이에서 난소적출수술로 난소를 적출 한 후 4시간 내에 실험실로 운반하여 면도칼로 난소를 절재한 후 미성숙난자를 채취하여 TCM199 + 0.4% BSA + 1000 IU/ml bST에서 24시간 체외성숙하였다. 체외성숙한 난자는 난구세포를 제거 후 핵이식에 공시하였다. (중략)
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조류는 발생학적 특성상 수정과 초기 배발생을 제외한 거의 대부분의 개체 발생 과정이 난각 속에서 진행된다. 또한 배자가 발생하는 동안 배자의 뼈를 구성하는 석회성분의 거의 대부분은 난각에서 유래한다. 난각 석회성분은 배자유래의 융모성 뇨막(chorioallantoic membrane; CAM)의 모세혈관을 통하여 배자로 이동하다. 배자 발생후기로 가면 융모성 뇨막은 전체 난각과 거의 대부분 밀착하여 배자 발생 후기에 필요한 많은 양의 석회성분을 난각에서 배자로 공급하게 된다. 그러므로 한 개의 난각 속에서 두 개의 배자가 정상적으로 발생되기란 거의 불가능하다. (중략)
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Park, Chul;Kang, Young-Ran;Sung, Yu-Hong;Kim, Chan-Nyeon;Byun, Seung-Jun;Son, Si-Hwan;Jeon, Ik-Soo 204
조류에서는 포유류와 달리 암컷이 후대의 성을 결정하는 것으로 알려져 있다. 암컷은 일생동안 산란할 난자를 가지고 태어나며, 이들 난자가 배란되어 정자와 만나면서 수정됨과 동시에 닭의 성이 결정되어진다. 본 연구는 산란계가 어떤 특이적 경향으로 암 혹은 수(W, Z) 난자를 배란하는지의 여부를 인공수정 및 배양의 방법들을 이용하여 수행하였다. 본 연구는33개체의 37주령 Single Comb white Leghorn 암컷들을 사용하여 13주 (37∼50주령) 동안 연속적으로 수행하였다. 인공수정은 동종 동계의 수탉 정액을 이용하였으며, 발생이 완료된 후대의 성비 판별은 다음과 같은 방법으로 수행하였다. (중략) -
최근에 개발된 real time RT-PCR 방법은 소량의 시료에서 특정 유전자의 mRNA 발현 양상을 분석하는데 효율적으로 이용되고 있다. 특히, 난자 또는 배아와 같이 성숙과 발생단계에 따라 유전자의 발현 양상이 현저하게 변화되는 경우에는, 각각의 시료에서 발현 양상이 크게 변하지 않는 대조군으로 사용할 수 있는 유전자를 이용한 비교, 분석이 중요하다. 본 연구에서는 생쥐의 난자와 초기 배아를 이용한 real time RT-PCR에서 mRNA의 추출방법과 형광 probe의 사용 유무 그리고 대조군으로 사용되고 있는 유전자들에 대한 검증을 시행하였다. (중략)
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임신초기 말의 태반으로부터 분비되는 융모성 성선자극 호르몬(eCG)은 황체형성(LH), 난포자극(FSH) 및 갑상선자극(TSH)호르몬과 같이 알파 및 베타 단체의 비공유결합으로 구성되어져 있는 당단백질 호르몬이다. 말의 융모성 성선자극 호르몬은 모체의 자궁내막에 침입한 태아 유래의 융모조직(자궁내막배)에서 합성ㆍ분비되어진다. 알파단체의 아미노산 배열은 동물종내에서 동일하지만, 베타단체는 호르몬에 따라 작용의 특이성을 가지고 있다고 알려져 있다. (중략)
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This cDNAs were cloned with the method of the polymerase chain reaction (PCR) by sequences based on cloned rat LH/CG and FSH receptor cDNAs. A cDNAs of LHR and FSHR were transfected into the CHO cells. Several clonal cell lines were obtained expressing different numbers of cell surface receptors. (omitted)
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Equinechorionic gonadotropin(eCG) is a member of the glycoprotein hormone family which includes FSH, hCG, TSH. These hormone family is characterized by a heterodimeric structure composed a common α-subunit noncovalently linked to a hormone specific β-subunit. To determine a and β-subunits can be synthesized as a single polypeptide chain (tethered-eCG) and also display biological activity, the tethered-molecule by fusing the carboxyl terminus of the eCG β-subunit to the amino terminus of the α-subunit was constructed and transfected into chinese hamster ovary (CHO-K1) cells. (omitted)
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골다공증 치료제로 이용되고 있는 hPTH (human parathyroid hormome)는 체내의 혈중 칼슘 농도를 조절하는 인간의 부갑상선 호르몬이다. 본 연구에서는 retrovirus vector system을 이용하여 hPTH를 효율적으로 생산하는 PFF (porcine fetal fibroblast) 돼지 세포를 구축하고자 하였다. hPTH 유전자는 갑상선 암 환자로부터 적출한 부갑상선 조직의 RNA를 주형으로 RT-PCR을 수행하여 cloning하였으며, 이 유전자가 RSV promoter 통제하에 발현되게끔 design된 retrovirus vector를 구축하였다. (중략)
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Collagen has been widely studied for medical applications. Previous studies have shown that the bovine β-casein promoter were able to drive cell-specific and hormone-dependent expression to a mouse mammary cell line but failed to induce accurate expression to the mammary gland. of transgenic mice. (omitted)
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Song, Sang-Jin;Cho, Jae-Won;Jun, Jin-Hyun;Byun, Hye-Kyung;Park, Yong-Seog;Chung, Kil-Saeng;Lee, Hoon-Taek 213
Exogeneous DNA can reproducibly be delivered by co-injected spermatozoa and this transgenesis method is very efficient protocol. But, mosaic patterns of transgenic embryos and offspring were shown frequently. Whole blastomere integration is important in transgenic animal economics. (omitted) -
Myoung-Ok Kim;Kil-Soo Kim;Eun-Ju Lee;Sung-Hyun Kim;Jun-Hong Park;Kyoungin-Cho;Boo-Kyung Jung;Hee-Chul Kim;Sol-ha Hwang 214
Follicle stimulating hormone (FSH) is a pituitary glycoprotein composed of two post translationally modified subunits, which must properly assemble to be biologically active. We developed a transgenic (TG) mouse model that overexpresses the human Follicle-Stimulating hormone (FSH) -subunit under the bovine -casein promoter, displaying in females an excessive levels express in mammary gland. (omitted) -
Kim, Sung-Hyun;Kim, Kil-Soo;Lee, Eun-Ju;Kim, Myoung-Ok;Park, Jun-Hong;Cho, Kyoung-In;Kazuhiko-Imakawa;Hyun, Byung-Hwa;Chang, Kyu-Tae;Lee, Hoon-Taek;Ryoo, Zae-Young 215
Human papillomavirus type 16 (HPV16) has been known as a major causative factor for the development of uterine cervical carcinomas. To investigate the in vivo activity of HPV16 expressed in squamous epithelia, transgenic mice harboring HPV16 E6/E7 with human keratin 14 (hK14) promoter were generated. Grossly, hK14 driven HPV16 E6/E7 transgenic mice exhibited multiple phenotypes, including wrinkled skin that was apparent prior to the appearance of hair in neonates, thickened ears, and loss of hair in adults. (omitted) -
Park, Mi-Rung;Cho, Seong-Keun;Lee, Eun-Kyeong;Joo, Young-Kuk;Park, Young-Ho;Kim, Hyung-Joo;Do, Chang-Hee;Kim, Jin-Hoi 216
Genetically modified domestic animals have many potential applications ranging from basic research to production agriculture. One of the goals in transgenic animal production schemes is to reliably predict the expression pattern of the foreign gene. Establishing a method to screen genetically modified embryos for transgene expression before transfer to surrogates may improve the likelihood of producing offspring with the desired expressing pattern. (omitted) -
Cho, Seong-Keun;Park, Mi-Rung;Kwon, Deug-Nam;Hwang, Kyu-Chan;Lee, Eun-Kyeong;Son, Woo-Jin;Kim, Jin-Hoi 217
The present study was conducted to investigate the developmental competency between male- and female-somatic cell derived nuclear-transferred porcine embryos, and the productive and survival efficiency of cloned male and female piglets. The potential of eggs receiving somatic cells to develop into blastocysts was not different among donor cells of different origins. (omitted) -
This study was designed to investigate the in vitro developmental ability and apoptosis of embryos nuclear transferred (NT) with frozen-thawed (FT) or cooled donor cells in bovine. Cultured adult bovine ear cells were used as donor cells at confluent condition (CC), after cooling at 4℃ for 48 hour, or after FT. (omitted)
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Human erythropoietin (hEPO) 유전자가 도입된 형질전환돼지는 수태와 임신율을 일반돼지와 비교를 해 보았을 때 매우 낮은 경향을 보이는 것으로 나타났으며, 이러한 경향의 원인을 구명하기 위하여 인위적인 발정동기화 및 호르몬을 이용한 과배란 유기시 배란과 수정(수태)시 성호르몬 변화를 비교하고자 실시하였다. 먼저 발정동기화를 위하여 PG 600 (PMSG 400 IU, HCG 200IU)을 주사한 후 10일 후에 Regumate porcine을 6일간 급여한 후에 PMSG 주사하고 2일 후에 hCG 주사한 다음 인공수정을 실시하였다. (중략)
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Yang, Byoung-Chul;Kim, Dong-Hoon;Im, Gi-Sun;Park, Hyo-Suk;Kim, Se-Woong;Seo, Jin-Sung;Hwang, In-Sun;Yang, Bo-Suk;Chang, Won-Kyong 220
The purpose of this study was to development of transgenic cow using the nuclear transfer. To secrete hFSH in urea, the vector was constructed with UPII promoter. The fetal fibroblast cells (KbFF) were constructed from pregnant day 45 male fetus. The hFSH genes were cotransfected with pcDNA3 (neo) vector to KbFF cells by electroporation. (omitted) -
Biological Activities of Tethered Equine Chorionic Gonadotropin (eCG) and Its Deglycosylated MutantsEquine chorionic gonadotropin (eCG), which consists of highly glycosylated α- and β-subunits, is a unique member of the gonadotropin family because it elicits response characteristics of both follicle-stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH) in other species than the horse. To determine whether α and β subunits can be synthesized as a single polypeptide chain (tethered-eCG) and also display biological activity, the tethered-eCG molecule was constructed and transfected into Chinese hamster ovary (CHO-K1) cells. (omitted)
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Kim, Sung-Hyun;Lee, Tae-Hoon;Kim, Kil-Soo;Lee, Eun-Ju;Kim, Myoung-Ok;Park, Jun-Hong;Cho, Kyoung-In;Jung, Boo-Kyung;Kim, Hee-Chul;Hwang, Sol-Ha;Lee, Hoon-Taek;Ryoo, Zae-Young 222
Superoxide dismutases are key antioxidant enzymes in metabolism of reactive oxygen species. Three different isoforms of SOD exist in mammals. The extracellular SOD (EC-SOD) is the most recently discovered SOD family member. This isoform is a copper- and zinc-containing enzyme like Cu/Zn-SOD and a homotetrameric glycoprotein with a molecular weight of about 165 kDa in mouse. (omitted) -
Nucleoside diphosphate kinases(NDPKs) are ubiquitous enzymes involved in numerous regulatory processes associated with transcriptional regulation, cell proliferation, development, and differentiation. In this study, we was examined characterization and localization of the nm23-M5 in mouse testis by Western blotting, immunohistochemical and conforcal imaging study using specific antibodies raised against nm23-M5. (omitted)
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Plasminogen activators (PAs)는 자궁분비액, 난포액, 정장물질 등을 포함한 여러 가지 세포외 분비액(extracellular fluids) 및 plasma에 풍부하게 존재하는 세포외 전구효소인 plasminogen을 plasmin으로 전환시키는 단백질분해효소이다. PAs는 섬유소용해, 배란, 착상 및 수정을 포함한 다양한 생리적인 과정에서 중요한 역할을 수행하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 본 연구는 돼지의 체외수정 과정시 정자와 난자에서의 plasminogen activators activity의 변화를 SDS-PAGE와 zymography를 이용하여 검토하였다. (중략)
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Acyl-CoA synthetase 4(ACS4) is an arachidonate-preferring enzyme aboundant in steroidogenic tissues and postulated to modulate eicosanoid production. Most of arachidonate present in cells is esterified predominantly in phospholipids. After its release by the action of calcium-dependent phospholipases, arachidonate can be converted to prostaglandins, thromboxanes, and leukotrenes via the cyclooxygenas and lipoxygenase pathways, respectively, depending on the cell type.(omitted)
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Kyoung In Cho;Jeong Woong Lee;Eun Ju Lee;Sol Ha Hwang;Myoung Ok Kim;Sung Hyun Kim;Jun Hong Park;Boo Kyoung Jung;Hee Chul Kim 226
Circling (cir) mouse is a spontaneous mutant in the inner ear that was first reported in Korea. The mutation is transmitted by an autosomal recessive gene with 100 %- penetrance.. Homozygous mice are characterized by head-tossing, bi-directional circling behavior and deafness. Histologicalexamination of the inner ear reveals abnormalities of the region around the organ of Corti, spiral ganglion neurons, and outer hair cells. (omitted) -
The purpose of this study was to investigate the effect of taurine on sperm characteristics and gene expressions(bax and Gpx) in fresh boar semen during in vitro storage. The motility of spermatozoa in Modena, Modana plus taurine 25 mM, Modana plus taurine 50 mM, Modana plus taurine 75 mM and Modana plus taurine 100 mM were 63.1%, 65.1%, 65.3%, 82.5% and 80.8%, respectively. (omitted)
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Song, Bong-Suk;Koo, Deog-Bon;Gabbine Wee;Shim, Jung-Jae;Kim, Ji-Su;Lee, Kyung-Kwang;Han, Yong-Mahn 228
Interferon-tau (IFN-τ) is the primary agent responsible for maternal recognition of pregnancy in cattle. Bovine embryos begine to express IFN-τ as the blastocyst forms. Pregnancy recognition in ruminants occurs when IFN-τ from the trophoblast prevents the increase of oxytocin receptors, disrupting luteolytic pulses of prostaglandin (PG) F2a by oxytocin. The expression of IFN-τ is strongly associated with the degree of methylation of the CpG islands in promoter region. (omitted) -
Park, Sae-Young;Hwang, Kyu-Chan;Cui, Xiang-Shun;Shin, Mi-Ra;Kim, Eun-Young;Lee, Won-Don;Kim, Nam-Hyung;Park, Sepill;Lim, Jin-Ho 229
The identification of embryo-specific genes would provide insights into early embryonic development. However, the current methods employed to identify the genes that are expressed at a specific developmental stage are labor intensive and suffer from high rates of false positives. Here we employed a new and accurate reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) technology that involves annealing control primers (ACPs) to identify the genes that are specifically or prominently expressed in bovine early blastocysts and hatched blastocysts produced in vitro. (omitted) -
Polyamines, namely putrescine, spermidine, and spermine, are biogenic low-molecular-weight aliphatic amines. Polyamines play important roles in DNA stabilization, RNA and protein synthesis, membrane stabilization, modulation of ion channels, and protection against oxygen radicals and are essential for cell homeostasis, cell growth, and tumorigenesis. (omitted)
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Successful embryonic development is dependant on temporal and stage-specific expression of appropriate genes. However, information on specific gene expression during early cleavage before zygotic gene activation (ZGA) is lacking. In the present study, we compared gene expression between porcine parthenotes 2-cell and blastocyst embryos to identify the genes that are specifically or prominently expressed by employing annealing control primers (ACP)-based Gene Fishing RCR. (omitted)
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본 연구는 돼지의 발정동기화에 의한 과배란 유기시 돼지 난소의 배란상태(황체수)와 혈액내 혈액성분(WBC, RBC Hb, HCT, MCV, MCH, MCHC, Platelet)과의 비교분석을 통하여 다배란에 따른 표지(Marker) 혈액성분을 구명하기 위하여 실시하였다. 돼지 난소의 배란상태를 구명하기 위하여 30두의 성축 암컷을 이용하였으며, 발정 동기화는 PG 600(PMSG 400 IU, HCG 200IU)을 주사한 후 10일 후에 Regumate porcine을 6일간 급여한 후에 PMSG 주사하고 2일 후에 hCG주사한 다음날 자연종부를 실시하여 수정에 이르게 하였다. (중략)
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Chung, Hak-Jae;Kim, Bong-Ki;Ko, Yeoung-Gyu;Woo, Jei-Hyun;Kim, Jeom-Soon;Jung, Jin-Kwan;Chang, Won-Kyong 233
PURPOSE: Gene expression and apoptosis in testicular germ cells has been demonstrated in many transgenic animals. However, little is known about the transgenic pig and rates of apoptosis during spermatogenesis. METHODS : Morphological and biochemical features of apoptosis reported in other species were used to confirm that the TdT-mediated dUTP Nick end labeling (TUNEL) assay is an acceptable mothos for idendtification and quantification of apoptotic transgenic germ cells in histological tissue section from transgenic pig testis. (omitted) -
수정란이식 기술이 활성화되고, 한우의 가격이 상승하여, 젖소에 한우 체외수정란이식이 성행하고 있으나, 수정란이식에 의한 수태율은 수정란이식의 성과를 내고 있다고 할 정도는 아니다. 쥐, 돼지 및 사람에서 착상에 관련되는 인자에 대한 연구가 활발히 이루어지고 있으며, 가장 착상에 관여를 많이 하고 있는 인자는 LIF, IGF와 TGF-β인 것으로 보고되고 있다. 따라서 본 연구는 임신과 관련된 주요기관인 난관의 상피세포를 체외배양하고, 그때 착상을 유도하는 것으로 알려진 IL-1α와 β를 첨가하여 IGF-I의 생산을 조사하였다. (중략)
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Kim, Bong-Ki;Chung, Hak-Jae;Ko, Yeoung-Gyu;Lee, Hwa-Young;Woo, Jei-Hyun;Kim, Young-Mi;Bae, Young-Eun;Kim, Jeom-Soon;Jung, Jin-Kwan;Chang, Won-Kyong 235
Although studies for important genes concerned in preimplantation stage that encompasses the period from fertilization to implantation were reported for mice and cows, little information relevant to this subject is known in pigs. (omitted) -
Lee, S.E.;Kim, S.W.;Lee, Y.K.;Lee, P.Y.;Han, J.H.;Park, C.G.;Baek, K.R.;Lee, H.G.;Lee, J.Y.;Chang, W.K.;Park, J.K. 236
Hyaluronic acid (HA) is one of the most abundant glycosaminoglycans (GAGs) in the female reproductive tract such as uterine, oviductal and follicular fluids in mouse, pig, cattle and human. CD44 is the principal cell membrane receptor for HA, expressed from the 1-to 8-cell stage in human embryos, during post-implantation mouse and bovine embryogenesis and on the surface of differentiated embryonic stem cells. (omitted) -
Hwang, In-Sun;Im, Gi-Sun;Kim, Dong-Hoon;Yang, Byoung-Chul;Park, Hyo-Suk;Kim, Se-Woong;Seo, Jin-Sung;Yang, Bo-Suk;Chang, Won-Kyong 237
Parthenogenesis and culture condition are essential to intracytoplasmic sperm injection and cloning by nuclear transfer. This study investigated apoptosis and in vitro development of parthenogenetic preimplantation porcine embryos. 42∼44 h in vitro matured oocytes derived from a local abattoir were used. Apoptotic cell death was analyzed by using a terminal deoxynucleatidyl transferase mediated deoxyuridine 5-triphoshate nick-end labling (TUNEL) assay. (omitted) -
세포 내에서 발현되고 있는 protein들의 양상을 분석하기 위한 기법으로 최근 proteomics에 기초하여 2차 전기영동과 MALDI-TOF MS에 의한 protein 분석방법이 개발되었는데, 특정 조직에 또는 특정 발생시기에 특이적으로 발현되는 protein의 발현양과 발현양상을 비교ㆍ분석하는데 매우 효과적으로 이용될 수 있다. 최근 체세포 핵이 식기술을 이용하여 동물의 복제가 성공하고 있지만, 임신 중이나 분만시 유사산이 많이 나타나 전반적인 효율이 크게 낮아 실용화에 지장을 초래하고 있다. (중략)
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본 연구에서는 효과적인 유전자를 발현시킬 수 있는 retrovirus vector system을 구축하기 위하여 네 가지 promoter를 비교하였다. 일반적으로 사용되고 있는 RSV (Rous sarcoma virus), UbC (Ubiquitin), β-actin, CMV(cytomegalovirus) promoter 하에 GFP (green fluorescent protein)를 표지유전자로 사용하였다. 또한 WPRE (Woodchuck hepatitis virus Posttranscriptional Regulatory Element) 서열을 도입하여 각각의 promoter 하에서 GFP 유전자의 발현 증가 여부를 검정하였다. (중략)
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Kim, Ji-Su;Koo, Deog-Bon;Song, Bong-Suk;Gabbine Wee;Choo, Young-Kug;Lee, Kyung-Kwang;Han, Yong-Mahn 240
The modification of in vitro maturation (IVM) conditions should be required to efficient production of matured porcine oocyte in vitro. Estradiol-17β (E₂) as steroid hormone exists in ovarian follicular fluid and plays a major role in ovulation. It has been reported that estradiol as well as other steroids are involved in keeping the oocytes in meiotic arrest. (omitted) -
본 연구는 발정주기에 따른 개의 미성숙난자의 체외배양 0시간째 핵의 발달단계를 비교ㆍ검토하였다. 발정주기가 다른 개의 난소를 적출 하여 항생제가 첨가된 38℃의 0.9% 생리식염수가 들어있는 보온병에 넣어 2시간 이내에 연구실로 운반하고 난소를 면도날로 세절하여 난포란을 회수하였고, 난구세포 제거 후 Chohan과 Hunter (2003) 방법에 준하여 10 ug/ml Hoechst 33342를 이용한 핵염색을 실시하여 핵의 모양을 판명하였다. 조사된 결과는 SAS 8.0 Package를 이용하여 통계분석을 실시하였다. (중략)
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This study was conducted to investigate the effects of various supplements added into maturation medium of immature porcine oocytes on quantity of cytoplasmic lipid droplets(LD), subsequent fertilization and development to the blastocyst stage in vitro. The basic maturation medium was TCM 199 + 1 ㎍/㎖ FSH, 0.57 mM cystein, 10 ng/㎖ EGF and was supplemented various supplements(10% FBS, 10% pFF, 0.4% BSA, 1.0% BSA, 0.4% PVP, 1.0% PVP). (omitted)
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Purpose: This study was conducted to obtain the relationship between initial size of pre-antral follicles (PAF) and intra-follicular oocytes (IFO) and their in vitro growth (IVG) in medium without gonadotropins (Gns) using PAF isolated from mouse ovaries mechanically. (omitted)
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본 실험에서는 돼지 액상정액의 보존일령에 따른 생존율과 활력도를 CASA를 이용하여 조사하고, 이어 IVF 후 전핵 형성율과 배 발생율을 비교하여 액상정액의 보존일령이 돼지 체외수정율에 미치는 영향을 조사하였다. 돼지 난포란을 10% pFF, 0.1 ㎎/㎖ cysteine, 10 IU/㎖ PMSG, 10 IU/㎖ hCG, 10 ng/㎖ EGF가 첨가된 TCM-199 배양액에서 22시간 동안 배양한 후, 성선자극 호르몬이 배제된 배양액에서 추가로 22시간 동안 배양하여 성숙을 유도하였다. 희석제(BTS)로 희석된 액상정액은 17℃에서 보관하였다. (중략)
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Lee, Young-Ho;Yu, Dae-Joong;Lee, Hyo-Sang;Seo, Youn-Gil;Jeon, Se-Sin;Cho, Su-Jin;Kim, Young-Ho;Yin, Xi-Jun;Cho, Seong-Kyun;Bae, In-Hyu;Kong, Il-Keun 245
This study was carried out to evaluate the possibility of production of kittens by a non-surgical intrauterine insemination (NIUI) or intra-vaginal insemination (IVI) with the Norwegian catheter and using a frozen epididymal sperm (FES). Semen was collected epididymal sperm and frozen in Tris-buffered with 50 × 10/sup 6//㎖. The motility and progressive motility of FES was approximately 40.3±5.8% and 35.9±6.5% after thawing. (omitted) -
암모니아는 murine과 sheep의 난자의 체외 배양 시 배 발달과 착상, 태아 발달에 영향을 미친다고 보고되어져 있다. 본 연구는 한우 난포의 크기에 따른 암모니아 농도 측정과 체외 성숙 시간에 따라 발생되는 암모니아의 농도가 배 발달율에 미치는 영향을 검토하였다. 도축장 유래 한우 난소의 직경(3 ㎜∼30 ㎜)난포에서 난포액을 채취하였으며, 그리고 각각의 체외 성숙 시간에 따라 배양액을 회수하였다. 암모니아 농도 측정은 ammonia Kit를 이용 spectrophotometer로 630 ㎚에 측정하였다. (중략)
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수정란 이식의 효율 증진을 위해서는 수태율의 증진 성공적 분만과 송아지 육성에 있다. 수태율의 증진을 위해서는 사양관리가 양호하고 번식기능이 좋은 수란우의 선발, 임신에 적합한 양질의 수정란, 수란우와 수정란의 동기화 정도와 이식 시술자의 기술력 등이 잘 조화를 이루는 것이 절대적으로 필요하다. 적절한 수란우의 선발과 양질의 수정란을 수정란 이식에 적용하는 것은 수정란 이식의 산업화를 더욱더 촉진할 것으로 생각된다. (중략)
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농장의 효율적 경영을 위해서는 농장경영비의 절감과 농장 소득의 증대가 매우 필수적이며 소득증대를 위해 가축번식은 그 무엇보다도 중요하다 하겠다. 특히, 젖소에서는 번식효율이 낮을 경우 산자의 생산효율이 낮으며 우유생산량도 낮아져 농가경영을 위태롭게 할 수 있는 중요인자이다. 따라서 번식효율 증진에 관한 연구는 세계의 많은 연구자들에 의해 오랜 시간 동안 연구되어지고 있다. 또한 번식효율 증진을 위해 사양관리개선, 번식능력이 양호한 종모우의 선발, 배란촉진제 사용, hCG 주사, bST 투여 등의 연구가 활발하게 진행되어지고 있다. (중략)
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This study was conducted to investigate optimal insemination timming as a scanning changes of follicular development by synchronization of ovulation(Ov-synch.) treatment for timed artificial insemination of deer. Sixty-nine elk does were inserted CIDR into virginia for 14 days from 16 to 29 September(breeding season). (omitted)
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This study was conducted to investigate the effect of the number of spermatozoa and insemination section(field) of reproductive organs at artificial insemination using laparoscopy(Fiber optic laparoscopic system, Good-Gene Co., Korea) in deer(Elk) and cattle. Twenty six elk does and fifteen cows were inserted CIDR into virginia during 12∼14 days for synchronization of estrus. (omitted)
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Plasminogen activators (PA)는 다수의 세포 형태에서 분비되는 것으로 알려진 serine protease이다. PA는 섬유소 용해, 배란, 유선 퇴화, 착상 및 수정 등 다양한 생리적인 과정에 관여한다. 본 연구는 난포액이 돼지 난자의 체외성숙에 미치는 영향을 검토하기 위하여, 다양한 조건하에서의 돼지 난자의 성숙과 난구세포-난자 복합체(Cumulus-Oocyte complexes: COCs) 또는 conditioned medium 내의 PA 활성을 검토하였다. 직경 2∼6m 난포로부터 COCs를 회수하여 일부는 난구세포를 제거하였다. (중략)
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1. The concentrations of Ang. Ⅱ were 7.2±0.91 × 10³, 3.8±0.34 × 10³, 3.5±0.30 × 10³, 2.8±0.22 × 10³ pg/㎖ in bovine follicular fluids from 1∼3 ㎜, 3∼5 ㎜, 5∼7 ㎜ and 8∼10 ㎜ follicles, respectively. However, the concentrations of Ang. Ⅱ decreased in follicular fluids from large follicles. (omitted)
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본 연구는 소를 이용한 체세포 핵이식에 있어서 탈핵전 demecolcine 처리 및 난자의 세포주기가 재구축배의 생산 및 발육에 미치는 영향을 검토하기 위하여 실시하였다. 도축장에서 회수한 난소로부터 채취한 미성숙란을 각 실험에 따라 성숙배양한 후 실험에 이용하였다. 난구세포 제거 후 일부 난자를 0.4 ㎍/㎖의 demecolcine이 함유된 배양액으로 40분간 처리하여 핵이식에 이용하였으며, 극체 미방출란 및 MI기 난자에 demecolcine을 처리하여 미성숙난자의 핵이식 이용 가능성을 검토하였다. (중략)
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The aim of this study was two purpose: to compare recovery of embryos/follicle number from superovulated Holsteins(H) and Korean Native Cows(KNC) by flushing the uterine horns through insertion of the catheter and to evaluate the hormonal and superovulatory response to estradiol benzoate(EB) treatment prior to superovulation. (omitted)
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본 연구는 한우 체세포 복제수정란의 발달에 있어서 난자가 체외성숙 된 시간이 미치는 영향을 확인하고, 또한 체외성숙 시간별 성숙난자의 MPF 활성도 변화를 조사함으로서 소 복제수정란 생산을 위한 적정 체외성숙 조건을 살펴보는데 목적이 있었다. 도축된 한우로부터 채취된 난소로부터 미성숙 난자를 채취하여, 1 ㎍/㎖ FSH와 1 ㎍/㎖ E2가 첨가된 TCM-199 배양액에서 18, 20, 22시간 체외성숙 후에 각각 성숙난자를 회수하여 22시간째 제핵을 실시하였다. (중략)
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The study was carried out to investigate the effects of preservation of ovaries and oocytes with and without cumulus cells and incubation time on zona penetration by canine spermatozoa. The objective of this study was to produce in vitro fertilized oocytes and solute canine sterile. (omitted)
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The study was carried out to investigate the effects of morphology, reproductive cycle, incubation time and activation of oocytes on in vitro maturation of cat oocytes and development of IVM/IVF embryos. 1. When recovered from ovaries collected at different stages of the reproductive cycle (inactive, follicular and luteal stage), the developmental rates of oocytes to GV and MI stage were 72.5% and 27.5%, 57.5% and 7.5%, 62.5% and 17.5%, respectively. (omitted)
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Park, H.S.;Kim, D.H.;Kim, S.W.;Yang, B.C.;Im, G.S.;Hwang, I.S.;Seo, J.S.;Yang, B.S.;Moon, S.J.;Chang, W.K. 258
Successful cryopreservation of mammalian oocytes would provide a source of materials for in vitro embryo production. This study was conducted to determine vitrification conditions for bovine immature oocytes using micro-drop method and, to examine maturation, fertilization and development of vitrified bovine immature oocytes. (omitted) -
Park, Chun-Gyu;Park, Jin-Ki;Kim, Sung-Woo;Lee, Ju-Young;Han, Joo-hee;Lee, Seung-Eun;Baek, Kyung-Nye;Chang, Won-Kyung 259
Porcine sperm extract (PSE) supporting Ca/sup 2+/ osillation was microinjected into the in vitro matured porcine oocytes. In the presence of the capacitative Ca/sup 2+/ entry mechanism which can activate MII oocytes, preparation methods of sperm extraction were studied by many researchers. Such as freeze-thaw cycle, homogenation, sonication of boar sperm was used for certification of their activity of calcium signals. (omitted) -
Kim, Sung-Woo;Park, Jin-Ki;Park, Chun-Gyu;Lee, Ju-Young;Han, Joo-hee;Lee, Seung-Eun;Baek, Kyung-Nye;Chang, Won-Kyung 260
The calcium ionophore (A23187) has been used for activation of porcine oocytes from in vitro maturation by many researches. The signaling of calcium was known to be a primary factor of activation of MII oocyte by calcium ionophore. The calcium level was measured by an intensity of fluo 4 fluorescence and confocal microscope. The level was increased by 7% ethanol or 70 μM calcium ionophore but oscillation was not found. (omitted) -
Chung, M. K.;Park, Y. J.;K. H. Jung;J. J. Lim;Lee, D. R.;S. J. Yoon;Park, C. E.;T. K. Yoon;Y. G. Chai 261
Circadian rhythms, which measure time about 24 hours, are generated by one of the most ubiquitous and well investigated timing system. More recently, circadian clock gene expression has been reported in various peripheral tissues. If a circadian clock is functioning in the testis, expression of clock genes should be observed in this tissue. To resolve this issue, we examined the expression of circadian clock genes in the testis. (omitted) -
수정란이식의 수태율을 높이기 위해서 가급적 자궁각 심부에 이식하려고 한다. 그러나 자궁경관경유법에 의한 수정란이식에서 자궁각 심부에 무리하게 이식하면 출혈 또는 이식지연으로 수태율이 저하된다. 수정란이식시 자궁내 이식기의 조작은 자궁내 PG 분비를 촉진하며, 자궁내에 분비된 PGF₂a는 수정란의 발육에 악영향을 준다고 보고하고 있다. 따라서 수태율 향상을 위해 수정란이식 직전에 PGF₂a 분비억제 제제를 투여하면 수태율을 높일 수 있다고 Schrick 등(Theriogenology, 2001;55:370)은 보고하였다. (중략)
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젖소 사육농가에서 경영비 절감 및 잉여원유 해소방안으로 젖소 수란우에 한우 수정란이식을 희망하고 있고, 지방자치단체에서는 한우 수정란이식사업을 실시하는 기관이 증가하여 전국적으로 많은 한우 수정란이 젖소에 이식되고 있다. 한우 체내수정란을 앵거스, 샤로레, 헤어포드 및 한우 수란우에 이식하였을 때 임신기간은 285.9∼290.9일이었고, 생시체중은 22.8∼25.1 ㎏이었으나 수란우 품종간에 유의적인 차이는 없었다고 손 등(1997)은 연구보고 하였으나 젖소에 한우 체외수정란이식으로 임신된 수란우의 임신기간 및 분만 송아지의 생시체중에 대한 연고보고가 없으므로 수정란이식 농가에서 송아지 분만에 대한 예측이 불가능하므로 송아지 생산관리에 어려움을 겪고 있는 실정이다. (중략)
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유전적으로 우수한 능력을 보유하거나 희소한 품종의 공란우로부터 짧은 기간 내에 다수의 수정란을 확보하는 것은 유전자원의 보존과 효과적으로 수정란이식을 수행하기 위해 매우 중요한 일이다. 일반적으로 공란우의 과배란처리는 발정발현후 9∼13일에 실시하므로 발정이 확인이 필수적이며, 반복 과배란처리는 난소반응을 저하시키므로 양질의 수정란 회수율이 낮아진다. 김 등(1997)은 한우의 반복 과배란처리간격을 41∼60일까지 실시하여도 양질의 수정란을 회수할 수 있었다고 했다. (중략)
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한우번식우 사육농가와 사육규모가 확대와 소 값 상승으로 인하며 인공수정 및 수정란 이식에 대한 수태율 향상에 많은 관심이 집중되고 있다. 이러한 수태율 향상을 위하여 한우 암소에 배란동기화 처리 후 인공수정 시 황체기능 강화제인 등을 투여하여 황체기능을 강화시키고, 투여시기에 따라 개체에 대한 신체충실지수(BCS)와 혈중요소태질소화합물(BUN)을 분석하였으며, 또한 투여시기에 따른 혈중 Progesteroner의 변화를 조사하였다. 황체기능강화제의 투여 방법은 HCG 투여구는 배란동기화 처리 후 6일째와 7일째에 각각 1500 IU와 3000 IU를 투여하였고, 투여 후 14일째에 혈액을 채취하여 혈중 P4 분석하였다. (중략)
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재래산양은 우리나라 고유의 재래가축이라는 특성과 산양육의 경우 건강보조식품으로서의 인식이 팽배해 왔기 때문에 그동안 체계적인 개량이 이루어지지 못하였다. 동물복제 또는 형질전환 등과 같은 첨단생명공학연구를 위해서는 무엇보다도 oocyte의 대량확보가 가능해야 한다. 본 연구는 재래산양에 있어서 과배란 처리에 의한 oocyte의 회수방법과 회수란의 질적 개선을 확립하기 위하여 과배란 처리 후 회수시간이 난포의 발달과 난자의 회수율에 미치는 영향을 조사하였다. (중략)
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우리나라 재래산양은 동물복제 또는 형질전환 등과 같은 첨단생명공학연구에 매우 적합한 동물이며, 이러한 연구를 위해서는 무엇보다도 oocyte의 확보방안이 시급히 마련되어야 한다. 그러나 산양의 과배란 및 회수 등에 관한 연구가 극히 미진한 실정이다. 본 연구는 재래산양에 있어서 과배란 처리에 의한 oocyte의 회수방법과 회수란의 질적 개선방법을 확립하기 위하여 호르몬 및 공란우의 반복사용에 따른 회수율을 조사하였다. 공시동물은 체중 15∼25 Kg 전ㆍ후의 성숙한 미경산 재래산양으로서 발정동기화를 위하여 CIDR(Eazi Breed, InterAg, New Zealand)를 10일간 질내에 삽입하고 과배란 처리는 FSH를 CIDR 삽입 8, 9, 10일째에 12시간 간격으로 70 ㎎을 감량법으로 투여하였으며, PMSG의 경우는 1,000 IU를 제 8일째에 1회 투여하여 과배란을 유기하였다. (중략)
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재래산양은 우리나라 고유의 유전자원으로서 첨단생명공학 연구에 매우 적합한 동물이다. 본 연구는 동물복제 및 형질전환동물 생산 등의 연구에 기초자료를 제공하고자 재래산양의 체내 및 체외유래 난자에 단위발생을 유도하여 회수난자의 조건, 활성화방법, 배양조건 등이 단위발생란의 체외발달율에 미치는 영향을 조사하여 최적의 배양조건을 확립하고자 실시하였다. 난자의 회수는 체중 15∼25 ㎏ 전ㆍ후의 성숙한 미경산 재래산양에 FSH와 PMSG를 사용하여 과배란을 유기하였다. (중략)
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배아줄기 세포는 신경퇴행성 질환의 치료 수단으로 많은 가능성을 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 중풍 동물모델에서 수중미로 학습을 이용하여 중풍 치료제로서 인간배아줄기 세포의 인지 및 기억력 장애에 대한 기능 회복의 효능을 검토하였고, 인간배아줄기 세포의 신경세포 보호효과를 규명하기 위하여 면역조직화학 염색법을 이용하여 해마내의 세포사멸을 측정하였으며, 인지 및 기억증진의 작용을 규명하기 위하여 아세틸콜린성 신경세포의 활성도를 측정하였다. (중략)
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이 연구는 Ⅰ) 혈관 폐색에 의한 인지 및 기억장애 동물모델에서 뇌졸중 치료제로써 인간배아줄기 세포의 신경세포 보호효과 및 작용기간을 밝히며, Ⅱ) 행동 약리학적 연구를 통해 기억력증진에 미치는 효과에 대해 밝히고 혈관 폐색에 의한 동물모델에서의 기억기능 증진 및 세포효과를 검증하고자 실시하였다. 중대 뇌동맥 폐색에 의한 쥐의 동물모델은 Sprague Dawley계 흰 쥐(260∼300 g)의 국소 중대뇌동맥을 일시적으로 폐색시켜 만들었다. 본 연구(미국 국립보건원에 등록된 MB03세포)에 사용된 인간배아줄기세포는 3×10⁴ cells/㎠ 밀도의 배양접시 내에서 4일 동안 embryoid bodies(EBs)의 형성을 위해 집합체를 이루도록 유도하였다. (중략)
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본 실험은 TGF-a를 처리하여 분화가 유도된 인간배아 줄기세포를 파킨슨 동물모델에 이식하여 숙주세포에서의 생존 및 이식효과를 검토하고자 실시하였다. TGF-a로 분화된 세포의 이식효과를 판정하고자 배양시 TGF-a처리군과 처리하지 않은 군으로 나누어 분화를 유도한 인간배아 줄기세포를 hoechst33342로 표지 하여 병변 유발과 동일한 방법으로 동측 선조체내에 4×10⁴개/2ul가 되도록 이식하고(이식 위치: AP 0.7, ML 2.0, DV3.4) 이식 후 2, 4주에서 행동학적 변화를 관찰하고 4주에 동물을 희생시켜 4% PFA를 이용하여 뇌 조직을 고정하고 뇌 조직은 40㎛ 두께로 동결 절편을 만들어 면역조직화학염색을 시행하여 신경세포로의 분화 및 TH 발현 여부를 관찰하였고 분화의 표지물질로 nestin, NF200, GFAP, TH를 사용하여 형태학적 변화를 관찰하였다. (중략)
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The objective of this study is to test whether human embryonic stem cells expressing Nurr1 (Nurr1-transfected hES cells) could be expressed TH according to neuronal differentiation. As an effort to direct differentiation of hES (MB03 registered in NIH) cells to dopamine-producing neuronal cells, Nurr1 was transfected using conventional transfection protocol into MB03 cell and examined the expression of tyrosine hydroxylase (TH) after differentiation induced by retinoic acid (RA) and ascorbic acid (AA). (omitted)
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Shin, Hyun-Ah;Lee, Keum-Sil;Cho, Hwang-Yun;Kim, Eun-Young;Lee, Won-Don;Park, Sepill;Lim, Jin-Ho 273
This study was to examine in vitro neural cell differentiation pattern of the genetically modified human embryonic stem cells expressing tyrosine hydroxylase (TH). Human embryonic stem (hES, MB03) cell was transfected with cDNAs cording for TH. Successful transfection was confirmed by western immunoblotting. (omitted) -
Lee, Chang-Hyun;Cho, Hwang-Yun;Kim, Yong-Sik;Kim, Eun-Young;Lee, Won-Don;Park, Sepill;Lim, Jin-Ho 274
The purpose of this study is to evaluate the efficacy of in vitro differentiated human embryonic stem (MB03) cells expressing Nurr1 in relief of symptomatic motor behavior of Parkinson's disease (PD) animal models. MB03 cell was genetically modified to express Nurr1 protein (Nr#24/MB03) and was induced to differentiate according to 2- /4+ protocol using retinoic acid and ascorbic acid. (omitted) -
Lee, Gun-Soup;Lee, Do-Hun;Kim, Eun-Young;Wang, Kyu-Chang;Lee, Won-Don;Park, Sepill;Lim, Jin-Ho 275
To evaluate the potential of the stem cell therapy as a method for prenatal management of spinal open neural tube defect (ONTD), the influence of embryonic stem cells injected into the amniotic cavity on the re-closure capacity of spinal ONTD was investgated. Spinal neural tube was incised open for a length of 6 somites using chick embryos of Hamburger and Hamilton stage 18 or 19. (omitted) -
Shim, Sang-Woo;Song, Sang-Jin;Hosup Shim;Lee, Bo-Yon;Huh, Choo-Yup;Hyuk Song;Chung, Kil-Saeng;Lee, Hoon-Taek 276
Pluripotent stem cells have been generated from two embryonic sources. ES cells are generated from ICM of blastocyst stage embryos, and embryonic germ (EG) cells are generated from primordial germ cells (PGCs). Both ES and EG cells are pluripotent and present important characteristics such as high levels of alkaline phosphatase (AP) activity, multi-cellular colony formation, normal and stable karyotypes, continuously passaging ability, and the capability of differentiation into all three embryonic germ layers. (omitted) -
The purpose of this study was to investigate the effect of different conditions (osmolity, solution, incubation times, comparison of fresh and frozen/thawed semen and storage times) on the swelling of canine spermatozoa. Employing the hypoosmotic swelling test (HOST), the membrane integrity of spermatozoa in different solutions (sucrose, fructose, latose, Na-citrate, Na-citrate plus sucrose, Na-citrate plus fructose and Na-citrate plus lactose were 61.4%, 66.2%, 62.5%, 68.1%, 62.0%, 68.5% and 60.2%, respectively. (omitted)
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The purpose of this study was to establish the convenient freezing method for more cheap and simple. Semen quality was evaluated the motility, viability, abnormality, acrosome intactness and membrane integrity. And there were also examined the developmental rates of IVM/IVF embryos using frozen-thawed boar semen in each treatment group. (omitted)
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성장중인 수토끼에서 성성숙 전후의 혈청내 IGF-I 수준과 정자형성의 변화를 12주령부터 28주령까지 2주 간격으로 조사하였다. IGF-I 수준 측정은 non-extraction IGF-I ELISA kit(Biognostic System, Lab, USA)를 이용하였으며 정소내 정자형성은 biopsy needle(22G×3¹/₂ 72㎜×8.89㎝, Becton Dickinson, USA)로 채취한 정소조직을 fled ctyometric ploidy analysis로 DNA histogram을 4개 peak(peak Ⅰ과Ⅱ :1N, peak Ⅱ :2N, peak Ⅳ : 4N, peak Ⅲ과 Ⅳ사이 : S기)로 구분하였다. (중략)
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본 연구는 개 동결정액 희석액에 pentoxyfilline을 첨가하여 융해 후 정액성상에 미치는 영향을 조사하였다. 공시견은 2∼3세의 Beagle, English cockers spania, Collie, Grey hound, Shihtzu 5두를 공시하였다. 정액은 수압법 또는 인공질법으로 채취하였고 채취된 정액은 Rota 등(EYT : Egg-yolk Tris extender, 1995)의 방법에 따라 동결정액을 제조하였다. Pentoxyfilline은 동결 보호제가 들어 있는 2차 희석액에 0 mM, 1 mM, 3 mM 농도로 첨가하였으며, 5℃에서 2시간 glycerol 평형을 한 후에 액체질소에 10분간 예비 동결하여 동결정 액을 제조하였다. (중략)
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최근 체외수정, 핵이식, 체세포 복제동물의 생산 등으로 수정란의 동결 보존기술의 개발이 매우 중요한 시기에 왔다. 본 실험에서는 한우의 체리수정란을 완전 무혈청 배양액으로 배양하여 수정란의 배발생율과 동결융해 한 후 생존성 및 수정란이식 한 후 수태율을 조사하였다. (중략)
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동물에서 활성산소계(reactive oxygen species, ROS)의 지속적이고 과도한 노출과 산화스트레스는 생리적 기능의 저하, 노화 또는 많은 질환의 원인이 되고 있으며 항산화제의 투여효과에 대한 연구가 최근 많이 이뤄지고 있다. 본 연구는 Vit. C의 공급이 절대. 필요한 guinea pig를 공시하여 녹차 추출물 중 항산화제인 polyphenol과 Vit. C의 경구 투여에 따른 정소 내 정자형성과 항산화기능의 변화 및 액상 돼지정액에 첨가 후 정액성상 변화에 대하여 조사하였다. (중략)
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The eggs of most animal species are surrounded by an extracellular matrix known as chorion, egg envelope, egg coat, or zona pellucida. Development of fish embryo usually takes several days in an aquatic environment. During embryonic development, the chorion must protect embryo from physical damage and microbial infection in the exposed aquatic environment. (omitted)
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본 연구는 Elk 사슴에서 Magic Doctor(한경게놈텍)를 이용하여 발정동기화 인공수정 후 재발정 행동의 발현양상을 관찰하기 위해 실시하였다. 미경산록 7두와 경산록 13두를 공시하였고, 발종동기화 및 인공수정은 번식계절인 9월에 progesterone이 3 g 함유된 controlled intravaginal drug-releasing device(CIDR)를 14일간 질내에 삽입하고 제거한 후에 pregnant mare serum gonadotropin(PMSG) 250IU틀 근육 주사하여 발정동기화와 배란을 유도하였다. 인공수정은 CIDR제거 후 60∼62시간째에 실시하였고 인공수정 후 비임신 개체의 재발정 발현 양상을 관찰하였다. (중략)
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농가의 사육규모 확대에 적합한 한우의 종합적 번식관리 기술을 농가의 기술 수준에 따라 효율적으로 활용이 가능하도록 개발하고자 하며 사육규모 100두 내외의 전업 번식농가에서 암소의 번식관리에 중요한 영향을 미치는 초수정 월령, 수태율, 수태당 수정회수 및 분만간격 등을 구명하고자 수행하였다. (중략)
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본 연구는 체외배양 system에서 체외성숙시 경제적인 수정란 생산체계를 검토하고자 체외성숙 배양 용기와 체외수정란생산 계절에 따른 효율을 비교조사하였다. 우선 저가의 국산 Petri dish (35×12 ㎜; SPL, Korea)와 고가의 4-well dish (Nunc, Denmark)를 체외성숙 용기로 사용하였다. 4-well dish 처리구에는 well 당 500 ㎍ 체외성숙 배양액에 50개의 난자를 배양하였고, Petri dish 처리구에서는 3 ㎖의 체외성숙 배양액에 300개 정도의 oocytes를 넣어 24시간 체외성숙을 유도하였다. (중략)
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Sexing from bovine embryos which were fertilized in vitro implicate a possibility of production of the sex controlled cattle. This study was carried out to investigate the possibility of determining of embryo sex by fluorescence in situ hybridization (FISH) technique. FISH was achieved in in vitro fertilized bovine embryos using a bovine Y-specific DNA probe which constructed from the btDYZ-1 sequences. (omitted)
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한우가격의 상승으로 젖소에 한우 체외수정란의 이식이 활발히 이루어지고 있으나, 체외수정란의 수태율이 생산자 및 시술자에 따라 많은 차이를 보이고 있다. 또한 체외수정란은 생산방법에 따라 또는 수정란의 상태와 동결보존 형태에 의해 수태율에 직접적인 영향을 미치는 것으로 보고되고 있다. 따라서 본 연구는 시판되고 있는 무혈청배양액(IVMD, IVD, 일본기능성펩타이드연구소)을 이용하여 한우 체외수정란을 생산하고, 혈청이 첨가되지 않은 동결액으로 동결 보존하였을 때 생존성을 검사하기 위하여 실시하였다. (중략)
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한우의 사육규모가 다두화 하면서 번식우의 사육규모도 점차 대규모화되어 가고 있다. 이와 같은 사육규모의 증가에 따라서 번식우 사육농가의 규모도 중ㆍ대규모화되고 있는 시점에서 여러 가지 번식에 관련된 실태를 조사ㆍ분석함으로서 번식우 사육농가의 합리적인 농장운영의 기초자료로 제시하고자 본 연구를 실시하였다. 본 실태조사의 공시축으로서는 농가한우 암소 856두를 공시하였고, 조사농가수는 가임암소 50두 이하 규모(소규모, S형)는 4호, 51 ∼ 100규모(중규모, M형)는 3호 및 100두 이상규모(대규모, L형)는 3호로 규모를 달리하여 조사하였다. (중략)
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유전자재조합 소 소마토트로핀(recombinant bovine somatotropin, rBST)은 인슐린양성장인자(IGF)-1의 합성과 분비량 조절에 의해 당과 아미노산의 흡수 및 단백질합성의 촉진을 통한 체내흡수 영양소 이용효율 증가, 산유량 증진 및 증체 효과, 세포증식의 촉진작용 등이 있는 것으로 보고(Bauman, 1982; Mears, 1995; 권 등, 1997)된 바 있으며, 또한 최근에 젖소 및 육우빈우의 인공수정시 rBST를 투여하였을 때 1회 수정수태율, 혈중 progesterone 농도 및 IGF-1 농도 등에 영향을 미치는 것으로 보고하였다(Lucy 등, 1994; Bilby 등, 1999; Morales-Roura 등, 2001). (중략)
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Im, Gi-Sun;Hwang, In-Sun;Kim, Dong-Hoon;Yang, Byoung-Chul;Kim, Se-Woong;Park, Hyo-Suk;Seo, Jin-Sung;Yang, Bo-Suk;Chang, Won-Kyong 291
Micromanipulation and fusion are essential to generate nuclear transfer embryos. In this process cytoplasmic damage is unavoidable. This study investigated the hypothesis that higher osmolarity than normal culture medium could help oocytes recover from cytoplasmic damage from micromanipulation and electric pulse. Oocytes derived from a local slaughter house were matured for 42 ∼ 44 h and enucleated. (omitted) -
배아의 성별 판별을 위해 할구를 biopsy하여 핵상에서 정밀 분석을 하였다. 이 실험에서는 8-에서 16-세포기 배아의 할구를 배아 성결정의 대표물로 사용하여 IVF소 배아를 분석 평가하였다. 55개의 배아를 PCT후 biopsy하여 분석하였다. PCR에 의한 성판별에서 biopsy한 single blastomere와 blastocyst의 성판별의 일치하는 비율은 80%인 것으로 나타났다. IVF 수정란을 염색체 상태에서 평가하기 위해 8- 16- 세포기의 할구를 Karyotyping 하였다. 할구의 Karyotyping을 위해 metaphase 상태에서 vinblastine sulfate에 계속적으로 노출시켜 metaphse Ⅱ 상태를 유도하였다. (중략)
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본 실험은 도축전 암소에 성선자극호르몬(Gonadon, 동방(주) : 3 ㎖ 목근육 주사, Gonadorelin 100 ㎍/㎖)을 처리하여 인위적으로 새로운 발정주기를 유도하여 난자 회수율 및 수정란 생산성을 향상시키고자 실시하였다. ① 실험대조군으로 85두(T1), 호르몬처리 37두를 대상으로 처리시간(T2 ; 72hrs, T3 ; 96 hrs, T4 ; 120. T5 ; 148 hrs.)에 따라 도축 후 난소로부터 혈통수정란 생산을 위해 개체별로 난자 회수량을 확인하였다. 회수된 난자를 이용하여 체외성숙 및 체외수정을 실시하였고, 이들 난자의 발육상태, 난발달 및 동결가능 수정란수를 각각 확인하였다. (중략)
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오늘날 생명공학기술의 눈부신 발달로 인하여 우리나라 재래산양은 그 모델동물로서 번식ㆍ생리학적으로 매우 중요한 가치를 지니고 있을 뿐만 아니라 고유의 유전자원 보존 측면에서도 산양복제와 같은 다양한 연구를 통하여 개량체계의 확립이 절실히 요구된다. 본 연구는 우량가축의 증식, 인간의 질병치료 및 멸종위기동물의 종 보존 등에 활용할 수 있는 기초자료를 얻고자 재래산양의 핵이식을 실시하여 공여세포의 조건, 전기적 세기 및 융합횟수 등이 융합율과 체외발달율에 미치는 영향을 조사하였다. (중략)