Achillea sibirica Ledeb. is widely distributed in Korea and has been often used as folk medicine in peptic and tonic. As one of our searches for bioactive (anti oxidation) compounds from medicinal plants, we studied Achillea sibirica Ledeb. (Compositae). Antioxidant activity of Achillea sibirica was determined by measuring lipid peroxide produced when a mouse liver homogenate was exposed at $90^{\circ}C$ using 2-thiobarbituric acid (TBA) and by evaluation the radical scavenging activity on 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical. Whole parts of Achillea sibirica was extracted with methanol and its extracts was fractionated with organic solvent; n-Hexane, methylene chloride, ethyl acetate, n-Butanol. EtOAc fraction exhibited antioxidant activity and From its, two flavonoid glycosides were isolated by silica gel and gel filtration colume chromatography and identified to kampferol 3-O-glucoside and luteolin 7-O-neo-hesperidoside, respectively, by physico-chemical and spectroscopical method. At antioxidant activity test for two compounds isolated, antioxidant activity was showed too. And from hexane fraction sterol was is isolated and identificated to mixture of campesterol, stigmasterol, and ${\beta}-sitosterol$.
The perilla seed and the germinated perilla seed $(25{\sim}28^{\circ}C$, $2{\sim}3\;days)$ were extracted by n-hexane, and from the extracted oil the antioxidative components were separated, and then the effect of the change in the contents of antioxidative components by germination on the oxidative stability of the perilla oil was studied. The perilla oils were solved acetone and methanol, and kept at $-60^{\circ}C$ overnight and separated into the frozen oil fraction and unfrozen solvent soluble fraction. By comparing the antioxidative stability of the frozen oil fraction the antioxidative components in the perilla oil were found to be methanol soluble. The methanol soluble fraction of perilla oil was applied to silica gel column chromatography and the separated fractions were compared in terms of antioxidative activity. The fraction of n-hexane : ethyl acetate (7 : 3, v/v) showing the highest antioxidative activity was further separated by TLC. The components included in the band $(R_f\;0.71)$ showing the highest antioxidative activity was separated by HPLC. Four peaks were observed on the HPLC chromatogram and the peak areas were changed by germination (perilla seed : peak 1; 46.5%, peak 2; 25.6%, peak 3; 22.6%, germinated perilla seed : peak 1; 43.8%, peak 2; 20.6%, peak 3; 29.8%). The comparative change in the contents of these components was considered to be one factor affecting the antioxidative stability of perilla oil by germination.
The proanthocyanidin fraction was isolated from the wild grape (Vitis amurensis) peel and its antioxidant capacities were examined to promote the utilization of wild grape by-products. The 70% acetone crude extract of the wild grape peel was fractionated with hexane, ethyl acetate, and water. The ethyl acetate fraction was applied to a Sephadex LH-20 column chromatograph, which was eluted with 50% methanol, 75% methanol, and 75% acetone. The proanthocyanidin characteristics and contents of the isolated fractions were investigated by the vanillin-$H_2SO_4$ and BuOH-HCl methods. Fraction 6 had the highest proanthocyanidin content ($49.35{\pm}2.75\;g%$) among the isolated fractions. The antioxidant activities of the proanthocyanidin fraction were examined by DPPH radical scavenging, FRAP assay, and total phenolic contents. The FRAP values and total phenolic contents of the fractions ranged from 3.54 to 32.25 mmol/kg and from 4.48 to 50.80 g/100 g, respectively. The proanthocyanidin contents was strongly correlated with DPPH radical scavenging activities, FRAP values, and total phenolic contents.
Kim, Min-Jeong;Lee, Hye-Hyeon;Seo, Min-Jeong;Kang, Byoung-Won;Park, Jeong Uck;Jeong, Yong Kee
Journal of Life Science
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v.23
no.3
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pp.361-367
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2013
Hizikia fusiformis has been widely used in Oriental herbal medicine and health food. To identify antioxidation properties that contain natural bioactive substances, we investigated the distribution of active compounds existing in batches of organic solvent fractionation. A dried form of H. fusiformis was subjected to sequential fractionation using n-hexane, ethyl acetate, n-BuOH, and aqueous n-BuOH. The results showed that among the four isolated fractions, the n-BuOH fraction showed the highest antioxidation activities. The n-BuOH fraction was applied to reserve-phase silica gel column chromatography, which produced three fractions: BA, BB, and BC. Among these fractions, BB showed the highest antioxidation activities, which increased in a concentration-dependent manner. At a concentration of 1.0 mg/ml n-BuOH fraction, the activities of DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical scavenging and reducing power were approximately $45{\pm}0.14%$ and $1.34{\pm}0.23$, respectively. In addition, the activities of ${\beta}$-carotene-linoleic acid, hydrogen peroxide scavenging, and ABTS (2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)) radical scavenging were $76{\pm}0.12%$, $82{\pm}0.06%$, and $65{\pm}0.17%$, respectively. These findings suggest that the BB fraction contains potent antioxidation properties and that it could be used in the production of natural and functional foods.
The aim of this study was to determine the anticancer activities of an 80% methanol extract and various fractions of Rhododendron brachycarpum (RB). The n-hexane fraction of RB showed the highest inhibitory activity (Inhibit concentration $50%=20.2{\pm}1.2{\mu}g/ml$) in HT-29 cells. Colony- and sphereforming abilities were significantly correlated with a decrease in the cell count and size. A TOP/FOP flash reporter assay revealed that the inhibitory activity of the n-hexane fraction of RB ($0.22{\pm}0.02$ fold change) was lower than that of the 80% methanol extract and that of other fractions. The n-hexane and ethyl acetate fractions of RB were predominantly dependent on the expression levels of intracellular ${\beta}-catenin$. Western blotting using $p-GSK3{\beta}$ with only the n-hexane fraction of RB was conducted to examine whether these secondary metabolites reduced ${\beta}-catenin$ degradation. Intracellular ${\beta}-catenin$ regulation resulted in quantitative changes in the nucleus. In summary, these results demonstrate the potential of the n-hexane fraction of RB as a natural anticancer agent.
The ehtyl acetate-soluble acidic fractions from juice and cake of Rubrs coreanum fruit showed DPPH radical-scavenging activity. Each fraction was purified through silica gel adsorption column chromatography. The compounds in the ethyl acetate-soluble acidic fraction of juice were identified as 4-hydroxybenzoic acid, 4-hydroxy-3-methoxybenzoic acid, 3,4-dihydroxybenzoic acid, 3,4,5-trihydroxybenzoic acid, and 3,4-dihydroxycinnamic acid by GC-MS. The compounds in the ethyl acetate-soluble acidic fraction of cake were also identified as succinic acid, 3,4-dihydroxybenzoic acid, citric acid, 3,4,5,-trihydroxybenzoic acid, and 3,4-dihydroxycinnamic acid by GC-MS. Antioxidative activity of the identified compounds were evaluated by DPPH radical-scavenging assay and hydroxyl radical-scavenging activity assay.
Kim, Bowoon;Choi, Chang-Geun;Kim, Jae-Il;Kim, Hyeung-Rak
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.54
no.2
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pp.152-161
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2021
Eisenia bicyclis is known to have secondary metabolites exhibiting various biological activities. In a preliminary study, the n-hexane fraction obtained from the ethanolic extract of E. bicyclis showed higher anti-inflammatory activity than the ethyl acetate and butyl alcohol fractions based on the inhibition of lipopolysaccharide (LPS)-stimulated nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 cells. Using this fraction (E. bicyclis hexane fraction, EHF), we investigated the molecular mechanisms underlying its anti-inflammatory effect in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Pretreatment of the cells with up to 50 ㎍/mL EHF significantly inhibited NO and prostaglandin E2 production as well as their responsible enzyme proteins and mRNAs, in a dose-dependent manner (P<0.05). Similarly, EHF markedly reduced the production of pro-inflammatory cytokines, such as interleukin (IL)-1β, IL-6 and tumor necrosis factor (TNF)-α as well as their mRNA levels. Nuclear translocation of nuclear factor-kappa B (NF-κB) was strongly suppressed by EHF treatment. EHF significantly reduced the phosphorylation of mitogen-activated protein kinases and phosphatidylinositol 3-kinase/Akt in LPS-stimulated cells. Moreover, EHF reduced ear edema in phorbol myristate acetate (PMA)-induced mice. These results indicate that EHF contains potent anti-inflammatory compounds, which may be used as a dietary supplement for the prevention of inflammatory diseases.
Kim, Hae Soo;Im, Na Ri;Park, Jun Ho;Kim, Myeong-Ok;Park, Soo Nam
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.40
no.1
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pp.11-20
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2014
In this work, the antioxidative effects and active component analysis of Gnaphalium affine D. DON. (G. affine) extracts were investigated. All experiments were performed with 70% ethanol extract, ethyl acetate fraction and aglycone fraction of the G. affine extract. The free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activity ($FSC_{50}$) of ethyl acetate fraction ($6.15{\mu}g/mL$) of the G. affine was higher than that of (+)-${\alpha}$-tocopherol ($8.89{\mu}g/mL$), which is known as a reference control. Reactive oxygen species (ROS) scavenging activities ($OSC_{50}$) of the 70% ethanol extract ($1.60{\mu}g/mL$), ethyl acetate fraction ($0.075{\mu}g/mL$) and aglycone fraction ($2.28{\mu}g/mL$) of extract of G. affine on ROS generated in $Fe^{3+}$-EDTA/$H_2O_2$ system using the luminol-dependent chemiluminescence assay were much higher than that of L-ascorbic acid ($6.88{\mu}g/mL$). The cellular protective effects of 70% ethanol extract (${\tau}_{50}$ = 52.0 min) and aglycone fraction of the extract (${\tau}_{50}$ = 60.6 min) on the $^1O_2$-induced cellular damage of human erythrocytes were exhibited the higher protective effect than (+)-${\alpha}$-tocopherol (${\tau}_{50}$ = 38.0 min), known as a lipophilic antioxidant. TLC and HPLC were used to analyse active components in the aglycone fraction of the extract. Results showed that luteolin and apigenin were main components. These results suggest that the G. affine extract can be applied to an effective antioxidant in scavenging ROS including radicals.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.31
no.4
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pp.771-780
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2014
The antioxidative effects and component analysis of the Melaleuca quinquenervia leaf extracts were investigated. All experiments were performed with 50% ethanol extract, ethyl acetate fraction and aglycone fraction obtained from dried M. quinquenervia leaves. The DPPH (1,1-phenyl-2-picrylhydrazyl) scavenging activity ($FSC_{50}$) of ethyl acetate fraction ($10.05{\mu}g/mL$) of M. quinquenervia leaf extracts was similar to (+)-${\alpha}$-tocopherol($8.89{\mu}g/mL$) known as a typical antioxidant. Reactive oxygen species (ROS) scavenging activities ($OSC_{50}$) of the ethyl acetate fraction ($1.61{\mu}g/mL$) and aglycone fraction ($1.07{\mu}g/mL$) of leaf extracts of M. quinquenervia on ROS generated in $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ system using the luminol-dependent chemiluminescence assay were similar to that of L-ascorbic acid ($1.50{\mu}g/mL$). The cellular protective effect of the extracts on the rose bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes was increased in a concentration dependant manner ($1{\sim}50{\mu}g/mL$). Especially, the cellular protective effects of Aglycone fraction (${\tau}_{50}=158.80min$) and 50% Ethanol extract (${\tau}_{50}=50.1{\pm}0.2min$) on the $^1O_2$-induced cellular damage of human cells were exhibited the higher than (+)-${\alpha}$-tocopherol (${\tau}_{50}=38.0min$). TLC and HPLC were used to analyse active components in the ethylacetate fraction of the extracts. Results showed that avicularin and quercetrin were active components of the extracts. These findings suggest that the M. quinquenervia leaf extracts can be applied to new cosmetics products as an effective antioxidant ingradient.
Xuan, Song Hua;Kim, A Rang;Jeong, Yoon Ju;Lee, Nan Hee;Park, Soo Nam
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.42
no.3
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pp.217-226
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2016
In this study, we investigated the antioxidative and cellular protective effects on HaCaT cells and erythrocytes of Moringa oleifera (M. oleifera) leaves extract and its fractions. All experiments were performed with 50% ethanol extract, ethyl acetate fraction and aglycone fraction of M. oleifera leaves. The free radical scavenging activity ($FSC_{50}$) of the extract and fractions of M. oleifera leaves were in the following order: 50% ethanol extract ($77.10{\mu}g/mL$) < ethyl acetate fraction ($20.63{\mu}g/mL$) < aglycone fraction ($17.00{\mu}g/mL$) by using the 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl. In $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ system using the luminol, reactive oxygen species (ROS) scavenging activities (total antioxidant capacity, $OSC_{50}$) of aglycone fraction ($OSC_{50}=0.63{\mu}g/mL$) was the strongest among all extracts, which was much higher than L-ascorbic acid ($1.50{\mu}g/mL$). In the $^1O_2$-induced cellular damage of erythrocytes, the cellular protective effects of 50% ethanol extract (${\tau}_{50}=46.9min$) and aglycone fraction (${\tau}_{50}=122.1min$) were higher than (+)-${\alpha}$-tocopherol (${\tau}_{50}=37.7min$), known as a lipophilic antioxidant at $10{\mu}g/mL$. After cell damage induced by $400mJ/cm^2$ UVB irradiation, the cellular protective effects of ethyl acetate and aglycone fraction of M. oleifera leaves extract were showed on the concentration from 0.20 to $1.56{\mu}g/mL$. These results suggest that M. oleifera leaves extract and its fractions can function as a natural antioxidant agent in cosmetics on skin exposed to UV radiation by protecting cellular membrane against ROS.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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