Bacterial resistance to commonly used antibiotics is one of the major challenges to be solved today. Bacteriophage endolysins (Lysins) have become a hot research topic as a new class of antibacterial agents. They have promising applications in bacterial infection prevention and control in multiple fields, such as livestock and poultry farming, food safety, clinical medicine and pathogen detection. However, many phage endolysins display low bactericidal activities, short half-life and narrow lytic spectrums. Therefore, some methods have been used to improve the enzyme properties (bactericidal activity, lysis spectrum, stability and targeting the substrate, etc) of bacteriophage endolysins, including deletion or addition of domains, DNA mutagenesis, chimerization of domains, fusion to the membrane-penetrating peptides, fusion with domains targeting outer membrane transport systems, encapsulation, the usage of outer membrane permeabilizers. In this review, research progress on the strategies for improving their enzyme properties are systematically presented, with a view to provide references for the development of lysins with excellent performances.
We compared in vitro antibacterial activity of DWC-751, a new parenteral cephalosporin antibiotic, with those of cefpirome (CPR), cefotaxime (CTX) and ceftazidime (CAZ). DWC-751 showed a broad antimicrobial spectrum against Gram-positive and negative bacteria. The antibacterial activity of DWC-751 against Stapylococcus aureus was equal to that of CPR and superior to those of CTX and CAZ. The activity of it against Excherichia coli was more potent than those of CPR, CTX and CAZ. Against Pseudomonas aeruginosa, DWC-751 was slightly inferior to that of CAZ and superior to those of CPR and CTX. The antibacterial activity of DWC-751 was superior to those of CPR, CTX and CAZ against clinical isolates and ofloxacin resistant strains. DWC-751 showed bactericidal action against Escherichia coli at concentrations close to the MIC and induced the formation of filament and burge and lysis of Escherichia coli in a microscopic examination.
Almost all melanoma cells express at least one member of the MAGE-A antigen family, making the cytotoxic T cells (CTLs) epitopes with cross-immunizing potential in this family attractive candidates for the broad spectrum of anti-melanoma immunotherapy. In this study, four highly homologous peptides (P264: FLWGPRALA, P264I9: FLWGPRALI, P264V9: FLWGPRALV, and P264H8: FLWGPRAHA) from the MAGE-A antigens were selected by homologous alignment. All four peptides showed high binding affinity and stability to HLA-A$^*02:01$ molecules, and could prime CTL immune responses in human PBMCs and in HLA-A$^*02:01/K^b$ transgenic mice. CTLs elicited by the four epitope peptides could cross-lyse tumor cells expressing the mutual target antigens, except MAGE-A11 which was not tested. However, CTLs induced by P264V9 and P264I9 showed the strongest target cell lysis capabilities, suggesting both peptides may represent the common CTL epitopes shared by the eight MAGE-A antigens, which could induce more potent and broad-spectrum antitumor responses in immunotherapy.
This study was performed to investigate thermophilic bacteria from soil having broad antifungal spectrum against Rhizoctonia solani, Colletotrichum gloeosporioides, Phytophthora capsici, Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici, and Botrytis cinerea. One isolate selected could resist heat shock of $60^{\circ}C$ for one hour, and had broad antifungal activity in dual culture assay against all tested fungal pathogens and was identified as Bacillus amyloliquefaciens Y1 using 16S rRNA gene sequence. Further investigation for antifungal activity of bacterial culture filtrate (BCF) and butanol crude extract (BCE) of various concentrations showed broad spectrum antifungal activity and fungal growth inhibition significantly increased with increasing concentration with highest growth inhibition of 100% against R. solani with 50% BCF and 11 mm of zone of inhibition against R. solani with 4 mg BCE concentration. Treatment of butanol crude extract resulted in deformation, lysis or degradation of C. gloeosporioides and P. capsici hyphae. Furthermore, B. amyloliquefaciens Y1 produced volatile compounds inhibiting growth of R. solani (70%), C. gloeosporioides (65%) and P. capsici (65-70%) when tested in volatile assay. The results from the study suggest that B. amyloliquefaciens Y1 could be a biocontrol candidate to control fungal diseases in crops.
Jin Hee Ok;Hae Jin Jeong;An Suk Lim;Hee Chang Kang;Ji Hyun You;Sang Ah Park;Se Hee Eom
ALGAE
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v.38
no.1
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pp.39-55
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2023
Exploring mixotrophy of dinoflagellate species is critical to understanding red-tide dynamics and dinoflagellate evolution. Some species in the dinoflagellate genus Karenia have caused harmful algal blooms. Among 10 Karenia species, the mixotrophic ability of only two species, Karenia mikimotoi and Karenia brevis, has been investigated. These species have been revealed to be mixotrophic; however, the mixotrophy of the other species should be explored. Moreover, although K. mikimotoi was previously known to be mixotrophic, only a few potential prey species have been tested. We explored the mixotrophic ability of Karenia bicuneiformis, Karenia papilionacea, and Karenia selliformis and the prey spectrum of K. mikimotoi by incubating them with 16 potential prey species, including a cyanobacterium, diatom, prymnesiophyte, prasinophyte, raphidophyte, cryptophytes, and dinoflagellates. Cells of K. bicuneiformis, K. papilionacea, and K. selliformis did not feed on any tested potential prey species, indicating a lack of mixotrophy. The present study newly discovered that K. mikimotoi was able to feed on the common cryptophyte Teleaulax amphioxeia. The phylogenetic tree based on the large subunit ribosomal DNA showed that the mixotrophic species K. mikimotoi and K. brevis belonged to the same clade, but K. bicuneiformis, K. papilionacea, and K. selliformis were divided into different clades. Therefore, the presence or lack of a mixotrophic ability in this genus may be partially related to genetic characterizations. The results of this study suggest that Karenia species are not all mixotrophic, varying from the results of previous studies.
With an increase in the consumption of non-heated fresh food, foodborne shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) has emerged as one of the most problematic pathogens worldwide. Endolysin, a bacteriophage-derived lysis protein, is able to lyse the target bacteria without any special resistance, and thus has been garnering interest as a powerful antimicrobial agent. In this study, rV5-like phage endolysin targeting E. coli O157:H7, named as LysECP26, was identified and purified. This endolysin had a lysozyme-like catalytic domain, but differed markedly from the sequence of lambda phage endolysin. LysECP26 exhibited strong activity with a broad lytic spectrum against various gram-negative strains (29/29) and was relatively stable at a broad temperature range (4℃-55℃). The optimum temperature and pH ranges of LysECP26 were identified at 37℃-42℃ and pH 7-8, respectively. NaCl supplementation did not affect the lytic activity. Although LysECP26 was limited in that it could not pass the outer membrane, E. coli O157: H7 could be effectively controlled by adding ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and citric acid (1.44 and 1.14 log CFU/ml) within 30 min. Therefore, LysECP26 may serve as an effective biocontrol agent for gram-negative pathogens, including E. coli O157:H7.
In an effort to discover an alternative antibiotic for treating infections with methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), Pseudomonas sp. UJ-6, a marine bacterium that exhibited antibacterial activity against MRSA, was isolated. The culture broth and its ethyl acetate extract exhibited bactericidal activity against MRSA. The extract also exhibited antibacterial activity against gram-negative bacteria, which were not susceptible to vancomycin. The treatment of MRSA with the extract resulted in abnormal cell lysis. The extract retained >95% of its anti-MRSA activity after heat treatment for 15 min at $121^{\circ}C$. Thus, although most antibiotics are unstable under conditions of thermal stress, Pseudomonas sp. UJ-6 produces a heat-stable anti-MRSA substance. The results of this study strongly suggest that Pseudomonas sp. UJ-6 can be used to develop a novel, heat-stable, broad-spectrum antibiotic for the treatment of MRSA infections.
Hamzah, Haider M.;Salah, Reyam F.;Maroof, Mohammed N.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.28
no.10
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pp.1654-1663
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2018
Finding a safe and broad-spectrum medication is a goal of scientists, pharmacists, and physicians, but developing and fabricating the right medicine can be challenging. The current study describes the formation of silver nanoparticles (AgNPs) by Fusarium mangiferae. It involves the antibiofilm activity of the nanoparticles against Staphylococcus aureus. It also involves cytotoxic effect against mammalian cell lines. Well-dispersed nanoparticles are formed by F. mangiferae. The sizes of the nanoparticles were found to range from 25 to 52 nm, and UV-Vis scan showed absorption around 416-420 nm. SEM, TEM, and AFM results displayed spherical and oval shapes. Furthermore, the FTIR histogram detected amide I and amide II compounds responsible for the stability of AgNPs in an aqueous solution. AgNPs were observed to decrease the formation of biofilm at 75% (v/v). DNA reducing, smearing, and perhaps fragmentation were noticed after treating the bacterial cells with 50% (v/v). Additionally, cell lysis was detected releasing proteins in the supernatant. It was also observed that the AgNPs have the ability to cause 59% cervical cancer cell line (HeLa) deaths at 25% (v/v), however, they showed about 31% toxicity against rat embryo fibroblast transformed cell lines (REF). The results of this study prove the efficiency of AgNPs as an antibiofilm against S. aureus, suggesting that AgNPs could be an alternative to antibiotics. It must also be emphasized that AgNPs displayed cytotoxic behavior against mammalian cell lines. Further studies are needed for assessing risk in relation to the possible benefit of prescribing AgNPs.
An allium rhizobacterium Serratia plymuthica AL-1 was previously selected as a biocontrol agent of allium white rot. The chitinase from S. plymuthica AL-1 produced in medium containing colloidal chitin was purified by ammonium sulfate precipitation (40~70%), affinity adsorption, column chromatography on DEAE-sephadex A-50 and sephadex C-200 gel filtration. The enzyme was purified 10.8-fold with a yield of 7.3% from the starting culture broth. The purified chtinase gave a single band on sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, it's molecular weight was estimated to be 55 kDa. The optimum pH and temperature of the purified enzyme were pH 5.5 and $55^{\circ}C$, respectively and it is stable up to $50^{\circ}C$ and maintains around 90% of its activity for 60min. The enzyme were activated by $Ca^{2+}$, $Mn^{2+}$ and $Mg^{2+}$ and inhibited by $Cu^{2+}$, SDS, $\rho$-CMB, MIA, respectively. The purified chitinase showed broad spectrum of antifungal activities against plant pathogenic fungi Sclerotium cepivoruin, Alternana alternnta, Colletotrichum glceosporioidrs, Phoma sp., Sclerotinia sclerotiorum, Stemphylium solani, Fusarium oxysporium f. sp. niveum but rarely inhibited Phytophthora capsici and Pythium ultimum.. The purified chitinase from S. plymuthica AL-1 caused swelling, lysis, deceleration and degradation of the hyphal tips of S. sczerotiorum causing allium white rot. It suggest that S. prymuthica AL-1 chitinase play an important part in the bifunctional chitinase / lysozyme activity.
Pinus rigida Miller leaf extract (PRLE) showed antimicrobial activity remarkably against food pathogenic and spoilage bacteria at concentrations of $100{\sim}250{\mu}g/mL$. Alcohol-soluble PRLE had higher antimicrobial activity against Staphylococcus aureus and E-coli than any other-soluble PRLE such as butanol, ethyl acetate, ether and water. As PRLE concentration increased alcohol-soluble PRLE increased the remarkable inhibitory zone of microbial growth on the microbial media. PRLE showed good stability against temperature and pH in the range of $40{\sim}150^{\circ}C$ and $4{\sim}11$, respectively. This may indicate that PRLE can be a potential anti-microbial agent for industrial application. In addition, SEM of Listeria monocytogenes suggested that it antimicrobial component would perturb the functions of microbial cell membranes synergistically. In the feeding experiment the formaldehyde content in the serum of formalin-fed and PRLE-treated me decreased remarkably due to the lysis of formaldehyde and the rate of hemoglobin biosynthesis was recovered to the orignal state within a short breeding time.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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