Background: Ginsenosides are the characteristic and principal components which manifest a variety of the biological and pharmacological activities of the roots and rhizomes of Panax ginseng (GRR). This study was carried out to qualitatively and quantitatively determine the ginsenosides in the cultivated and forest GRR. Methods: A rapid and sensitive ultra-high-performance liquid chromatography coupled with diode-array detector and quadrupole/time of flight tandem mass spectrometry (UPLC-DAD-QTOF-MS/MS) was applied to the qualitative analysis of ginsenosides and a 4000 QTRAP triple quadrupole tandem mass spectrometer (HPLC-ESI-MS) was applied to quantitative analysis of 19 ginsenosides. Results: In the qualitative analysis, all ingredients were separated in 10 min. A total of 131 ginsenosides were detected in cultivated and forest GRR. The method for the quantitative determination was validated for linearity, precision, and limits of detection and quantification. 19 representative ginsenosides were quantitated. The total content of all 19 ginsenosides in the forest GRR were much higher than those in the cultivated GRR, and were increased with the growing ages. Conclusion: This newly developed analysis method could be applied to the quality assessment of GRR as well as the distinction between cultivated and forest GRR.
For precise identification of a Lactobacillus K1 isolate, LC-MS/MS analysis of the putative surface layer protein was performed. The results obtained from LTQ-FT-ICR mass spectrometry confirmed that the analyzed protein spot is the surface layer protein originating from Lb. helveticus species. Moreover, the identified protein has the highest similarity with the surface layer protein from Lb. helveticus R0052. To evaluate the proteomic study, multilocus sequence analysis of selected housekeeping gene sequences was performed. Combination of 16S rRNA sequencing with partial sequences for the genes encoding the RNA polymerase alpha subunit (rpoA), phenylalanyl-tRNA synthase alpha subunit (pheS), translational elongation factor Tu (tuf), and Hsp60 chaperonins (groEL) also allowed to classify the analyzed isolate as Lb. helveticus. Further classification at the strain level was achieved by sequencing of the slp gene. This gene showed 99.8% identity with the corresponding slp gene of Lb. helveticus R0052, which is in good agreement with data obtained by nano-HPLC coupled to an LTQ-FT-ICR mass spectrometer. Finally, LC-MS/MS analysis of surface layer proteins extracted from three other Lactobacillus strains proved that the proposed method is the appropriate molecular tool for the identification of S-layer-possessing lactobacilli at the species and even strain levels.
Abnormal glycosylation can significantly affect the intrinsic functions (i.e., stability and solubility) of proteins and the extrinsic protein interactions with other biomolecules. For example, recombinant glycoprotein therapeutics needs proper glycosylation for optimal drug efficacy. Therefore, there has been a strong demand for rapid, sensitive and high-through-put glycomics tools for real-time monitoring and fast validation of the biotherapeutics glycosylation. Although liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) is one of the most powerful tools for the characterization of glycan structures, it is generally time consuming and requires highly skilled personnel to collect the data and analyze the results. Recently, as an alternative method, matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-MS), which is a fast, robust and easy-to-use instrumentation, has been used for quantitative glycomics with various chemical derivatization techniques. In this review, we highlight the recent advances in MALDI-MS based quantitative glycan analysis according to the chemical derivatization strategies. Moreover, we address the application of MALDI-MS for high-throughput glycan analysis in many fields of clinical and biochemical engineering.
수용액상에 존재하는 3-monochloropropane-1,2-diol (3-MCPD)의 LC-MS를 이용한 분석방법을 개발하였다. 수용액 시료에 수산화나트륨 용액을 첨가하여 강알칼리 상태를 유지시킨 후, 3-MCPD의 유도체화를 위하여 benzoyl chloride $25{\mu}L$을 넣어 직접 반응시켰다. 반응 후 유도체를 pentane으로 추출하여 LC-MS의 selected ion monitoring (SIM) 법으로 정량하였다. 분석결과 검량선은 $1.0-100{\mu}g/mL$ 농도범위에서 $r^2=0.992$의 상관관계 계수를 갖는 좋은 직선성을 나타내었으며, 검출한계는 $0.01{\mu}g/mL$ 이하였다. LC-MS에 의한 분석방법의 회수율은 92.3-98.0%이었다.
마이크로소프트사의 보안공학센터인 MSEC(Microsoft Security Engineering Center)에서 윈도우즈 비스타 운영체제 출시 전 14개월 동안 약 3억 5천만 개의 퍼징 테스트를 수행하였고, 이를 통해 수집된 크래시들을 분석하여 발생 유형별로 분류하고 이들의 위험도를 판별한 데이터를 기반으로 !exploitable 이라는 크래시 분석도구를 개발하였다. 본 논문에서는 MS 크래시 분석도구의 크래시 위험도 판단방법에 대해 분석한 결과를 기술하며, 분석을 통해 발견된 도구의 문제점을 알아보고 개선방안을 제시한다.
The effects of column length and particle size on the efficiency of separation and characterization of phospholipids (PLs) are investigated using nanoflow liquid chromatography-electrospray ionization-tandem mass spectrometry (nLC-ESI-MS-MS). Since PLs are associated with cell proliferation, apoptosis, and signal transduction, it is of increasing interests in lipidomics to establish reliable analytical methods for the qualitative and quantitative profiling of PLs related to biomarker development in adult diseases. Due to the complexity of PLs, the preliminary separation of PLs is necessary prior to MS analysis. In this study, length of capillary column and the particle size of reversed phase ($C_{18}$) packing materials are varied to find a reliable condition for the high speed and high resolution separation using 8 PL standard mixtures. From experiments, it was found that a capillary column of nLC-ESI-MS-MS analysis for PL mixtures can be minimized to a 5 cm long pulled tip column packed with 3 ${\mu}m$$C_{18}$ particles without losing resolution.
The purpose of this study was to analyze oxidized methionines in the myosin isoforms of porcine longissimus thoracis, psoas major, and semimembranosus muscles by liquid chromatography (LC) and mass spectrometry (MS). A total of 836 queries matched to four myosin isoforms (myosin-1, -2, -4, and -7) were analyzed and each myosin isoform was identified by its unique peptides (7.3-13.3). Forty-four peptides were observed from all three muscles. Seventeen peptides were unique to the myosin isoform and the others were common peptides expressed in two or more myosin isoforms. Five were identified as oxidized peptides with one or two methionine sulfoxides with 16 amu of mass modification. Methionines on residues 215 (215), 438 (438), 853 (851), 856 (854), 1071 (1069), and 1106 (1104) of myosin-1 (myosin-4) were oxidized by the addition of oxygen. Myosin-2 had two oxidized methionines on residues 215 and 438. No queries matched to myosin-7 were observed as oxidized peptides. LC-MS/MS allows analysis of the oxidation of specific amino acids on specific residue sites, as well as in specific proteins in the food system.
There has been few studies of either domestic or international to apply CCT-ICP-MS for the precise analysis of As and Cr components associated with airborne particulate matter. To date, the use of CCT-ICP-MS is strongly recommended for the accurate analysis of the toxic trace metals; this is because CCT-ICP-MS technique prevents polyatomic spectral interferences involved in the determination of As and/or Cr components. Taking advantage of CCT-ICP-MS technique, the measurements of about 20 metals were undertaken in this study. The standard reference material (NIST SRM 2783) was used for analytical quality control. To improve analytical accuracy and of acid efficiency, we selected nitric acid based on a test of three kinds of acid for microwave digestion method 1 ) nitric acid. 2) nitric acid and hydrogen peroxide. and 3) nitric acid and perchloric acid. When this method was employed, relative errors to SRM values of Al, As, Cr Fe, Mg, Mn, Pb, Sb, V, and Zn fell below 20%, while those or Ca, Si, and Ti were higher than 20%. The overall results of our study show that the concentrations of As and V determined by CCT-ICP-MS were satisfied with the certificated values within a relative error of 20e1c, whereas those determined by ICP-MS were 10 times higher than the certificated values.
Salicornia herbacea, a noted halophyte, has been widely researched for its diverse physiological activities. The continuous exploration of its compounds is essential. This study employed gas chromatography (GC) coupled with mass spectrometry (MS) for qualitative analysis. This involved pretreatment including trimethylsilyl (TMS) derivatization of the S. herbacea extract, facilitating its GC analysis. Five compounds, including various fatty acids and β-sitosterol, were identified by direct analysis of the methanol extract of S. herbacea without pretreatment by GC-MS. Conversely, the analysis of the TMS-derivatized extract revealed 28 distinct peaks. Quantitative analysis further indicated that the predominant compounds in the S. herbacea extract were sugars and sugar derivatives, notably glucose, fructose, and glucitol. The collective concentration of these sugars and its derivatives amounted to 116.45 mg/g, representing 11.6% of the dry weight of the raw S. herbacea. Following sugars and their derivatives, fatty acids constituted the next most abundant group of compounds. However, the presence of amino acids and organic acids was relatively low.
Liquid-chromatography coupled with electrospray-ion trap mass spectrometry was applied to the analysis of the eleutherosides B and E in the Eleutherococcus senticosus cortexes. The optimum ESI/MS results were obtained in the positive ion mode using extracted ion chromatogram targeting Na-adduct molecular ion of each compound. This method allowed rapid and simple gradient separation of underivatized eleutherosides B and E without pre-purification steps at very low concentration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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