• 제목/요약/키워드: HPLC on-line $ABTS^+$ screening

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On-line Screening HPLC-ABTS를 이용한 강황으로부터 Curcuminoids의 생물활성 분석 (Bioactivity Analysis of Curcuminoids from Turmeric using On-line Screening HPLC-ABTS)

  • 최선도
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제56권3호
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    • pp.137-139
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    • 2013
  • 강황(Curcuma longa)으로부터 bisdemethoxycurcumin (BDMC), demethoxycurcumin (DMC) 및 curcumin의 생물 활성을 offline-ABTS 측정법과 on-line screening high-performance liquid chromatography (HPLC)-ABTS 측정법을 적용한 빠른 스크리닝을 통해 정량 및 성분 분리를 하였다. 이때, off-line-ABTS와 on-line screening HPLC-ABTS 비교는 미미한 오차를 보여주었다.

On-line Screening HPLC-ABTS+ assay를 이용한 청호로부터 유용성분의 항산화 활성 분석 (Antioxidant Activity Analysis of Useful Compounds from Artemisiae Annuae Herba Using On-line Screening HPLC-ABTS+ Assay)

  • 이광진;마진열
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제57권4호
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    • pp.301-305
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    • 2014
  • On-line screening high performance liquid chromatography (HPLC)-$ABTS^+$ assay를 이용한 청호로부터 chlorogenic acid, caffeic acid, vitexin, queretin, aremisinin의 항산화 활성을 온라인스크리닝 하였다. 이때 침적방법을 적용한 추출시간과 추출용매 조성으로부터 추출효율을 확인하였다. 이 결과 100% 물 추출물에서 수율이 가장 좋왔고 chloroenic acid의 항산화 활성이 가장 높았다. 또한 on-line screening HPLC-$ABTS^+$ assay 분석은 천연물에서 항산화 활성을 신속하게 탐색하는데 효율적이다.

HPLC On-line $ABTS^+$ Screening을 이용한 왕대(Phyllostachys bambusoides) 잎으로부터 Homoorientin의 확인 (Rapid Identification of Homoorientin from Phyllostachys bambusoides Leaves by HPLC On-line $ABTS^+$ Screening Method)

  • 이광진;량춘;양혜진;마진열
    • 약학회지
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    • 제56권4호
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    • pp.217-221
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    • 2012
  • To determination of antioxidant substance homoorientin, from Phyllostachys bambusoides leaves, the ultrasonic extraction and HPLC on-line $ABTS^+$ screening method were empolyed. Also, the various experimental variables such as the frequency and time of ultrasonic system were investigated and homoorientin was extracted efficiently at the low frequency 35 kHz and the extraction time 60 min. The values were positive peak 1574.71 (relative area, 23.67%) and negative peak 6924.34 (relative area, 1.23%), respectively. This HPLC on-line $ABTS^+$ screening method was rapid and efficient to search for antioxidants from natural products. These results will provide a database for investigating the constituents of natural products and the resources of pharmaceutical and cosmetic products.

HPLC On-line $ABTS^{+}$ Antioxidant screening 시스템을 이용한 한국산 녹차로부터 Catechin compounds의 황산화 활성분석 (Antioxidant activity analysis of Catechin compounds in Korean green tea using HPLC On-line $ABTS^{+}$ Antioxidant screening system)

  • 이광진
    • KSBB Journal
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    • 제23권1호
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    • pp.96-100
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    • 2008
  • 한국산 녹차로부터 HPLC On-line $ABTS^{+}$ screening기법을 사용하여 catechin compounds의 특성중의 하나인 항산화활성을 빠르게 분석하였으며 녹차로부터 catechin compound의 추출을 다양한 온도와 시간의 추출방법을 적용하였다. 전 처리한 추출액에 포함된 catechin compounds을 분석하고 최적의 추출조건을 실험적으로 모색하였다. 실험결과에 의하면 추출온도 $60^{\circ}C$, 추출시간 3분으로 추출한 시료가 항산화활성이 가장 우수하였다.

On-line Screening HPLC-ABTS+ Assay을 이용한 산청목으로부터 Salidroside의 분리 및 생물활성 분석 (Isolation and Bioactivity Analysis of Salidroside from Acer tegmentosum using On-line Screening HPLC-ABTS+ Assay)

  • 이광진;송나영;마진열
    • KSBB Journal
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    • 제29권2호
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    • pp.124-130
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    • 2014
  • Acer tegmentosum was a traditional Korean herbal medicine showing various pharmacological activities. In this work, A. tegmentosum were extracted with boiling water and then successively partitioned with dichloromethane, ethyl acetate, n-butyl alcohol (n-BuOH), and water. Salidoside, the target compound, was purified in n-BuOH phase using a chromatography method. For the analysis of salidoside, TLC and LC-MS were used as well as on-line screening $HPLC-ABTS^+$ assay with three different wavelength of 254, 280, and 320 nm. An amount of 1.34 g of salidoside were obtained in n-BuOH phase fromAcer tegmentosum was a traditional Korean herbal medicine showing various pharmacological activities. In this work, A. tegmentosum were extracted with boiling water and then successively partitioned with dichloromethane, ethyl acetate, n-butyl alcohol (n-BuOH), and water. Salidoside, the target compound, was purified in n-BuOH phase using a chromatography method. For the analysis of salidoside, TLC and LC-MS were used as well as online screening $HPLC-ABTS^+$ assay with three different wavelength of 254, 280, and 320 nm. An amount of 1.34 g of salidoside were obtained in n-BuOH phase from 3 kg of dry biomass. The on-line screening $HPLC-ABTS^+$ assay is rapid and efficient tool to search bioactivity from A. tegmentosum. 3 kg of dry biomass. The on-line screening $HPLC-ABTS^+$ assay is rapid and efficient tool to search bioactivity from A. tegmentosum.

On-line screening HPLC-ABTS를 이용한 땅콩새싹으로부터 Resveratrol의 생물활성 분석 (Bioactivity analysis of Resveratrol from peanut sprouts using On-line screening HPLC-ABTS)

  • 김영식
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제14권8호
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    • pp.4100-4105
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    • 2013
  • 땅콩새싹은 많은 아시아 국가에서 오랜 시간 동안 식품으로 사용되어왔다. 그중에서 resveratrol은 항산화 및 항암 등의 생리 활성 효과가 있다. 본 연구는 resveratrol은 침적방법(추출시간 3h, $25^{\circ}C$)을 이용하여 추출하였다. 그리고 on-line screening HPLC-ABTS을 사용하여 추출 효율 및 함량을 확인 하였다. 추출액은 상업용 C18 역상 고성능액체 크로마토그래피에 의한 이동상으로 물과 아세토나이트릴을 사용하여 선형기울기용매법으로 분리 분석을 하였다. 유속은 1.0mL/min, 주입부피는 $10{\mu}L$, 컬럼오븐 온도 $40^{\circ}C$, 파장 320nm에서 수행되었다. 실험결과, 50% 에탄올에서 resveratrol 함량이($0.310-0.346{\mu}g/mL$) 100% 물과 에탄올 조성보다 높았다. 또한 100% 물 추출물의 수율은 2.040-2.145%로 낮았다. 위의 결과 on-line HPLC-ABTS 분석은 식물추출물의 생물활성을 빠르고 특화된 강력한 기술이 될 수 있음을 보여주었다. 이것은 제약 및 기능성 소재로서의 응용 가능성을 나타내었다.

초음파를 이용한 오죽으로부터 Flavone C-glycosioes의 추출 및 항산화활성분석 향상 (Enhanced extraction and Antioxidant activity analysis of Flavone C-glycosides from Black bamboo using Ultrasonic wave)

  • 최선도;이광진
    • KSBB Journal
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    • 제23권4호
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    • pp.297-302
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    • 2008
  • 오죽으로부터 HPLC On-line $ABTS^{+}$ screening기법을 사용하여 Flavone C-glycosides의 특성중의 하나인 항산화활성을 빠르게 분석하였으며, 오죽으로부터 homoorientin와 orientin의 추출을 다양한 초음파 주파수와 시간의 추출방법을 적용하였다. 전처리한 추출액에 포함된 오죽의 Flavone C-glycosides을 분석하고 최적의 추출조건을 실험적으로 모색하였다. 실험결과에 의하면 전체 수율에서는 Frequency 72 KHz, 60분에서 3.37 mg으로 추출 효율이 높았고, homoorientin와 orientin의 항산화활성은 Frequency 35 KHz, 30분으로 추출한 시료가 73.8%와 14.8%로 가장 우수하였다.

Hyphenated-HPLC 기술을 활용한 홍화씨의 항산화 성분 분석 (The Rapid Detection of Antioxidants from Safflower Seeds (Carthamus tinctorius L.) Using Hyphenated-HPLC Techniques)

  • 김수진;김상민;강석우;엄병헌
    • 한국식품과학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.414-419
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    • 2010
  • 본 연구에서는 세 종류의 hyphenated-HPLC 기술을 활용하여 홍화씨로부터 3종의 항산화 화합물의 구조를 규명하였다. 우선 온라인 항산화 분석 장치를 통하여 홍화씨 추출물로부터 ABTS 라디칼 소거활성을 가지는 성분을 검색 및 항산화 정량을 수행한 후, 단일 물질로 분리되고, 항산화 활성을 가지는 세 가지 화합물에 대해서 구조 규명을 시도하였다. 우선 LC-NMR을 이용하여 stop-flow mode에서 이들 세 가지 화합물에 대해 $^1H$-NMR spectrum데이터를 얻은 결과 각 화합물은 8'-hydroxyarctigenin-4'-O-$\beta$-D-glucoside, N-(p-coumaroyl) serotonin, N-feruloylserotonin으로 확인되었다. 그리고 LC-ESI-MS를 활용하여 각 화합물에 대한 분자량에 대한 정보를 얻어 LC-NMR에서 규명된 화합물이 정확함을 다시 한 번 확인할 수 있었다. 본 연구에서는 기존의 탐색방법인 여러 크로마토그래피 방법이나 preparative HPLC 등을 이용하여 활성물질을 분리하고 off-line NMR, MS 등을 활용하여 구조를 규명하는 방법에 비하여, hyphenated-HPLC 방법을 활용하여 혼합물 상태인 추출물을 분리하지 않고 신속하게 단일 성분의 구조를 규명하고, 또한 각각의 성분에 대한 항산화도를 측정할 수 있다는 장점이 있음을 증명하였다. 이는 천연물 또는 식품 분야의 연구에 있어 추출물의 항산화 성분을 분석하고 그 구조를 신속 간편하게 확인할 수 있으므로 항산화 성분 탐색 및 변이 연구에 매우 유용하리라 생각된다.

초음파를 이용한 이대와 왕대 잎으로부터 항산화물질 Homoorientin의 추출효율 향상 (Enhanced effect extraction of Antioxidant substance Homoorientin from Pseudosasa japonica and Phyllostachys bambusoides leaves using Ultrasonic wave system)

  • 이광진;신용국;김영식
    • KSBB Journal
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    • 제24권2호
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    • pp.189-194
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    • 2009
  • 대나무 (이대와 왕대) 잎으로부터 HPLC on-line ABTS screening기법을 사용하여 flavone C-glycosides의 homoorientin의 항산화활성을 빠르게 분석하였으며, 이대와 왕대 잎으로부터 homoorientin의 추출을 다양한 초음파 에너지와 시간의 추출방법을 적용하였다. 전 처리한 추출액에 포함된 이대와 왕대 잎으로부터 homoorientin을 분석하고 최적의 추출조건을 실험적으로 모색하였다. 실험결과에 의하면 왕대는 이대 잎보다 homoorientin의 함량이 7배 정도 높았으며, 최적 추출은 35 kHz, 60 min에서 (positive) 피크면적 1574.71, 23.67%와 (negativity) 피크면적 6924.34, 1.23%로 왕대 잎에서의 추출 효율이 가장 우수 하였다.

Identification and Characterization of a Novel Antioxidant Peptide from Bovine Skim Milk Fermented by Lactococcus lactis SL6

  • Kim, Sang Hoon;Lee, Ji Yoon;Balolong, Marilen P.;Kim, Jin-Eung;Paik, Hyun-Dong;Kang, Dae-Kyung
    • 한국축산식품학회지
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    • 제37권3호
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    • pp.402-409
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    • 2017
  • A novel peptide having free radical scavenging activity was separated, using an on-line high-performance liquid chromatography (HPLC) - ABTS screening method, from bovine skim milk fermented by Lactococcus lactis SL6 (KCTC 11865BP). It was further purified using reverse phase-HPLC (RP-HPLC) and sequenced by RP-HPLC-tandem mass spectrometry. The amino acid sequence of the identified peptide was determined to be Phe-Ser-Asp-Ile-Pro-Asn-Pro-Ile-Gly-Ser-Glu-Asn-Ser-Glu-Lys-Thr-Thr-Met-Pro-Leu-Trp (2,362 Da), which is corresponding to the C-terminal fragment of bovine ${\alpha}_{s1}$-casein (f179-199). The hydroxyl radicals scavenging activity ($IC_{50}$ $28.25{\pm}0.96{\mu}M$) of the peptide chemically synthesized based on the MS/MS data showed a slightly lower than that of the natural antioxidant Trolox ($IC_{50}$ $15.37{\pm}0.52{\mu}M$). Furthermore, derivatives of the antioxidant peptide were synthesized. The antioxidative activity of the derivatives whose all three proline residues replaced by alanine significantly decreased, whereas replacement of two proline residues in N-terminal region did not affect its antioxidative activity, indicating that $3^{rd}$ proline in C-terminal region is critical for the antioxidative activity of the peptide identified in this study. In addition, N-terminal region of the antioxidant peptide did not show its activity, whereas C-terminal region maintained antioxidative activity, suggesting that C-terminal region of the peptide is important for antioxidative activity.