이 연구의 목적은 각 분절의 마커세트와 무릎관절 중심 정의가 3차원 무릎 관절각을 산출하는데 얼마나 민감하게 영향을 미치는지를 연구하였다. 자료수집은 1명을 실험대상자로 하여 두 가지 형태의 각기 다른 분절의 정의와 무릎관절의 중심을 나타내는 반사마커들을 동시에 오른쪽 하지에 부착시켜 실험을 실시하였다. 실험대상자의 달리기동작 중 좌측으로 45도 방향전환동작의 지지기를 분석하였다. 이를 위해서 8대의 고속카메라들을 이용하였고 달리기속도는 4m/$sec{\pm}(10%)$로 통제하였다. 하지분절의 발분절에는 하나의 마커세트를, 정강이와 대퇴분절에는 두 가지의 다른 마커세트들을 부착시켰다. 발분절에는 3개의 마커를 신발의 뒷부분에 부착하였고 정강이분절을 정의하기 위하여 첫 번째 마커세트는 경골을 중심으로 3개의 마커들을 두 번째 마커세트는 비골을 중심으로 3개의 마커를 부착하였다. 대퇴분절의 마커세트를 정의하기 위하여 첫 번째 마커세트에는 대퇴골을 중심으로 3개의 마커를 두 번째 마커세트에는 대퇴근육을 중심으로 3개의 마커들을 부착하였다. 무릎관절중심을 정의하는데 두 가지 다른 정의가 적용되었다. 첫 번째 무릎중심을 무릎의 내측과 외측의 마커들을 통해 두 마커의 중심을 무릎관절의 중심으로 정의하였다. 두 번째 무릎중심정의는 무릎의 외측부분과 슬개골의 중심에 부착된 마커들로부터의 교차점을 무릎관절중심으로 산출하였다. 무릎관절의 각도를 산출하기 위해서 JCS(Joint Coordinate System)의 정의가 적용되었고 연구의 결과는 다음과 같았다. 두 가지의 다른 분절마커세트 사이에서 무릎의 신전(extension)과 굴곡(flexion)은 유사한 형태를 나타냈으며 최대 무릎굴곡(peak knee flexion)각에서 $4.746^{\circ}$의 차이를 나타냈다. 다른 분절마커세트 사이의 회전(rotation)각과 내전(adduction)/외전(abduction)에서는 서로 다른 형태를 나타내었고, 두 마커세트간 최대무릎외측회전(peak knee external rotation)각도에서는 $15.628^{\circ}$의 차이를 나타냈다. 또한, 각 분절마커세트 내에서 두 가지의 다른 무릎관절 중심의 정의가 얼마나 무릎도 산출에 영향을 미치는지를 비교했을 때 무릎의 최대외측회전(peak external rotation)각에서 차이를 나타내었다. 첫 번째 분절마커세트의 무릎관절중심정의의 형태변화에 따라 최대외측회전각은 $0.549^{\circ}$의 차이를 나타냈고, 두 번째 분절마커 세트에서 무릎관절중심정의의 형태변화에 따라 최대외측회전각은 $0.309^{\circ}$의 차이를 나타냈다. 이와 같이 분절을 나타내는 마커세트와 무릎관절중심정의의 형태변화에 따라 무릎간을 계산하는데 있어서 결과가 다르게 산출되었다. 즉, 관절각의 계산이 분절에 부착되는 마커의 정의 혹은 위치에 매우 민감하게 영향을 받았다. 따라서 연구자가 여러 실험대상자들을 대상으로 실험시 마커세트 혹은 마커들을 동일한 위치에 가깝게 부착하는 것이 마커부착으로부터 발생하는 실험오차를 줄일 수 있을 것이다.
To analyze the genetic relationships among Korean potato cultivars and to develop cultivar identification method using DNA markers, we carried out genotyping using simple sequence repeats (SSR) analysis and developed multiplex-SSR set. Initially, we designed 92 SSR primer combinations reported previously and applied them to twenty four Korean potato cultivars. Among the 92 SSR markers, we selected 14 SSR markers based on polymorphism information contents (PIC) values. PIC values of the selected 14 markers ranged from 0.48 to 0.89 with an average of 0.76. PIC value of PSSR-29 was the lowest with 0.48 and PSSR-191 was the highest with 0.89. UPGMA clustering analysis based on genetic distances using 14 SSR markers classified 21 potato cultivars into 2 clusters. Cluster I and II included 16 and 5 cultivars, respectively. And 3 cultivars were not classified into major cluster group I and II. These 14 SSR markers generated a total of 121 alleles and the average number of alleles per SSR marker was 10.8 with a range from 3 to 34. Among the selected markers, we combined three SSR markers, PSSR-17, PSSR-24 and PSSR-24, as a multiplex-SSR set. This multiplex-SSR set used in the study can distinguish all the cultivars with one time PCR and PAGE (Polyacrylamide gel electrophoresis) analysis and PIC value of multiplex-SSR set was 0.95.
Peaches (Prunus persica) are less popular than the fresh fruits, because their flesh gets soft faster. So many breeders focused on their aim to firmness. Other breeders focused on juiciness, flavor and aroma. Breeding requires much labor, time and money. To reduce these requirements, many scientists develop many SSR, CAPS and SCAR makers. New peach varieties bred in our National Institute of Horticultural & Herbal Science (NIHHS) such as, Cheonhong, Suhong and Harhong are yellow flesh cultivars and Yumyeong, Baekmijosaeng, Baekhyang, Jinmi, Soomee, Mihong, Misshong and Yumee are white flesh cultivars. These peach cultivars are planted in orchard of Korea. To assert breeding cultivar patents and prevent patent disputes, we detected cultivar-specific DNA fragment using 235 sets of Operon RAPD primers, analyzed 134 DNA sequences and constructed SCAR primers. To confirm the cultivar-specific SCAR markers, we applied candidate SCAR primers to 30 peach cultivars widely cultivated in Korea. These selected lines are included father and mother lines that were used to develop new varieties in NIHHS. Using fourteen SCAR primer sets, we characterized thirty cultivars selected. The SCAR marker is expected to serve as molecular evidence distinguishing different peach varieties.
For development of a method for differentiation of Pleurotus eryngii cultivars, simple sequence repeats (SSR) from whole genomic DNA sequence analysis was used for genotyping and two multiplex-SSR primer sets were developed. These SSR primer sets were employed to distinguish 12 cultivars and strains. Five polymorphic markers were selected based on the genotyping results. PCR using each primer produced one to four distinct bands ranging in size from 200 to 300 bp. Polymorphism information content (PIC) values of the five markers were in the range of 0.6627 to 0.6848 with an average of 0.6775. Unweighted pairgroup method with arithmetic mean clustering analysis based on genetic distances using five SSR markers classified 12 cultivars into two clusters. Cluster I and II were comprised of four and eight cultivars, respectively. Two multiplex sets, Multi-1 (SSR312 and SSR366) and Multi-2 (SSR178 and SSR277) completely discriminated 12 cultivars and strains with 21 alleles and a PIC value of 0.9090. These results might be useful in providing an efficient method for the identification of P. eryngii cultivars with separate PCR reactions.
Sam Woong Kim;Young Jin Kim;Tae Wook Lee;Won-Jae Chi;Woo Young Bang;Tae Wan Kim;Kyu Ho Bang;Sang Wan Gal
Journal of Life Science
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v.33
no.11
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pp.897-904
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2023
This study was done to develope genetic markers with the unique characteristics of genes according to the genomic information of Bacillus velezensis K10. B. velezensis K10 maintained a total of 4,159,835 bps, which was found to encode 5,136 open reading frames (orfs). B. velezensis K10 was found to have much more gene migration due to external factors overall compared to standard strain B. velezensis JS25R. In order to discover genetic selection markers, orfs on the genome to be easily induced to gene mutation were surveyed such as recombinase, integrase, transposase, and phage-related genes. As a result of the investigation, 9 candidate markers were isolated with high possibility as genetic selection markers. Although a part in the various origin's areas showed specificities in comparison with homology, the selected markers were all existed in phage-related areas because they were relatively lower homologies in phage-related genes. PCR analysis was done on B. licheniformis K12, B. velezensis K10, B. subtilis, and B. cereus to establish them as inter-species candidate selection markers. As a result, it was confirmed that B. velezensis K10-specific PCR products were formed in a total of 6 primer sets such as BV3 and BV5 to 9. On the other hand, analysis at the subspecies level observed the formation of B. velezensis K10-specific PCR products in 4 primer sets such as BV3, 5, 8, and 9. Among them, since BV5 and BV8 were detected by very specific results, we suggest that BV5 and 8 can be used as B. velezensis K10 gene selection markers at the species and sub-species level.
This study was conducted to develop an SNP set that can be useful for marker-assisted breeding (MAB) in watermelon (Citrullus. lanatus L) using Genotyping-by-sequencing (GBS) analysis of 20 commercial elite watermelon inbreds. The result of GBS showed that 77% of approximately 1.1 billion raw reads were mapped on the watermelon genome with an average mapping region of about 4,000 Kb, which indicated genome coverage of 2.3%. After the filtering process, a total of 2,670 SNPs with an average depth of 31.57 and the PIC (Polymorphic Information Content) value of 0.1~0.38 for 20 elite inbreds were obtained. Among those SNPs, 55 SNPs (5 SNPs per chromosome that are equally distributed on each chromosome) were selected. For the understanding genetic relationship of 20 elite inbreds, PCA (Principal Component Analysis) was carried out with 55 SNPs, which resulted in the classification of inbreds into 4 groups based on PC1 (52%) and PC2 (11%), thus causing differentiation between the inbreds. A similar classification pattern for PCA was observed from hierarchical clustering analysis. The SNP set developed in this study has the potential for application to cultivar identification, F1 seed purity test, and marker-assisted backcross (MABC) not only for 20 elite inbreds but also for diverse resources for watermelon breeding.
Je, Hee-Jeong;Ahn, Jae-Wook;Yoon, Hae-Suk;Kim, Min-Keun;Ryu, Jae-San;Hong, Kwang-Pyo;Lee, Sang-Dae;Park, Young-Hoon
Horticultural Science & Technology
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v.33
no.5
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pp.722-729
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2015
Powdery mildew (PM) caused by Podosphaera aphanis is a major disease that can result in significant yield losses in strawberry (Fragaria ${\times}$ ananassa Duchesne). For preventing PM, pesticides are usually applied in strawberry. In this study, molecular markers were developed to increase breeding efficiency of PM-resistance cultivars by marker-assisted selection (MAS). An $F_2$ population derived from a cross between PM-resistance 'Seolhyang' and PM-susceptibility 'Akihime' was evaluated for disease resistance to PM and RAPD (random amplification of polymorphic DNA)-BSA (bulked segregant analysis). Among 200 RAPD primers tested, OPE10 primer amplified a 311bp-band present in with 331bp. Sequence alignment performed for searching polymorphisms and six single nucleotide polymorphism (SNP) were found in amplified regions. To develop polymorphic marker for distinguishing between resistant and susceptible, RAPD was converted to cleaved amplified polymorphic sequence (CAPS) marker. Among restriction enzymes associated with six SNPs, Eae I (Y/GGCCR) was successfully digested to 231bp in susceptible. The results suggest that the selected CAPS marker could be used for increasing efficiency of selecting powdery mildew resistant strawberry in breeding system.
Purpose This study aimed to investigate radiomics analysis of ultrasonographic images to develop a potential biomarker for predicting lymph node metastasis in papillary thyroid carcinoma (PTC) patients. Materials and Methods This study included 431 PTC patients from August 2013 to May 2014 and classified them into the training and validation sets. A total of 730 radiomics features, including texture matrices of gray-level co-occurrence matrix and gray-level run-length matrix and single-level discrete two-dimensional wavelet transform and other functions, were obtained. The least absolute shrinkage and selection operator method was used for selecting the most predictive features in the training data set. Results Lymph node metastasis was associated with the radiomics score (p < 0.001). It was also associated with other clinical variables such as young age (p = 0.007) and large tumor size (p = 0.007). The area under the receiver operating characteristic curve was 0.687 (95% confidence interval: 0.616-0.759) for the training set and 0.650 (95% confidence interval: 0.575-0.726) for the validation set. Conclusion This study showed the potential of ultrasonography-based radiomics to predict cervical lymph node metastasis in patients with PTC; thus, ultrasonography-based radiomics can act as a biomarker for PTC.
Kim, Jin A;Kim, Jung Sun;Hong, Joon Ki;Lee, Yeon-Hee;Lee, Soo In;Jeong, Mi-Jeong
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.4
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pp.438-447
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2017
Flowering is one of the most important development traits related to the production of Brassica rapa crops. After planting, a sudden low temperature triggers premature flowering, which leads to a reduction in the yield and quality of harvested production. Therefore, understanding the mechanism of flowering control is important in the agricultural productivity for preventing Brassica rapa crops. Vernalization is generally known as the main factor of flowering in the Brassica plant. However, in the subspecies of Brassica rapa, some accession such as Yellow sarson and Komatsuna display the flowering phenotype without vernalization. Circadian genes, which diurnally regulate plant physiology, have a role for photoperiodic flowering but are related to the regulation of the vernalizarion mechanism. In this report, the 22 B. rapa accession were divided into two groups, vernalization and non-vernalization, and the sequenced circadian gene, BrPRR1s. Among them, the BrPRR1b gene was found to have deletion regions, which could classify the two groups. The PCR primer was designed to amplify a short band of 422bp in the vernalization type and a long band of 451bp in the non-vernalization type. This primer set was applied to distinguish the flowering types in the 43 B. rapa accession and 4 Brassica genus crop, Broccoli, cabbage, mustard, and rape. The PCR analysis results and flowering time information of each crop demonstrated that the primer set can be used as marker to discern the flowering type in Brassica crops. This marker system can be applied to the B. rapa breeding when selecting the flowering character of new progenies or introducing varieties at an early stage. In addition, these results displayed that the circadian clock genes can be a good strategy for the flowering control of B. rapa crops.
The resistance to Tobamovirus in Capsicum spp. has been known to be controlled by five different alleles ($L^0$, $L^1$, $L^2$, $L^3$, and $L^4$) of L locus on the telomere of long arm of pepper chromosome 11. To develop a set of molecular markers differentiating all the alleles of L locus, we used five pepper differential hosts including Capsicum annuum Early California Wonder (ECW, $L^0L^0$), C. annuum Tisana ($L^1L^1$), C. annuum Criollo de Morelos 334 (CM334, $L^2L^2$), Capsicum chinense PI 159236 ($L^3L^3$), and Capsicum chacoense PI 260429 ($L^4L^4$). Developing a series of CAPS or SCAR markers specifically linked to the alleles was allowed by the sequence comparison of PCR amplicons of the $L^3$-linked markers (189D23M, A339, and 253A1R) and BAC sequences (FJ597539 and FJ597541) in the pepper differentials. Genotypes deduced by these markers in 48 out of 53 $F_1$ hybrids of commercial pepper varieties were consistent with their phenotypes by bioassay using Tobamovirus pathotypes ($P_0$, $P_1$, and $P_{1,2$). Consequently, these markers can be useful to differentiate L alleles and for breeding Tobamovirus resistance in pepper with marker-assisted selection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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