본 연구는 0.5ml straw를 이용한 정자 동결융해 시 응해 온도가 동결정자의 성상에 미치는 영향을 파악하고 미니 돼지의 동결정액에 최적화된 적정 응해 조건을 찾기 위하여 실시하였다. 정액동결 straw를 37, 50 및 $70^{\circ}C$에서 각각 5초, 10초 및 45초간 융해하여 생존율(SYBR-14/PI staining), 정자원형질막기능검사 (Hypoosmotic Swelling Test) 및 첨체반응율(CTC : chlorotetracycline staining)을 검사 한 결과, $70^{\circ}C$에서 5초간 융해한 정자의 생존율과 CTC 결과가 $37^{\circ}C$와 $50^{\circ}C$에서 10초 및 45초간 융해한 처리구보다 유의적(p<0.05)으로 높은 생존율과 낮은 비율의 첨체 반응율을 얻었다. 따라서 미니돼지의 동결 정액은 고온에서 단시간 융해를 하는 것이 정자의 성상에 유리한 것으로 사료된다.
The aim of this study was to evaluate effect of ${\alpha}$-linolenic acid (ALA) on viability, acrosome reaction and mitochondrial intact in frozen-thawed boar sperm. The boar semen was collected by gloved-hand method and cryopreserved in 20% egg yolk freezing extender containing ALA (0, 3, 5, and 10 ng/mL) with 0.05% ethanol. The frozen-boar spermatozoa were thawed at $37.5^{\circ}C$ for 45 sec in water-bath. The spermatozoa samples were evaluated the plasma membrane integrity, acrosome reaction, and mitochondrial integrity using flow cytometry. In results, population of live sperm with intact plasma membrane was significantly higher in control and 3 ng/mL ALA treatment group than ethanol group (p<0.05). In contract, dying sperms were higher in ethanol group than 3 ng/mL ALA treatment (p<0.05). Acrosomal membrane damage in all sperm population was reduced in 3 ng/mL ALA groups compared with ethanol treatment (p<0.05). However, acrosome damage in live sperm population was no significant difference among the all treatment groups. Mitochondrial integrity was not influenced by ALA treatments in both of live and all sperm population. In conclusion, this results show that supplement of ALA during the cryopreservation process could reduce the membrane damages including plasma and acrosomal membrane, whereas ALA did not influence to mitochondria in boar spermatozoa. Therefore, these results suggest that ALA can protect against the membrane damage derived cryo-stress, and cryopreservation efficiency of boar semen would be improved by use of ALA.
최근 온실가스 감축에 관한 국제적인 관심이 대두되면서 반추가축의 가스발생을 조절하기 위한 연구가 다양하게 시도되고 있다. 본 실험은 섬유질배합사료를 TDN의 유지수준과 섭취수준별 가스 발생량의 증가 정도 및 절식시 감소량을 측정함으로써 반추위내 장내발효에 의한 호흡가스의 정확한 산출근거를 구명하고자 실시하였다. 실험은 43개월 령의 평균체중 $372{\pm}11.2$ kg의 Fistula가 장착된 한우 암소를 공시하여 한우사양표준(2007)에 의거하여 TDN (kg)유지수준의 성장, 200 g/일 및 400 g/일 증체수준으로 TMR 사료를 각각 2회에 걸쳐 급여하였으며 물과 mineral block은 자유 섭식하도록 하였다. 온실가스 측정은 NDIR (Non-dispersive infrared absorption) 센서를 이용한 가스다중검출기를 이용하여 이산화탄소 및 메탄가스를 측정하였으며, 호흡챔버 내 환경온도는 $20^{\circ}C$를 유지하였다. 실험결과 급이 수준별 TDN가가 높을수록 가스발생량이 증가하는 경향을 나타내었으며, 이산화탄소 발생량에서는 유지수준에 비해 200 g/일에서 21.1%, 400 g/일에서 40.6% 수준으로 가스 발생량을 나타내었다. 메탄 발생량은 유지수준에 비해 200 g/일에서 33.5%, 400 g/일에서 69.6% 수준의 가스발생량을 나타내었다. 또한 절식 대사시 3일차부터 이산화탄소 발생량은 8%와 51% 수준으로 급격한 감소를 보였으며 메탄발생량은 각각 15%와 37%의 감소를 나타내었다. 위 결과는 향후 축산분야의 온실가스를 줄이기 위한 사양체계 및 절식대사를 통해 한우의 장내발효에 의한 가스발생조절에 대한 연구의 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
본 연구는 제주도 축산진흥원과 농촌진흥청 난지농업연구소에서 사육되고 있는 제주마 5두를 사용하여 인공질을 이용, 정액을 채취하여 정액의 일반성상 및 CASA를 이용하여 정자의 운동성과 생사 염색으로 기형률을 조사하였다. 제주마 정액의 일반 특성으로 총 정액량은 평균 42.5ml이었으며 평균 pH는 7.3, 평균 정자농도는 평균 $198.5X10^6/m1$ 이었다. 정자의 운동성은 $64.3{\pm}23.2%$이며, motility parameters 별로 VAP $70.4{\pm}28.7{\mu}m/s,\;VSL\;69.6{\pm}28.9{\mu}m/s,\;VCL\;94.1{\pm}30.0{\mu}m/s,\;ALH\;2.3{\pm}0.7{\mu}m/s,\;BCF\;7.6{\pm}1.1Hz,\;STR\;99.1{\pm}1.2%,\;LIN\;77.1{\pm}12.7%$로 나타났다. 정자 부위별 기형률은 두부가 평균 4 %, 경부가 평균 20 %, 미부가 평균 4 %로 나타났다. 이 연구를 통해 천연기념물로 지정되어 있는 제주마의 유전자원 보존과 증식을 위한 인공수정기술의 실용화를 위한 기초 자료를 제공하고자 한다.
본 연구는 돼지정액의 보다 간편하고 손쉽게 동결시킬 수 있은 방법을 확립하기 위하여 수행하였다. 돼지정액은 3시간에 걸쳐 $5^{\circ}C$까지 냉각 후 Straw에 봉입하고 다양한 방법 및 step에 의해 스티로폼 용기 내에 들어있는 $LN_2$ 중에서 동결하였다. 정자의 생존성은 $LN_2$ 표면으로부터 10 cm 위에서 10분간 정치 후 침적할 경우 가장 높게 나타났다(54.0%). Straw를 $-102^{\circ}C$에서 10분간 정치시킨 처리구가 여타구보다 높은 생존성이 얻어졌다(74.0%, P<0.05). 응해 방법에 따른 동결정액의 생존성 실험에서는 $37^{\circ}C$의 융해구가 $52^{\circ}C$ 융해구보다 유의적으로 높은 결과를 나타냈다(P<0.05). 1단계 동결 방법과 3단계 동결방법으로 돼지 정액을 동결시킨 결과 정액의 일반적 특성 및 첨체의 이상 유무를 평가하는 CTC 검사에서는 커다란 차이가 인정되지 않았다. 동결정액을 이용한 체외수정 결과에서는 상실배기 이상 발육율에서 1-step이 3-step보다 높은 발육율을 나타내었다(27.5 vs 14.7%, P<0.05). 본 실험의 결과 돼지정액 동결 시 $-102^{\circ}C$에서 10분간 정치시키는 1단계 동결방법이 간편하면서 유리한 동결 방법으로 활용될 수 있음을 보여준다.
Melatonin is induced by light information through the retina and leads to growth factor activation. Thus, we investigated the effects of melatonin by controlling the photoperiod of growing young rats. Male Sprague-Dawley rats (n=6; 4 weeks old) were divided into two experimental groups: the L/D group (normal photoperiod; light/dark: 12/12 h; lights on at 9:00 a.m.) and the L/L group (light/light: 24 h). Rat body weight and food consumption were measured daily for 8 weeks. After 8 weeks, the rats were anesthetized with a mixture of ketamine (50 mg/kg) and xylazine (10 mg/kg) and sacrificed. Tissue was then collected for RNA isolation (from brain, heart, liver, kidney, adrenal gland, testis, tibia, hind limb muscles). Also, serum was isolated from blood using a centrifugal separation. The L/L group had significantly lower body weight than the L/D group from 4 to 6 weeks (p<0.05). The L/D group had increased tissue mass, compared with the L/L group, but the difference was not statistically significant. The L/D group had a significantly higher melatonin concentration than the L/L group between the hours of midnight and 2:00 a.m (p<0.01). These results indicate that photoperiod length may affect the secretion of melatonin from the pineal gland. Also, the reduction of nocturnal melatonin secretion may retard the development of growing young rats. In future studies, we plan to compare exogenous melatonin administration with endogenous melatonin concentration induced by photoperiod control. Moreover, we will confirm whether the effects seen in pathological animal models can be reversed by controlling the photoperiod.
고속액체크로마토그라피를 이용하여 동물성 식품 중 테트라싸이클린계 항생물질의 동시분석을 시도하였다. 대상물질은 동물의 질병치료.예방, 성장촉진 및 사료효율 개선에 널리 사용되는 클로르테트라싸이클린, 독시싸이클린, 옥시테트라싸이클린 및 테트라싸이클린이었으며, 대상식품은 쇠고기, 돼지고기, 닭고기, 우유, 계란, 넙치, 우럭, 참돔, 뱀장어 및 바다가재이었다. 시료를 McIlvaine 완충액 및 20% 삼염화초산으로 추출한 후 $C_18$ 카트리지로 정제하여 고속액체크로마토그라피로 분석하였다. 이동상으로는 0.01M 수산과 아세토니트릴의 혼합용액을 85:15에서 60:40까지 기울기로 사용하였으며 UV의 검출파장은 365 nm 이었다. 평균 회수율은 71-98% 이었으며, 검출한계는 신호대 잡음비 3 이상에서 클로르테트라싸이클린은 0.022, 독시싸이클린은 0.012, 옥시테트라싸이클린은 0.012 및 테트라싸이클린은 0.009 mg/kg이었다. 대부분의 시료에서 클로르테트라싸이클린, 독시싸이클린 및 테트라싸이클린은 검출되지 않았으나, 돼지고기, 넙치 및 참돔(2시료)에서 옥시테트라싸이클린이 각각 0.04, 0.17, 0.05 및 0.08 mg/kg로 모두 잔류허용기준을 초과하지 않은 수준으로 검출되었다.
This study investigated the effects of tannic acid (TA) in the diets for weanling pigs prepared with/without supplemental Fe on performance, hematology, fecal microflora and diarrhea incidence. Limestone and calcium phosphate used in Experiment 1 and 2 were of semi-synthetic and feed-grade quality, respectively; while the trace-mineral premix used in both the experiments was prepared without any added Fe source. In Experiment 1, 108 weaned pigs (Landrace ${\times}$ Yorkshire ${\times}$ Duroc, initially 6.46 ${\pm}$ 1.04 kg BW) were allotted to 3 treatments including control (diet added with $FeSO_4$ and antibiotic), T1 (diet devoid of $FeSO_4$ and antibiotic) and T2 (T1 diet added with 125 mg/kg TA). Each treatment had 4 replicates with 9 pigs in each pen. Feeding of T1 diet had a negative effect on the performance and plasma Fe status of pigs, while addition of TA to T1 diet resulted in performance of pigs comparable to pigs fed the control diet, reduced diarrhea incidence but had a negative influence on the hematological and plasma Fe indices. Additionally, pigs fed T2 diet had fewer (p<0.05) total anaerobic bacteria, Clostridium spp. and coliforms than pigs fed T1 diet, and greater number of Bifidobacterium spp. and Lactobacillus spp. in feces when compared with pigs fed control and T1 diets. In Experiment 2, 144 weaned pigs (Landrace ${\times}$ Yorkshire ${\times}$ Duroc, initially 6.00 ${\pm}$ 1.07 kg BW) were allotted to 4 dietary treatments including control (diet added with $FeSO_4$ and antibiotic) and diets devoid of supplemental Fe added with antibiotic (An), TA and both (AnTA). Each treatment had 4 replicates with 9 pigs in each pen. Addition of An, TA or both to diets devoid of supplemental Fe did not have any effect on performance, blood hematology and plasma Fe but resulted in reduced (p<0.05) diarrhea incidence and lower (p<0.05) fecal coliform population than pigs fed the control diet. These results suggest that TA has a negative influence on blood hematology and plasma Fe status when diets are inadequate in Fe; however, TA reduced diarrhea incidence and might have antimicrobial activity.
The aims of study were to investigate the effects of intraperitoneal (i.p.) infusion of ghrelin on pancreatic ${\alpha}$-amylase outputs and the responses of pancreatic proteins to ghrelin that may relate to the pancreatic exocrine. Six male Sprague-Dawley rats (300 g) were randomly divided into two groups, a control group (C, n = 3) and a treatment group (T, $10.0{\mu}g/kg$ BW, n = 3). Blood samples were collected from rat caudal vein once time after one hour injection. The concentrations of plasma ghrelin, cholecystokinin (CCK) and alfa-amylase activity were evaluated by enzyme immunoassay (EIA) kit. Two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) analysis was conducted to separate the proteins in pancreas tissue. Results showed that the i.p. infusion of ghrelin at doses of $10.0{\mu}g/kg$ body weight (BW) increased the plasma ghrelin concentrations (p = 0.07) and elevated the plasma CCK level significantly (p < 0.05). Although there was no statistically significant, the ${\alpha}$-amylase activity tended to increase. The proteomics analysis indicated that some pancreatic proteins with various functions were up- or down-regulated compared with control group. In conclusion, ghrelin may have role in the pancreatic exocrine, but the signaling pathway was still not clear. Therefore, much more functional studies focus on these found proteins are needed in the near future.
개의 성격형질의 연구는 애견가들이 자신의 애견을 잘 이해할 수 있도록 하고, 나아가 만약 탐지견이나 안내견 같은 인간의 생활에 도움을 주는 우수견 선발에 활용될 수 있다. 본 연구에서 우리는 진도개가 가지는 성격적인 형질을 54두의 진도개를 대상으로 조사하였다. 진도개의 공격성과 사교성에 관련하는 10개의 성격문항이 견주들에 의해 채점되었으며, 점수들을 주성분분석법(Principle Component Analysis)을 통해 분석하였다. 나이, 성별, 거주지(진도군 내 또는 외) 그리고 모색(황색 또는 백색)들이 성격특성에 영향을 미칠 수 있는 변수라 판단되어, 진도개 성격 설문문항들에 대해 주성분분석 결과, 세 개의 인자가 추출되었다. 세 개의 인자는 각각 ‘공격성’, ‘unknown factor’, 그리고 ‘사교성’에 관련하는 문항들을 포함 하고 있었다. 위에서 언급한 네 가지 변수와 공격성 간에 상관성은 관찰되지 않았으나(Ps> 0.05), 모색과 사교성 사이에는 황구가 백구에 비해서 사교성이 높은 경향을 보여주었다 (F1,52 =3.213, p=0.079). 공격성이 다른 변수들과는 상관성이 적은 것으로 보아 이후 진도개의 공격성에 대한 유전학적인 연구가 가능할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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