Atropic rhinitis (AR) is one of major respiratory diseases in pigs. AR causes a great economic losses and is considered to be a multifactorial disease in which herd management, heredity, and environment. Several vaccines against have been developed commercially and used in pig farms but the efficacy of each vaccine is still questionable. In this study, one of commercial AR vaccines, which contains inactivated Bordetella bronchiseptica, Pasteurella multocida type D and their toxoid was evaluated for vaccine efficacy by challenge test. Twenty piglets were divided into four groups as follows; group I was piglets from vaccinated sows (twice before parturition); group II was piglets from vaccinated sows (same as group I) and were vaccinated at 1 day old; group III and IV were piglets without any vaccination. Groups I, II, and III were challenged by intranasal instillation of $5.3{\times}10^7$ CFU of B bronchiseptica twice and $1{\times}10^9$ CFU of P multocida five times. Group IV was control group without any vaccination and any challenge. We compared serological results, recovery rate of P multocida by polymerase chain reaction, clinical signs and pathological findings between vaccinated groups and unvaccinated groups for efficacy of the vaccine, Serological responses against B bronchiseptica and toxigenic P multocida type D were not showed evident discrepancy between vaccinated groups and unvaccinated groups assuming that the antibody responses against the vaccine is very delayed. However, growth rate, clinical signs and snout lesion grading in vaccinated groups showed more favorable than those in unvaccinated group. Therefore, AR vaccination in this study is considered to be effective in the prevention of AR in pigs.
There has been an impetus in the development of biocontrol agents (BCAs) with the removal of a number of chemical compounds in the market, especially in the European Union. This has been a major driver in the development of Integrated Pest Management systems (IPM) for both pest and disease control. For control of mycotoxigenic fungi, there is interest in both control of colonization and more importantly toxin contamination of staple food commodities. Thus the relative inoculum potential of biocontrol agent vs the toxigenic specie sis important. The major bottlenecks in the production and development of formulations of biocontrol agents are the resilience of the strains, inoculum quality and formulation with effective field efficacy. It was recently been shown for mycotoxigenic fungi such as Aspergillus flavus, under extreme climate change conditions, growth is not affected although there may be a stimulation of aflatoxin production. Thus, the development of resilient biocontrol strains which can may have conserved control efficacy but have the necessary resilience becomes critical form a food security point of view. Indeed, under predicted climate change scenarios the diversity of pests and fungal diseases are expected to have profound impacts on food security. Thus, when examining the identification of potential biocontrol strains, production and formulation it is critical that the resilience to CC environmental factors are included and quantified. The problems in relation to the physiological competence and the relative humidity range over which efficacy can occur, especially pre-harvest may be increase under climate change conditions. We have examined the efficacy of atoxigenic strains of A. flavus and Clanostachys rosea and other candidates for control of A. flavus and aflatoxin contamination of maize, and for Fusarium verticillioides and fumonisin toxin control. We have also examined the potential use of fluidized-bed drying, nanoparticles/nanospheres and encapsulation approaches to enhance the potential for the production of resilient biocontrol formulations. The objective being the delivery of biocontrol efficacy under extreme interacting climatic conditions. The potential impact of climate change factors on the efficacy of biocontrol of fungal diseases and mycotoxins are discussed.
Lungs from 109 slaughter pigs with gross lesions indicating enzootic Pneumonia of pigs(EPP) and 16 grossly normal lungs, all originating from seven different herds, were subjected to microbiological examinations. The microbiological studies were included both bacterial and mycoplasmal culture. From lungs of 125 slaughter pigs, 87.2% pigs were pneumonia lesions alone or complexly Mycoplasma spp., pasteurella multocidu(p. multocida), Streptococcus spp., and Actinobacillus pleuropneumoniue(A. pleuropneumoniae) were detected in 39.4%, 42.2%, 13.8%, and 3.7% of the pneumonic lungs, respectively. P. multocida was the most frequently isolated organism in pneumonic lungs. Mycoplasmas not isolated organism in 33.9% the pneumonic lungs even If [here are gross lessions mycoplasmas. The amounts of pneumonia in lungs with Mycoplasma spp. alone, a concurrence of Mycoplasma spp. and P. multocida, p. multocida alone, a concurrence of P. multocida and A. pleuropneumoniae, and a concurrence of Mycoplasma spp. and A pleurdpneumoniae were 10.1%, 22.7%, 18.7%, 25%, and 30%, respectively These findings indicated that p. multocida might be involved in the pathogenesis of pneumonia in slaughter pigs. Mycoplasma spp. was also, in this study, associated with higher frequency of pneumonia. The frequency of pigs snout lesion grade 0∼5 inclusive were 27.2%, 28%, 19.2%, 16%, 6.4%, and 3.2% from 125 slaughter pigs. 32(25.6%) pigs were positive and 13~30% in the pigs from seven herds were found to be infected with atrophic rhintis (AR). A total of 46 P. multocida strains In pneumonic lungs were further characterized by capsular serotyping and testing for production of dermonecrotic toxin. 42(91.3%) of strains were capsular A and 4(8.7%) were type D. Out of the type A and type D strains, 86% and 75% were toxigenic, respectively.
Fusarium graminearum species complex (FGSC) causes Fusarium head blight in small grain cereals. To date, four species (F. graminearum, F. asiaticum, F. boothii, and F. meridionale ) belonging to FGSC frequently occur in Korean cereals. In addition, we first reported the occurrence of additional species (F. vorosii ) within FGSC, which was isolated from barley, corn, and rice in Korea. Phylogenetic analysis of the Fusarium isolates of this group using combined multigene sequences confirmed species identification. Moreover, the macroconidia produced by these isolates were morphologically similar to those of the F. vorosii holotype. Chemical analysis indicated that the F. vorosii isolates produced various trichothecenes such as nivalenol and deoxynivalenol with their acetyl derivatives along with zearalenone. Pathogenicity tests demonstrated that all of the F. vorosii isolates examined were pathogenic on barley, corn, and rice with variation in aggressiveness. This study is the first report of F. vorosii in Korean cereals, their pathogenicity towards barley and corn, and their ability to produce trichothecenes and zearalenone.
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are ubiquitous in the environment. They are highly toxigenic and carcinogenic. Probiotic bacteria isolated from fermented foods were tested to check their ability to degrade and/or detoxify PAHs. Five probiotic bacteria with distinct morphologies were isolated from a mixture of 26 fermented foods co-cultured with benzo(a)pyrene (BaP) containing Bushnell Haas minimal broth. Among them, B. velezensis (PMC10) significantly reduced the abundance of BaP in the broth. PMC10 completely degraded BaP presented at a lower concentration in broth culture. B. velezensis also showed a clear zone of degradation on a BaP-coated Bushnell Haas agar plate. Gene expression profiling showed significant increases of PAH ring-hydroxylating dioxygenases and 4-hydroxybenzoate 3-monooxygenase genes in B. velezensis in response to BaP treatment. In addtion, both live and heat-killed B. velezensis removed BaP and naphthalene (Nap) from phosphate buffer solution. Live B. velezensis did not show any cytotoxicity to macrophage or human dermal fibroblast cells. Live-cell and cell-free supernatant of B. velezensis showed potential anti-inflammatory effects. Cell-free supernatant and extract of B. velezensis also showed free radical scavenging effects. These results highlight the prospective ability of B. velezensis to biodegrade and remove toxic PAHs from the human body and suggest that the biodegradation of BaP might be regulated by ring-hydroxylating dioxygenase-initiated metabolic pathway.
This study aimed to assess the incidence and distribution of toxigenic fungi in Korean oat. Toxigenic fungi were isolated from oat samples collected from 12 oat fields from heading to harvest in 2017 and 2018. A total of 745 fungal colonies were isolated based on morphology and identified using marker genes. About 92% of the fungal isolates were Fusarium spp. and others were Penicillium (5.9%) and Aspergillus (2.1%). Fusarium isolates comprised mostly of F. asiaticum (83.1%), followed by F. incarnatum (5.4%), F. proliferatum (3.5%), F. fujikuroi (2.8%), F. tricinctum species complex (FTSC) 11 (1.5%) and F. graminearum (1.0%). About 97% of F. asiaticum was nivalenol type, and 3-acetyl deoxynivalenol (3.2%) and 15-acetyl deoxynivalenol (0.4%) types also were found. Pathogenicity test of the selected Fusarium isolates revealed that F. asiaticum isolates have a wide range of virulence depending on the tested plants. F. graminearum and FTSC 11 isolates from blighted spikelets were the most virulent in naked oat. All Fusarium isolates (n=18) except one (FTSC 11) produced nivalenol (0.2-7.6 ㎍/g), deoxynivalenol (0.03-6.1 ㎍/g), and zearalenone (0.1-27.0 ㎍/g) on rice medium. This study is first report that F. asiaticum causes Fusarium head blight disease of oat in Korea. These findings demonstrate the dominance of F. asiaticum in oat agroecosystems as in rice, wheat and barley in Korea.
Microcystin produced by cyanobacteria in surface waters, such as eutrophic lake and river, is a kind of serious environmental problems due to its toxicity to human and wild animals. Microcystin is synthesized nonribosomally by the large modular multi-functional enzyme complex known as microcystin synthetase encoded by the mcy gene cluster. Amplification of mcy genes by PCR from cultures and environmental samples is a simple and efficient method to detect the toxigenic Microcystis. In order to evaluate primers designed to detect toxic microcystin-producing strains, 17 cyanobacterial strains and 20 environmental samples were examined by PCR with 7 pairs of primers. Some microcystin-producing cyanobacteria were not detected with FAA-RAA, TOX4F-TOX4R and FP-RP primers. The fragment of unexpected size was amplified with NSZW2-NSZW1 primers in Microcystis strains isolated from the lakes in Korea. TOX1P-TOX1F primers failed in amplification of toxin-producing strains. Only MSF-MSR and TOX2P- TOX2F primers amplified the fragments of mcy genes from 11 strains of microcystin-producing Microcystis. The water samples taken from 20 lakes in Korea were analyzed by PCR using each of the primers. In all the water samples, cyanobacteria capable of producing microcystin were detected by the PCR with TOX2P-TOX2F primers. These results indicate that TOX2P-TOX2F primers are better than the other primers for detection of microcystin-producing Microcystis strains in Korea. The nucleotide sequences of mcy gene in Microcystis aeruginosa NIER10010 suggest genetic diversity of Korean isolates.
A total of 509 rice panicle samples were collected at harvest time from fields in 8 provinces from 2010 to 2014. One hundred five grains per sample were plated on potato dextrose agar and 6,658 Fusarium isolates were obtained; among them, 67 were identified as Fusarium armeniacum by sequencing the translation elongation factor $1{\alpha}$ ($EF-1{\alpha}$) and confirmed by their morphological and cultural characteristics. Considerable variation in conidial size, colony color and $EF-1{\alpha}$ sequences was observed among the fungal isolates. The ability of 24 F. armeniacum isolates to produce T-2 and HT-2 toxin in potato sucrose agar was determined using liquid chromatography-mass spectrometry. Twenty one isolates produced T-2 and HT-2 toxin, resulting in varying toxin levels among the isolates. The results show that Korean isolates of F. armeniacum have diversity with respect to morphological, cultural, genetic, and toxigenic properties.
A total of 1,159 Fusarium strains were isolated from sorghum grown in Danyang and Youngwol in 2017 and 2018. The isolates were analyzed to reveal genetic, toxigenic and pathogenic characteristics. Phylogenetic analysis using TEF-1α and RPB2 genes showed that the samples were contaminated with at least 17 Fusarium species. Among them, F. graminearum, F. proliferatum, F. thapsinum, F. incarnatum, and F. asiaticum were dominant species. In F. graminearum and F. asiaticum, F. graminearum-15-acetyl deoxynivalenol chemotype and F. asiaticum-nivalenol chemotype were frequent. Six Fusarium species tested produced one or more mycotoxins, except F. thapsinum and FTSC 11. F. proliferatum and F. fujikuroi had FUM1 gene (76.0% and 81.6%, respectively) and some isolates produced high level of fumonisin (over 1,000 ㎍). F. proliferatum and F. thapsinum were more virulent than other species on sorghum. These results indicate that Fusarium species in sorghum might produce multiple mycotoxins.
This study was perfonned to investigate the possible effect of Bacillus subtilis which is the predominant species of bacteria in Korean soy sauce, soy paste, and Meju (soybean cake) on the growth and aflatoxin production of Aspergillus parasiticus ATCC 15517. The microorganisms were grown in a modified APT broth and incubated at $30^{\circ}C$ for 12 days. Aflatoxins were determined using high performance liquid chromatography (HPLC). A remarkable inhibition of the growth of Aspergillus parasiticus was observed during the incubation period when in the presence of B. subtilis (mixed culture). Dry mycelial weight in the mixed culture was significantly reduced by 85.3% in comparison to the control at the end of the incubation period (p<0.01). Lower levels of aflatoxins were found in the mixed culture than in the monoculture. At the end of the incubation period aflatoxin production was significantly inhibited by more than 50% (p<0.05). These results indicate that B. subtilis mainly inhibites the growth and aflatoxin production of toxigenic Aspergillus in Meju, soy sauce and soy paste. Although its effect on aflatoxin production was less pronounced, we could expect more inhibition by another bacteria related with fermentation in Meju.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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