Bramhachari P.V.;Kishor P.B. Kavi;Ramadevi R.;Kumar Ranadheer;Rao, B. Rama;Dubey Santosh Kumar
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권1호
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pp.44-51
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2007
Marine bacterial strains were isolated trom coastal regions of Goa and screened for the strains that produce the highest amount of mucous expolysaccharide (EPS). Our screening resulted in the identification of the strain Vibrio furnissii VB0S3 (hereafter called VB0S3), as it produced the highest EPS in batch cultures during the late logarithmic growth phase. The isolate was identified as VB0S3 based on morphological and biochemical properties. Growth and EPS production were studied in mineral salts medium supplemented with NaCl (1.5%) and glucose (0.2%). The exopolymer was recovered from the culture supernatant by using three volumes of cold ethanol precipitation and dialysis procedure. Chemical analyses of EPS revealed that it is primarily composed of neutral sugars, uronic acids, and proteins. Fourier-transform infrared (FT-IR) spectroscopy revealed the presence of carboxyl, hydroxyl, and amide groups, which correspond to a typical heteropolymeric polysaccharide, and the EPS also possessed good emulsification activity. The gas chromatographic analysis of an alditol-acetate derivatized sample of EPS revealed that it was mainly composed of galactose and glucose. Minor components found were mannose, rhamnose, fucose, ribose, arabinose, and xylose. EPS was readily isolated from culture supernatants, which suggests that the EPS was a slime-like exopolysaccharide. This is the first report of exopolysaccharide characterization that describes the isolation and characterization of an EPS expressed by Vibrio surnissii strain VB0S3. The results of the study contribute significantly and go a long way towards an understanding of the correlation between growth and EPS production, chemical composition, and industrial applications of the exopolysaccharide in environmental biotechnology and bioremediation.
제주도에서 채집된 토양시료로부터 xylanase 활성을 나타내는 균주를 분리하여 WJ-2로 명명하였다. 균주 WJ-2의 16S rRNA 유전자 염기서열을 결정하여 이를 토대로 상동성을 검색한 결과, Streptomyces 속의 균주들과 높은 염기서열 상동성을 보였다. 16S rRNA 유전자 염기서열을 토대로하는 neighbor-joining 계통수를 제작하여 Streptomyces atrovirens와 가장 높은 계통발생적 연관성이 갖고 있는 것을 밝혔다. 또한 DNA-DNA hybridization 분석을 통하여 Streptomyces atrovirens의 신규한 아종임을 증명하였다. 균주 WJ-의 게놈내 GC 농도는 73.98 mol%이었으며, 주요 세포벽 지방산으로 anteiso-$C_{15:0}$ (36.19%)을 함유하고 있었다. 균주 WJ-2의 성장 및 xylanase 생산은 배지내에 질소원으로 soytone과 탄소원으로 xylan을 첨가하였을 때 급격히 증가되는 것을 확인하였다. 액체배양액으로부터 준비된 조효소의 xylanase 활성은 pH 7.0과 $55^{\circ}C$에서 가장 높게 나타났다. Thin layer chromatography (TLC) 분석을 통하여 균주 WJ-2의 조효소는 xylan을 분해하여 최종분해산물로서 xylobiose와 xylotriose 생산하는 효소임을 확인하였다.
Identification of soil microorganism strain B-6. a producer of acyl CoA synthetase inhibitor, based on its morphological, physiological, biochemical and chemotaxonomical charact eristics was performed. The strain B-6 was identified as Bacillus subtilis. Ihe acyl CoA synthetase inhibitor produced by this strain was highly achieved in fermentation medium that contained glucose 1.0%, soluble starch 1.0%, NH$_4$Cl 0.3%, oatmeal 1.0%, pharmamedia 1.0%, basic magnesium carbonate 0.5%. pH 7.5 at 30$^{\circ}$C for 7 days. The optimal pH and temperature for growth were 9.0 and 30$^{\circ}$C, respectively. Butanol extract of culture filterate of strain B-6 in acyl CoA synthetase inhibitor production medium containing corn steep liquor exhibited high acyl CoA synthetase inhibitor activity and antimicrobial activity against C. albicans. But chloroform extract of culture filterate of strain B-6 in medium containing NH$_4$Cl, ($NH_4)_2SO_4$ or urea instead of corn steep liquor exhibited higher antimicrobial activity against C. albicans than that of butanol extract.
Starters of lactic acid bacteria(LAB) were isolated from the commercial yoghurt products and the four isolates have been studied on their identification and some physiological characteristics. For the purpose of identification, microscopic examination, API test, and 16s rRNA gene sequencing were conducted. Isolate A from a yogurt product of local dairy company A was shown to be Gram-positive rod-shaped bacterium. All strains isolated were turned out to be as Lactobacillus paracasei by using a API 50 CHL kit. In contrast, isolate A was identified as a strain of Lactobacillus helveticus based on the 16S rRNA sequencing data, and L. casei ssp. casei for both B and D and L. paracasei for C. All the isolates survived the simulated gastric juice, pH 2.0 within 3 hours and sharply decreased in viability so that no viable cell was observed after 4.5 hours incubation. In addition, the four isolated strains were almost identical in antibiotic susceptibility to six different kinds of antibiotics including erythromycin ($15\;{\mu}g$), ampicillin ($10\;{\mu}g$), gentamycin ($10\;{\mu}g$), neomycin ($30\;{\mu}g$), but rather resistant to colistin ($10\;{\mu}g$) and streptomycin ($10\;{\mu}g$). It was noteworthy that four isolates were confirmed to produce antibacterial substance against foodborne pathogens of Gram-positive Staphylococcus aureus and Gram-negative Escherichia coli 0157:H7 as test organisms based on the inhibitory zones on an MRS soft agar medium. At presence, the inhibitory factor is unknown so that further studies are required to ascertain the active factor responsible for the inhibitory activities.
Members of genus Acanthamoeba are widely distributed in the environment. Some are pathogenic and cause keratitis and fatal granulomatous amoebic encephalitis. In this study, we isolated an Acanthamoeba CJW/W1 strain from tap water in Wuxi, Jiangsu Province, China. Its 18S rDNA was sequenced and a phylogenetic tree was constructed. The isolated cysts belonged to morphologic group II. Comparison of 18S rDNA sequences of CJW/W1 strain and other isolates showed high similarity (99.7%) to a clinical isolate Asp, KA/E28. A phylogeny analysis confirmed this isolate belonged to the pathogenic genotype T4, the most common strain associated with Acanthamoeba-related diseases. This is the first report of an Acanthamoeba strain isolated from tap water in Wuxi, China. Acanthamoeba could be a public health threat to the contact lens wearers and, therefore, its prevalence should be monitored.
한천분해 세균은 제주 연안의 해수로부터 분리되어졌다. 균주는 Gram 음성 간균이며, 절대 호기성 세균이다. 균주는 agarase를 생성하여 한천을 분해하는 것으로 관찰되었다. 균주의 생화학적 특성과 16S rRNA 유전자 염기서열 분석한 결과 Agarivorans속으로 동정 되었다. 그래서 Agarivorans sp. JA1이라 명명하였다. agarase의 최적 생산을 위한 agar농도는 0.5%이며, pH, 온도와 NaCl 농도는 각각 pH 7, $25^{\circ}C$$^{\sim}$$30^{\circ}C$와 2%였다. 유기태과 무기태는 각각 yeast extract와 $NaNO_3$를 첨가 할 경우 agarase 생성이 가장 좋은 것으로 사료되었다. Agarase의 최적 생산 활성 측정은 DNS법(3,5-dinitrosalicyclic acid procedure)을 이용하여 환원당 값을 산출하였고, 50000(U/L)이상 나왔다.
This study was conducted to select and screen for an antifungal bacterial strain showing pathogen inhibitory activity against Diaporthe actinidiae, which causes stem-end rot in kiwi fruit. Four bacterial strains were isolated which strongly inhibit Diaporthe actinidiae from among two hundred and fifty bacterial strains screened from the soil where kiwi fruit were grown. By co-culturing bacterial strain #72 and the pathogen causing the stem-end rot of kiwi fruit, bacterial strain #72 showed 81.0% antifungal activity against Diaporthe actinidiae. Bacterial strain #72 was identified to be from the genus Bacillus sp. based on morphological and biochemical characterization. The bacterialization of culture broth for Bacillus sp. #72 which was sterilized at $121^{\circ}C$ for 15 minutes and than purified by $0.45{\mu}m$ membrane filter showed almost all of the antagonistic activity against Diaporthe actinidiae. We have also confirmed that in vitro treatment of Bacillus sp. #72 cultured in SD+B+P(sugar 5%, soy sauce 3%, beef extract 0.2%, peptone 0.2%) medium efficiently inhibited the growth of Diaporthe actinidiae responsible for stem-end rot in kiwi fruit.
This study was conducted to screen the antagonistic bacteria which inhibit the growth of plant pathogen, fusarium wilt(Fusarium oxysporum) occurred in tomato plants in greenhouse. We isolated an effective bacterial strains and investigated into the antifungal activity of the antagonistic microorganism and it’s identification. Ten bacterial strains which strongly inhibited Fusarium oxysporum were isolated from the nature, and the best antagonistic bacterial strain designated as KC175, was selected. The antagonistic strain KC175 was identified to be the genus Bacillus sp. based on the morphological and biochemical characterization. The Bacillus sp. KC175 showed 58.2% of antifungal activity against the growth of Fusarium oxysporum. By the bacterialization of the culture broth and the heat bacterialization culture filtrate of it, Bacillus sp. KC175 showed 91% and 18% of antifungal activity, respectively.
퇴비로부터 종속영양 질산화과정에 관여하는 세균을 분리하여 그 특성을 조사하고 동정하였다. 본 세균은 그람 양성 간균으로 운동성을 가지고 있었으며, ammonium acetate 배지에서 아질산용액으로 실험한 결과, 세균의 군락이 자주색으로 변화됨으로써 암모니아로부터 아질산을 형성하는 것으로 나타났다. 세균의 동정을 위한 BBL Test의 결과 본 세균은 Bacillus strains과 78%의 유사성을 지닌 것으로 나타났다. 계통분류학적 분석을 위하여 세균의 염색체로부터 16S rDNA를 클로닝한 후 DNA 염기서열을 파악하고 이를 비교 및 분석한 결과 본 세균은 Bacteria; Actinobacteria; Actinobacteridae; Actinomycetales; Corynebacterineae; Mycobacteriaceae; Mycobacterium에 속하는 Mycobacterium smegmatis strain과 94%의 유사성을 보이는 것으로 나타났다.
Strain A28-5는대한민국 제주도 연안의 해수샘플로부터 고체배지내 xylan과 agar를 분해하는 균주로 분리되었다. Strain A28-5는그람 음성균으로 한 개의 polar flagella로 운동성을 갖는 $Na^+$ 이온 요구성 균주로 분석되었다. 또한 ampilcillin과 thiostreptone 등의 항생제에 내성을 보였다. Genome 내 G+C content는 43.96%이고, Menaquinone-7 (MK-7)을 predominant quinone으로 함유하고 있었다. Strain A28-5의 세포벽을 구성하는 주요 지방산은 $C_{16:1}$${\omega}7c/iso-C_{15:0}$ 2-OH (23.32%), $C_{16:0}$ (21.83%), $C_{18:1}$${\omega}7c$ (17.98%)였다. strain A28-5의 16S rRNA gene sequence는 Catenovulum agarivorans YM01와 가장 높은 상동성(98.94%)을 보였으며, Neighbor-Joining phylogenetic tree 제작을 통해서 Catenovulum agarivorans YM01와 가장 높은 근연관계를 보이는 것을 증명하였다. Catenovulum agarivorans YM01과의 DNA-DNA hybridization 분석을 통하여 A28-5을 Catenovulum 속의 신종으로 분류하여Catenovulum jejuensis A28-5로 명명하였다. 이 균주의 액체배양으로부터 준비된 두 종류의 조효소를 이용한 xylan 또는 agarose와의 효소반응액을 Thin layer chromatography로 분석하여 각각 tetramer와 hexamer의 xylooligosaccharides와 (neo)agarooligosacchardes가 생산되는 것을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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