In the past 10 years, a lot of plant circadian rhythm researches have published in molecular biology and biochemistry. We discussed with published molecular studies of circadian clock and rhythmic genes in Arabidopsis, rice and algae. However past this studies are not sufficient to explain the whole rhythmic metabolism. Recently many researchers have concerned post-transcriptional, translational and post-translational modification of rhythmic proteins. From the view point of the high-throughput study, we could suggest the proteomic analysis with 2-DE gel electrophoresis and MS/MS techniques for the identification of modified proteins.
Rapid extension of genomic database leads to the remarkable advance of functional genomics. This study proposes a novel methodology of functional analysis using 5-methyltrytophan (5 MT) mutant together with their 2-DE analysis and public microarray database. A total of 24 proteins was changed in 5 MT mutant and four remarkably different expressed proteins were identified. Among them, three spots were converted to Affymetrix probe. A total of 155 microarray samples from Gene Expression Omnibus (GEO) in NCBI was retrieved and followed by constructing gene co-expression networks over a broad range of biological issues through Self-Organising Tree Algorithm. Three co-expressing gene clusters were retrieved and each functional categorization with differential expression pattern was exhibited from 5 MT resistance mutant rice. It was indicated new co-expression networks in the mutant. This study suggests that on investigating possibility which correspond 2-DE to microarray database with their full potential.
High resolution two-dimensional (2-D) electrophoresis with isoelectrofocusing in the first dimension and electrophoresis in sodium dodecyl sulfate in acrylamide gradient gels in the second dimension has been used to produce maps of proteins, extracted from rice seeds with 2% sodium dodecyl sulfate/5% 2-mercaptoethanol. Six rice cultivars-three Japonica types and three Tongil(high-yielding) types-at six maturities were studied. Composite map was constructed and more than 300 polypeptide spots were counted in the pH range of $5.2{\sim}8.3$ and molecular range of $20,000{\sim}100,000$. Vast differences were observed between varieties and between maturities in the maps.
The monoclonal antibody against a novel protein, which was induced in the roots of rice seedlings treated with NaCl, was produced. Oryzea sativa L. cv. Annapruna grains were sown on clean sands and grown for 10days and then the seedlings were soaked in 50mM NaCl aqueous solution. In 48hrs of the NaCl treatment, the roots were collected and homogenated with liquid nitrogen and extraction buffer. The homogenate was centrifuged and to the supernatant 75% ammonium sulfate was added to pre-cipitate proteins. From these proteins a novel protein was purified through DEAE-ion chromatography and FPLC(Phenyl column). This protein appeared as a single band in the native electrophoresis. Using this protein as antigen, monoclonal antibody was produced. Five cell lines that secreted antibodies specifically bound to this protein were constructed.
New gluten-free food product (tarhana) was produced using rice and com flours. Chemical and sensory properties of the tarhana samples were investigated and compared with those of traditional wheat tarhana. Generally, sensory analysis results indicated that utilization of com and rice flours in tarhana resulted in acceptable soup properties in terms of some of the sensory properties. The changes in electrophoretic properties of the proteins of the tarhana samples were also studied during the tarhana production. Sodium dodecyl sulfate-polyacryamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) results showed that relative intensities of some of the protein bands in tarhana samples generally decreased during fermentation. The decrease was more obvious at the larger molecular weight region. Corn and rice tarhana seem to be promising food products for the celiac patients who have limited choice of cereal based foods.
Lee In Sok;Kim Dong Sub;Kang Si Yong;Wi Seung Gon;Jin Hua;Yun PiI-Yong;Lim Yong Pyo;Lee Young Il
Journal of Plant Biotechnology
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v.6
no.4
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pp.205-212
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2004
The objectives were to compare the salt tolerance levels in the parental rice cultivar, Dongjinbyeo, and induced mutagenesis derived its lines for plant height, MDA, ATPase, POD, and 2-dimensional protein electrophoresis pattern in NaCl-containing hydroponic nutrient solutions. Rice plants isolated from a population of rice (Oryza sativa L. cv. Dongjinbyeo) mutation lines, which were generated in combination with in vitro selection and gamma-ray, exhibited salt tolerance. Line No. 18 had the longest plant, whereas NaCl-sensitive line (No. 25) had the shortest plant. The parent, and the sensitive line showed severe damage from salt stress. Tolerant lines (No. 18, 50) had a lower malonaldehyde (MDA) content than the sensitive one (Dongjinbyeo, No. 25) during salt stress. Several proteins showed significant quantitative variation through 2DE; phosphoribulokinase, peroxidase, oxygen evolving enhancer 1 and the $H^+-ATPase$, which are known to be involved in salt tolerance. The effect of salt on peroxidase and $H^+-ATPase$ activity in the seedlings of two groups with contrasting genotypes of rice was studied. A greater activity was recorded in the tolerant lines as compared to the sensitive ones (P<0.05, Duncan's test). The results indicate that salt tolerant lines expressed more salt stress-inducible proteins associated with salt tolerance than the sensitive lines during salt stress.
The genes encoding non-specific lipid transfer proteins (nsLTPs), members of a small multigene family, show a complex pattern of expressional regulation, suggesting that some diversification may have resulted from changes in their expression after duplication. In this study, the evolution of nsLTP genes within the Poaceae family was characterized via a survey of the pseudogenes and unigenes encoding the nsLTP in rice pseudomolecules and the NCBI unigene database. nsLTP-rich regions were detected in the distal portions of rice chromosomes 11 and 12; these may have resulted from the most recent large segmental duplication in the rice genome. Two independent tandem duplications were shown to occur within the nsLTP-rich regions of rice. The genomic distribution of the nsLTP genes in the rice genome differs from that in wheat. This may be attributed to gene migration, chromosomal rearrangement, and/or differential gene loss. The genomic distribution pattern of nsLTP genes in the Poaceae family points to the existence of some differences among cereal nsLTP genes, all of which diverged from an ancient gene. The unigenes encoding nsLTPs in each cereal species are clustered into five groups. The somewhat different distribution of nsLTP-encoding EST clones between the groups across cereal species imply that independent duplication(s) followed by subfunctionalization (and/or neofunctionalization) of the nsLTP gene family in each species occurred during speciation.
Kim, Ho-Bang;Oh, Chang-Jae;Park, Yung-Chul;Lee, Yi;Choe, Sung-Hwa;An, Chung-Sun;Choi, Sang-Bong
BMB Reports
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v.44
no.10
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pp.680-685
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2011
The AT-hook motif is a small DNA-binding protein motif that has been found in the high mobility group of non-histone chromosomal proteins. The Arabidopsis genome contains 29 genes encoding the AT-hook motif DNA-binding protein (AHL). Recent studies of Arabidopsis genes (AtAHLs) have revealed that they might play diverse functional roles during plant growth and development. In this report, we mined 20 AHL genes (OsAHLs) from the rice genome database using AtAHL genes as queries and characterized their molecular features. A phylogenetic tree revealed that OsAHL proteins can be classified into 2 evolutionary clades. Tissue expression pattern analysis revealed that all of the OsAHL genes might be functionally expressed genes with 3 distinct expression patterns. Nuclear localization analysis using transgenic Arabidopsis showed that several OsAHL proteins are exclusively localized in the nucleus, indicating that they may act as architectural transcription factors to regulate expression of their target genes during plant growth and development.
Proteomic analysis was performed in order to identify proteomic changes by salt stress between the Japonica cv. Donganbyeo (WT) and two salt-tolerant (ST) mutant lines by using the SDS-PAGE and 2-DE. Two salt tolerant rice mutant lines, ST-87 and ST-301, were selected by in vitro mutagenesis with gamma-ray. Three-week-old seedlings were treated with 171 mM NaCl for 7 days. In the SDS-PAGE, three proteins with molecular weights of 27, 46 and 58 kDa were highly increased under salt treatment. Total proteins from shoots of both WT and ST-lines were separated by two-dimensional gel electrophoresis. In 2-DE, 201, 226, 217 and 213 protein spots were detected in the untreated-or treated-WT and untreated- or treated-ST-87, respectively. Of theses, 17 and 10 protein spots were up- and down-regulated under salt stress in the WT, respectively. While, 16 and 8 protein spots were up- and down-regulated under salt stress in the ST-87, respectively, compared with the untreated plants. High intensity or de novo synthesized proteins were analyzed by MALDI-TOF/MS analysis.
Among the photoactive semiconductors such as $TiO_2,\;ZnO,\;Fe_2O_3,\;WO_3,\;and\;CdSe,\;TiO_2$ is the most widely used as photocatalyst in different media, because of its lack of toxicity and stability. In this study, the effects of titanium dioxide were investigated to obtain the information of physiological change in rice plant. Light-adapted Chlorophyll flourescence index decreased and relative electron transport rate of rice leaves was activated by titanium dioxide under $2,400\;{\mu}mol\;m^{-2}\;s^{-1}$ PAR (Photosynthetic active radiation). Relative electron transport rate of rice leaf treated with titanium dioxide 10 ppm was high in order of $2,400\;{\mu}mol\;m^{-2}\;s^{-1}\;PAR,\;2,200\;{\mu}mol\;m^{-2}\;s^{-1}\;PAR,\;450\;{\mu}mol\;m^{-2}\;s^{-1}\;PAR$ and titanium dioxide 10 ppm (45.1%), control (32.4%), diuron 10 ppm (15.3%) under $2,400\;{\mu}mol\;m^{-2}\;s^{-1}\;PAR$. Titanium dioxide increased photosynthesis of the rice leaf under $13.6\;KJ\;m^{-2}\;day^{-1}$ UV-B only. With titanium dioxide 20 ppm, reduced UV-B ($0.15\;KJ\;m^{-2}\;day^{-1}$) intensity changed the induction of proteins and twenty-five proteins were identified. Among them, seventy proteins were up-regulated, four proteins were down-regulated and four proteins were newly synthesized. Function of these proteins was related to photosynthesis (52%), carbohydrate metabolism (4%), stress/defense (8%), secondary metabolism (4%), energy/electron transport (4%), and miscellaneous (28%).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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