• 생명과학회지
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• 제22권1호
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• pp.117-125
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• 2012

본 연구는 굴 가수분해물의 간 보호 효과를 확인하는 것을 목표로 하였다. 굴은 많은 기능적 요소를 가지고 있다고 알려져 있으며 특히, 효소에 의해 생산된 가수분해물은 우수한 기능적 물질을 포함한다. 타크린으로 유발한 간세포 독성에 대한 효소별 굴 가수분해물의 보호 효과를 확인하기 위하여 HepG2세포를 이용하여 in vitro상에서 확인하였다. 사용한 샘플은 Neutrase, Flavourzyme, Protamex을 이용하여 효소 가수분해한 것이다. 타크린으로 손상을 유발한 간세포에서는 GOT와 LDH가 증가하게 된다. 굴 효소 가수분해물을 처리한 실험군에서는 아무런 처리를 하지 않은 실험군에 비하여 높은 세포 생존율을 확인할 수 있었다. 또한 GOT와 LDH 역시 감소하는 것을 알 수 있었다. 본 연구를 통하여 타크린 독성에 대한 신약, 식품의 기초 자료를 제공할 수 있을 것으로 기대된다.

• 한국수산과학회지
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• 제53권1호
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• pp.123-131
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• 2020

In this study, we investigated the protective effects of a Neutrase enzymatic hydrolysate derived from Korea pen shell Atrina pectinata (APN) against hydrogen peroxide (H₂O₂)-induced oxidative damage in hepatocytes. First, we confirmed that APN has antioxidant activities by scavenging 2,2-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline)-6-sulfonic acid radical (ABTS⁺) and H₂O₂ and increasing oxygen radical absorbance capacity (ORAC) value. Also, the treatment of APN increased the cell viability by reducing the intracellular reactive oxygen species (ROS) production in H₂O₂-stimulated hepatocytes. In addition, APN decreased the sub-G₁ DNA contents and the apoptotic body formation increased by H₂O₂ stimulation. Moreover, APN modulated the protein expression of apoptosis related molecules (Bcl-2, Bax and p53) by suppressing the activation of nuclear factor NFkB and ERK/p38 signaling in H₂O₂-stimulated hepatocytes. Furthermore, APN led to the activation of Nrf2/HO-1signaling known as antioxidant systems. These results suggest APN protects hepatocytes against oxidative damages caused by H₂O₂ stimulation.

• 한국수산과학회지
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• 제53권5호
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• pp.707-716
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• 2020

Red sea cucumber Stichopus japonicus, was dried using three methods-far-infrared ray, vacuum, and freeze drying and then enzymatically hydrolyzed using nine proteases: Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase, Protamex, trypsin, α-chymotrypsin, and papain. In addition, the potential ability of hydrolysates to inhibit lipid accumulation in 3T3-L1 adipocytes was evaluated. The yield of hydrolysates from red sea cucumbers dried using each method was higher than that of the distilled water extract, and protein contents were either similar or higher. The hydrolysates that exhibited inhibitory effects on lipid accumulation, as demonstrated via Oil red O staining, were those obtained by far-infrared ray drying coupled with Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, or Neutrase treatment. In addition to the advantages of far-infrared drying and the characteristics of Flavourzyme, the Flavourzyme hydrolysate of far-infrared-dried red sea cucumber showed the highest inhibitory effect on lipid accumulation. In addition, this hydrolysate significantly decreased the expression of the protein factor fatty acid-binding protein 4, which is related to the late differentiation of 3T3-L1 adipocytes. Taken together, these results suggest that Flavourzyme hydrolysates from farinfrared-dried red sea cucumber may be used as a functional food and/or a pharmaceutical ingredient for the inhibition of lipid accumulation.

• 한국식품영양과학회지
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• 제21권5호
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• pp.513-518
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• 1992

탈지유채박(Brassica napus var. Youngsan)으로부터 추출, 정제하여 얻어진 유채단백질을 효소로 가수분해하기 위한 최적조건에 대하여 검토하였다. Pronase가 유채단백질에서 alcalase, neutrase보다 높은 활성을 나타내었고, 유채단백질의 가열처리는 pronase의 활성을 감소시켰다. 또한 유채단백질의 가수분해도는 완충액보다는 증류수에서 더 높은 결과를 얻었다. 시간별로는 1시간까지는 급속히 반응이 일어나나 그 이후는 완만해졌다. Pronase에 의한 유채단백질의 가수분해 최적조건은 $40^{\circ}C$와 pH 8.0이었고 효소 대 기질의 비와 기질 농도는 각각 1/100(w/w), 1%(w/v)이었다. 이와 같은 조건하에서 Km은 3.48%(w/v)를 얻었다.

• 한국수산과학회지
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• 제39권3호
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• pp.269-277
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• 2006

This study prepared functional oyster hydrolysates using two-step enzymatic hydrolysis and investigated their functional properties. To prepare two-step enzymatic hydrolysates (TSEH), oysters were hydrolyzed using 1% Protamex (PR) at $40^{\circ}C$ and pH 6.0 for 1 hr before sequential treatment with one of the following enzymes for 1 hr: Alcalase (AL), Flavourzyme (FL), Neutrase (NE), pepsin (PE), and trypsin (TR). The PRAL, PRNE and PRTR hydrolysates had significantly greater angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitory activity than did PR and the other TSEHs. Only the antioxidant activity of the PRNE hydrolysate was significantly different (p<0.05), while none of the TSEHs had antimicrobial activity. The oyster hydrolysate prepared by sequential treatment with Protamex and Neutrase (PRNE) had the best ACE inhibitory activity and antioxidant activity, with $IC_{50}$ values of 0.40 and 0.94 mg/mL, respectively. The PRNE hydrolysate was processed through an ultrafiltration (UF) series with molecular weight cut-off (MWCO) membranes of 3, 5, 10, and 30 kDa, and the ACE inhibitory, antioxidant, and antimicrobial activities of the permeates were determined. The permeate through the 3-kDa MWCO membrane had greater ACE inhibitory activity and antioxidant activity than did the other PRNE permeates, with $IC_{50}$ values of 0.11 and 0.40 mg/mL, respectively.

• 한국식품영양과학회지
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• 제44권11호
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• pp.1645-1652
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• 2015

해양생물 유래 피부건강 기능성의 소재를 발굴할 목적으로 굴 단백질을 Protamex와 Neutrase로 가수분해 한 후 생성된 굴 가수분해물 펩타이드의 주름 개선 효과를 조사하였다. 굴 가수분해물은 약 7.9%의 유리아미노산을 포함하며 urea, taurine, alanine, glycine 등의 아미노산의 함량이 높았다. 굴 가수분해물은 collagenase 저해 활성을 가지고 있었고, 피부세포인 CCD986sk에 대한 독성은 없었다. 분획물의 수율은 1,000 Da 미만이 40%였으며, 5,000 Da 미만이 60.4%를 차지하였다. 1,000~3,000 Da인 분획물이 항산화 활성, procollagen의 생성능 및 MMP-1 효소 저해 활성이 가장 높았다. 굴 가수분해물과 5,000 Da 미만의 분획물은 주름 개선을 위한 피부건강 기능성 소재로서 화장품 등의 제품에 응용 가능함을 확인하였다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제63권4호
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• pp.291-295
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• 2020

참기름 제조의 부산물인 참깨박의 활용도를 높이기 위하여 효소 처리에 의한 참깨박 불용성 단백질의 추출 조건을 조사하였다. 단백질 분해효소인 Alcalase, Flavourzyme, Neutrase, Protamex의 처리 결과를 대조구와 비교한 결과 Protamex가 고형분과 단백질 함량 증가에 효과적이었다. Protamex의 반응 조건(50 ℃, pH 6.0)에서 효소의 사용량은 탈지 참깨박의 1%, 효소반응시간은 3시간이 적당하였다. 효소 처리 효율을 향상시키기 위하여 참깨박을 열처리하면, 열처리 온도가 증가할수록 추출되는 단백질 함량은 증가하였으며 110이상에서는 미미하게 증가하였다. 세포벽 분해효소(Tunicase)와 단백질 분해효소의 병용처리가 단백질 가용화에 미치는 효과를 조사한 결과, 단백질 분해효소를 처리한 다음에 세포벽 분해효소를 처리하는 것이 가장 효과적이었다. 열처리(110 ℃, 10분) 후 Protamex와 Tunicase를 순차적인 처리로 단백질 함량이 열처리와 효소처리하지 않은 대조구의 약 3.6배(9.85→35.58 mg/mL), 열처리만 실시한 대조구의 약 2.2배(15.83→35.58 mg/mL) 증가하였다.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제25권2호
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• pp.76-89
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• 2022

The Lophius litulon liver was used as raw material for the extraction of fish oil via various extraction methods. The extraction rate by water extraction, potassium hydroxide (KOH) hydrolysis and protease hydrolysis were compared and the results revealed the protease hydrolysis extraction had a higher extraction rate with good protein-lipid separation as observed by optical microscope. Furthermore, subsequent experiments determined neutrase to be the best hydrolytic enzyme in terms of extraction rate and cost. The extraction conditions of neutrase hydrolysis were optimized by single-factor experiment and response surface analysis, and the optimal extraction rate was 58.40 ± 0.25% with the following conditions: enzyme concentration 2,000 IU/g, extraction time 1.0 h, liquid-solid ratio 1.95:1, extraction temperature 40.5℃ and pH 6.5. The fatty acids composition in fish oil from optimized extraction condition was composed of 19.75% saturated fatty acids and 80.25% unsaturated fatty acids. The content of docosahexaenoic acid (DHA) and eicosapentaenoic acid (EPA) were 8.06% and 1.19%, respectively, with the ratio (6.77:1) surpassed to the recommendation in current researches (5:1). The results in this study suggest protease treatment is an efficient method for high-quality fish oil extraction from Lophius litulon liver with a satisfactory ratio of DHA and EPA.

• 한국축산식품학회지
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• 제44권3호
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• pp.723-737
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• 2024

Yeast protein can be a nutritionally suitable auxiliary protein source in livestock food. The breakdown of proteins and thereby generating high-quality peptide, typically provides nutritional benefits. Enzyme hydrolysis has been effectively uesed to generate peptides; however, studies on the potential applications of different types of enzymes to produce yeast protein hydrolysates remain limited. This study investigated the effects of endo- (alcalase and neutrase) and exotype (flavourzyme and prozyme 2000P) enzyme treatments on yeast protein. Endotype enzymes facilitate a higher hydrolysis efficiency in yeast proteins than exotype enzymes. The highest degree of hydrolysis was observed for the protein treated with neutrase, which was followed by alcalase, prozyme 2000P, and flavourzyme. Furthermore, endotype enzyme treated proteins exhibited higher solubility than their exotype counterparts. Notably, the more uniform particle size distribution was observed in endotype treated yeast protein. Moreover, compared with the original yeast protein, the enzymatic protein hydrolysates possessed a higher content of β-sheets structures, indicating their higher structural stability. Regardless of enzyme type, enzyme treated protein possessed a higher total free amino acid content including essential amino acids. Therefore, this study provides significant insights into the production of protein hydrolysates as an alternative protein material.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제36권3호
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• pp.1018-1027
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• 2019

천연물 유래 저분자 펩타이드들은 항산화, 고혈압 완화, 면역조절, 진통완화 및 항균작용 등 생리활성이 있는 것으로 알려져 왔다. 본 연구는 연산오계육 단백질을 상업용 프로티아제(alcalase, bromelain, flavourzyme, neutrase, papain, protamex)를 이용하여 저분자 펩타이드를 생산하고 항산화 활성(DPPH 소거능, 슈퍼옥사이드 라디칼 소거능, 하이드록시 라디칼 소거능 및 금속 킬레이션 능력), 펩타이드의 구성 아미노산 및 분자량을 분석하였다. 효소반응은 효소반응기에 다진 오계육 슬러리 50 g와 단백질 효소 2%(w/v)를 넣고 pH 6 와 온도 $60^{\circ}C$ 조건에서 2시간 반응을 하였다. 반응 후 가수분해도(%)의 범위는 $36.65{\pm}4.10%$에서 $70.75{\pm}5.29%$ 사이의 범위를 보여주었는데 protamex의 가수분해도는 46.3%로 가장 높았으며, papain hydrolysate가 $70.75{\pm}5.29%$로 가장 높은 값을 보여주었으며, 반면에 alcalase hydrolysate가 $36.65{\pm}4.10%$로 가장 낮은 값을 보여주었다. DPPH 라디칼 소거능은 bromelain 처리 저분자 펩타이드가 가장 높게 나타났고, alcalase 처리 펩타이드에서 소거능이 가장 낮게 나타났다. 슈퍼옥사이드 라디칼 소거능 역시 bromelain 처리 저분자 펩타이드가 50% 이상의 가장 높은 라디칼 소거능을 보여주었다. 하이드록시 라디칼 소거능은 약 16.73에서 69.16% 사이의 분포를 보여 주었는데 bromelain 처리 저분자 펩타이드에서 가장 높게 나타났다. $Fe^{2+}$ 킬레이션 능력은 약 17.85에서 47.84% 사이의 분포를 보여 주었다. hydrolysate들의 킬레이션 능력은 사용 효소들에 상관없이 큰 차이점이 없었다. 아미노산의 분석결과 alcalase, bromelain, flavourzyme, neutrase, papain, protamex 효소 가수분해 시켰을 때 차이점을 보여 주었고 가장 많은 아미노산은 glutamic acid이었다. 효소 hydrolysate들의 분자량의 분포는 처리 효소에 따라 분자량의 분포가 다르게 나타났지만 300-2,000 Da 범위에 있었다.