Fractional solvent extraction by organic solvents such as hexane, chloroform, ethylacetate, and butanol was carried out using 70% ethanol extract of apple flower leaves. Biological activities including antioxidant, whitening, antimicrobial and anti-wrinkle activities were investigated and bio-active materials of the extracts were identified using GC/MSD. Among the tested solvent fractions, ethylacetate fraction showed the highest total polyphenol content (1218.94 ${\mu}g/mL$), and flavonoid (140 ${\mu}g/mL$). The DPPH radical scavenging activities was over 80% at a dry matterbased concentration of 200 ${\mu}g/{\mu}L$ and SOD-like activity was over 90% at 50 ${\mu}g/mL$ concentration in ethylacetate fraction that was slightly lower than of ascorbic aicd. Tyrosinase inhibition activity related to skin-whitening was over 60% by ethylacetate fraction of 100 ${\mu}g/mL$. As an anti-aging effect, elastase inhibitory activity was about 45% in ethylacetate fraction. Also, it showed a significantly antimicrobial activity against P. acenes. From GC/MSD analysis, a characteristic peak of high content in ethylacetate fraction was identified as kaempferol, which has been reported as a bioactive compound.
Melanin synthesis is catalyzed by tyrosinase. To investigate the whitening effect of Hizikia fusiformis, fractions from ethanol extract of H. fusiformis were prepared by a systematic fractionation procedure with solvents such as methanol, hexane, butanol, and $H_2O$. The ethanol extract and its fractions were then subjected to evaluate the inhibitory effects on the tyrosinase activity and melanin synthesis in murine B16F10 melanoma cells. The ethanol extract and aqueous fraction exhibited a whitening effect with no cytotoxicity. The ethanol extract showed the highest whitening effect among the samples. The inhibitory effect of $100{\mu}g/ml$ of ethanol extract was higher than that of $10{\mu}g/ml$ of arbutin, but it was lower than that of $10{\mu}g/ml$ of kojic acid. Furthermore, the inhibitory effects of $100{\mu}g/ml$ of methanol, hexane, butanol, and aqueous fractions were similar to those of $10{\mu}g/ml$ of arbutin. The antioxidant activities were examined by comparing the results with that of ascorbic acid as a positive control. The ethanol extract and aqueous fraction showed relatively higher DPPH radical-scavenging activities compared with the other samples. Furthermore, $500{\mu}g/ml$ of ethanol extract and aqueous fraction diminished LPS-induced iNOS expression to 82 and 80%, respectively. These results suggest that ethanol extract and aqueous fraction of H. fusiformis could be used as cosmetic ingredients for whitening and skin protection effects.
Thiolase is an enzyme that catalyzes condensation reactions between two acetyl-CoA molecules to produce acetoacetyl-CoA. As thiolase catalyzes is the first reaction in the production of n-butanol, knowledge of the molecular and regulatory mechanism of the enzyme is crucial for synthesizing high-value biofuel. Thiolase from Clostridium butyricum (CbTHL) was expressed, purified, and crystallized. X-ray diffraction data were collected from the crystals, and the 3-dimentional structure of the enzyme was determined at 2.0 Å. The overall structure of thiolase was similar to that of type II biosynthetic thiolases, such as thiolase from C. acetobutylicum (CaTHL). The superposition of this structure with that of CaTHL complexed with CoA revealed the residues that comprise the catalytic and substrate binding sites of CbTHL. The catalytic site of CbTHL contains three conserved residues, Cys88, His349, and Cys379, which may function as a covalent nucleophile, general base, and second nucleophile, respectively. For substrate binding, the way in which CbTHL stabilized the ADP moiety of CoA was unlike that of other thiolases, whereas the stabilization of β-mercaptoethyamine and pantothenic acid moieties of CoA was quite similar to that of other enzymes. The most interesting observation in the CbTHL structure was that the enzyme was regulated through redox-switch modulation, using a reversible disulfide bond.
Park, Sung-Hee;Cha, Min-Ho;Kim, Eun-Jung;Yoon, Yeo-Joon;Sohng, Jae-Kyung;Lee, Hee-Chan;Liou, Kwang-Kyoung;Kim, Byung-Gee
KSBB Journal
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v.23
no.1
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pp.44-47
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2008
Anthracycline antibiotics doxorubicin (DXR) is clinically important cancer therapeutic agent produced by Streptomyces peucetius. DXR result by further metabolism of rhodomycin D (RHOD) and require a deoxy-sugar component for their biological activity. In this study, production of TDP-L-daunosamine and its attachment to ${\varepsilon}$-rhodomycinone (RHO) to generate RHOD has been achieved by bioconversion in Streptomyces venezuelae that bears eleven genes. S. peucetius seven genes (dnmUTJVZQS) were transformed by plasmid and S. venezuelae two genes desIII, IV and two more S. peucetius drrA, B genes were integrated into chromosomal DNA. To generate the feeding substrate RHO, 6L S. peucetius grown on agar plate was harvested, extracted with organic solvent and then purified using preparative HPLC. Recombinant S. venezuelae grown on agar plate containing RHO was harvested and its n-butanol soluble components were extracted. The glycosylated product of aromatic polyketide RHO using heterologous host S. venezuelae presents the minimal information for TDP-L-daunosamine biosynthesis and its attachment onto aglycone. Moreover, the structure of auxiliary protein, DnrQ, was predicted by fold recognition and homology modeling in this study. This is a general approach to further expand of new glycosides of antitumor anthracycline antibiotics.
Park Sung-Min;Lee Jun-Seuk;Park Chi-Duck;Lee Jung-Hun;Jung Hyuck-Jun;Yu Tae-Shick
KSBB Journal
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v.21
no.1
s.96
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pp.42-48
/
2006
Bacillus subtilis KMU-13 was isolated from the Lillehammer forest soils at Norway and shown a strong antifungal activity on cucumber scab, Cladosporium cucumerinum KACC 40576. B. subtilis KMU-13 produced a maximum level of antifungal substance under incubation aerobically at $30^{\circ}C$, 180 rpm for 48 hours in LB broth containing 0.5% maltose and 0.5% bactopeptone and initial pH adjusted to 6.0. Butanol extract of cultured broth was confirmed inhibitory zone by plate assay and Rf 0.64 value substance by thin layer chromatography (TLC) represented high antifungal activity against C. cucumerinum KACC 40576 and also shown fungal growth inhibitory activity against Botytis cinerea KACC 40573, C. gloeosporioides KACC 40804, D. byoniae KACC 40669, F. oxysporum KACC 40037, F. oxysporum KACC 40052, F. oxysporum f. sp. radicis-lycopersici KACC 40537, F. oxysporum KACC 40902, M. cannonballus KACC 40940, P. cambivora KACC 40160, R. soiani AG-1 KACC 40101, R. solani AG-4 KACC 40142, and S. scleotiorum KACC by agar diffusion method.
Kim, Soo-Hyun;Chung, Mi-Ja;Jang, Hae-Dong;Ham, Seung-Shi
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.2
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pp.193-202
/
2010
In vitro activities of Codonopsis lanceolata (CL) 70% ethanol extract and its fractions (hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water) were examined by total polyphenol content, reducing power, 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate) (ABTS), 2,2-diphenyl-$\beta$-picrylhydrazyl (DPPH), and oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assays. The ethyl acetate fraction from CL ethanol extract (CLEA) showed the highest total polyphenol content (22.7 mg/g) among five fractions, and also exhibited an excellent reducing power (0.42~1.27 at $250\sim1,000\;{\mu}g/mL$). CLEA at $100\sim400\;{\mu}g/mL$ concentrations had 27.7~70.3% of ABTS radical scavenging activity and the highest DPPH radical scavenging activity (81.6% at $400\;{\mu}g/mL$). CLEA had dominantly higher $ORAC_{{ROO}{\cdot}}$activity compared to other fractions. CLEA and butanol fraction had significantly higher $ORAC_{{OH}{\cdot}}$ activities than 70% ethanol extract, hexane, chloroform and water fractions. The CLEA exhibited the highest antioxidant activity in CL 70% ethanol extract and its fractions. Thus, effect of CLEA treatment on antioxidant gene expression under the oxidative stress conditions by a high fat diet in animal model was studied by microarray and RT-PCR methods. The 31 antioxidant genes were expressed but the genes were not up-regulated at least a two-fold by CLEA treatment. We concluded that CLEA does not have an indirect antioxidant effect but a direct antioxidant effect by up-regulation of antioxidant genes in high fat diet-induced obese mice.
In this study, the good brewing conditions for the 24 $^{\circ}Brix$ freeze-concentrated apple wine were investigated. The four selected Saccharomyces cerevisiae strains MM10, SS89, SS812, and WW108, could ferment quickly when brewed with high sugar levels. During the fermentation, the reducing sugar contents slowly declined while the total acid in all the yeasts increased and the final alcohol content was 12-13%, a typical wine's alcohol content. The viable counts were shown to be 6-6.8 log cfu/ml. During the fermentation, the organic acid content was shown to be within the range of 2.36-3.11%, and the free sugar content, except for the SS89 and WW108 strains, was shown to consist only of sorbitol, although fructose was somewhat detected in the SS89 and WW108 strains. Methanol was not detected, or only a trace of it was detected, and the aldehyde content was 107.68-114.27 ppm. As for the fusel oil contents, a trace of propanol was detected. Isobutanol and butanol were present in 40.16-54.65 and 25.47-27.73 ppm, respectively. The isoamy1 alcohol content was shown to be the highest (108.88-217.26 ppm). The final total phenolic compounds were shown to be 0.1-0.16%. The final Hue values were shown to be 1.3-3.6, and the final intensity was 0.1-0.45. The lightness (L) was within the range of 91.78-98.51, the redness (a) was at a neutral position at red and green, and the yellowness (b) was within the range of 2.38-7.7. In the sensory evaluation, the SS812 strain was found to be the best in terms of color, the SS89 strain in terms of odor, and the WW108 strain in terms of taste. Overall, SS812 was found to be the best apple wine.
Jang, Ja Yeong;Choi, Yong Ho;Joo, Yoon-Jung;Kim, Hun;Choi, Gyung Ja;Jang, Kyoung Soo;Kim, Chang-Jin;Cha, Byeongjin;Park, Hae Woong;Kim, Jin-Cheol
Research in Plant Disease
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v.21
no.2
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pp.50-57
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2015
Control of nematode has become difficult owing to the restricted use of effective soil fumigant, methyl bromide, and other non-fumigant nematicides. Therefore, it is urgently necessary to develop microbial nematicide to replace chemical nematicides. In this study, the 50% aqueous methanol extraction solution of fermentation broths of 2,700 actinomycete strains were tested for their nematicidal activity against second stage of juveniles (J2s) of Meloidogyne incognita. As the results, only the 50% aqueous methanol extraction solution of AN110065, at 20% equivalent to 10% fermentation broth, showed strong nematicidal activity with 78.9% of mortality 24 h after treatment and 94.1% of mortality at 72 h. The 16S rRNA gene sequencing showed that the strain sequence was 99.78% identical to Streptomyces netropsis. The extract of S. netropsis AN110065 fermentation broth was successively partitioned with ethyl acetate and butanol and then the ethyl acetate, butanol and water layers were investigated for their nematicidal activity against the M. incognita. At $1000{\mu}g/ml$, ethyl acetate layer showed the strongest activity of 83.5% of juvenile mortality 72 h after treatment. The pot experiment using the fermentation broth of AN110065 on tomato plant against M. incognita displayed that it evidently suppressed gall formation at a 10-fold diluent treatment. The tomato plants treated with the fermentation broth of S. netropsis AN110065 did not show any phytotoxicity. The results suggest that S. netropsis AN110065 has a potential to serve as microbial nematicide in organic agriculture.
Kim, Jeong-Ho;Cho, Hyun-Dong;Won, Yeong-Seon;Heo, Ji-An;Kim, Ji-Young;Kim, Hwi-Gon;Han, Sim-Hee;Moon, Kwang-Deog;Seo, Kwon-Il
Journal of Life Science
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v.29
no.11
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pp.1227-1234
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2019
Prunus mume, also known as maesil, is a popular fruit consumed in East Asia (Korea, Japan, and China). It contains high amounts of organic acids, minerals, and polyphenols and has been used as a medication for fever, vomiting, and detoxification. In this study, the anti-proliferative and apoptotic effects of solvent fractions from maesil were evaluated using sulforhodamine B (SRB) assays, morphological evaluations, Hoechst 33258 staining, and western blotting. Addition of the maesil methanol fraction (MMF) and the maesil butanol fraction (MBF) significantly and dose-dependently decreased the cell viability of HT-29 human colon cancer cells. Colony-forming assays confirmed that the MMF and MBF treatments decreased colony numbers when compared with untreated control cells. Treatment of HT-29 cells with MMF and MBF caused a distortion of the cell morphology to a shrunken cell mass. Treatment with MMF and MBF also dose-dependently increased nuclear condensation and the formation of apoptotic bodies in HT-29 cells. Treatment with MMF and MBF significantly and dosedependently increased the expression of Bax (a pro-apoptotic protein), caspase-3, and poly ADP-ribose polymerase (PARP) and decreased the expression of Bcl-2 (an anti-apoptotic protein). MMF significantly and dose-dependently inhibited cell proliferation induced by bisphenol A, an environmental hormone. Therefore, MMF may have potential use as a functional food and as a possible therapeutic agent for the prevention of colon cancer.
Ham, Young-An;Choi, Hyun-Jin;Chung, Mi-Ja;Ham, Seung-Shi
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.3
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pp.274-279
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2009
The levels of minerals, amino acids, fatty acids and sugars and antioxidant capacity of Adenophora triphylla (AT) root were investigated. The moisture, crude protein, crude lipid, crude ash and carbohydrate contents of the AT root were $3.4{\pm}0.3,\;9.4{\pm}0.1,\;1.6{\pm}0.1,\;3.7{\pm}0.2$, and $81.9{\pm}0.5$, respectively. Among the minerals present in root, potassium content was the highest. Total amino acid contents were $103.5{\pm}9.1$ mg/g. Palmitic acid was the most abundant fatty acid in AT root. The vitamin E and C levels in AT root were $1.1{\pm}0.1$ and $5.2{\pm}0.5$ mg/100 g, respectively. The antioxidant activity of 70% ethanol extract and fractions of the AT root has been determined by the scavenging of the stable radical DPPH; the result showed that the chloroform fraction was the most active, as the amount required for 50% reduction of DPPH after 30 min ($RC_{50}$) was $103.7{\mu}g$, followed by 70% ethanol extract ($265.4{\mu}g$), hexane fraction ($104.4{\mu}g$), ethyl acetate fraction ($104.4{\mu}g$), butanol fraction ($108.9{\mu}g$) and aqueous fraction ($484.1{\mu}g$).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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