This study was carried out to compare the antibiotic residues in the muscles of cattle and pigs from slaughter-houses in Seoul from 2000 to 2002 by EEC-4-plate, Charm II and HPLC methods. The results were summarized as follows; 1. Residual materials were detected from 41 samples(0.6%) by EEC-4-plate method from random sampling and 38 samples(12%) by Charm II method from directed sampling. 2. Violation rates were 0.3% by monitoring and 4.7% by surveillance program. 3. The 35 samples were classified as tetracyclines 30(86%), sulfonamides 4(11%), ${\beta}$-lactams 1(3%) and two samples simultaneously determined oxyteracycline plus sulfadimetoxine, and sulfamerazine plus sulfadimetoxine. 4. The highest residual concentration(ppm) of chlortetracycline, oxytetracyline, sulfamethazine, sufadimetoxine and penicillin were 0.5, 12.0, 6.4, 2.6 and 0.44, respectively.
A total of 3,943 samples (beef 698, pork 2,178 and chicken 1,067)were collected from slaughter houses in Daegu from January to December 2006 for analysis of antimicrobial residues. The results were also comparatively analyzed with those carried out from 16 veterinary service laboratories nationwide as a part of national residue program in 2006. The samples from 11 farms (cattle 2, pig 9) were found to exceed the legal limit. Among them 5 were classified as tetracyclines, 3 as $\beta$-lactams, 2 as sulfonamides and 1 as quinolone. Nationally a total of 222 farms (241 cases) were found to violate the residual limits, of which 47.3% were detected by screening test, followed by surveillance (38.3%). Failure to observe withholding periods of antimicrobial drugs after treatment was the most significant cause of the non-compliance.
Spore-forming Bacillus species are commercially available probiotic formulations for application in humans. They have health benefits and help prevent disease in hosts by combating entero-pathogens and ameliorating antibiotic-associated diarrhea. However, the molecular and cellular mechanisms of these benefits remain unclear. Here, we report the draft genome of a potential probiotic strain of Bacillus clausii B106. We mapped and compared the probiotic profile of B106 with other reference genomes. The draft genome analysis of B106 revealed the presence of ADI pathway genes, indicating its ability to tolerate acidic pH and bile salts. Genes encoding fibronectin binding proteins, enolase, as well as a gene cluster involved in the biosynthesis of exopolysaccharides underscored the potential of B106 to adhere to the intestinal epithelium and colonize the human gut. Genes encoding bacteriocins were also detected, indicating the antimicrobial ability of this isolate. The presence of genes encoding vitamins, including Riboflavin, Folate, and Biotin, also indicated the health-promoting ability of B106. Resistance of B106 to multiple antibiotics was evident from the presence of genes encoding resistance to chloramphenicol, ${\beta}$-lactams, Vancomycin, Tetracycline, fluoroquinolones, and aminoglycosides. The findings indicate the significance of B. clausii B106 administration during antibiotic treatment and its potential value as a probiotic strain to replenish the health-promoting and disease-preventing gut flora following antibiotic treatment.
Several species of Gram-positive bacteria have cell wall peptidoglycan (syn. murein) in which not all of the sugar moieties are N-acetylated. This has recently been shown to be a secondary effect, caused by the action of a peptidoglycan N-acetylglucosamine deacetylase. We have found that the opportunistic pathogen Listeria monocytogenes is unusual in having three enzymes with such activity, two of which remain in the cytoplasm. Here, we examine the enzyme (PgdA) that crosses the cytoplasmic membrane and is localized in the cell wall. We purified a hexa-His-tagged form of PgdA to study its activity and constructed a mutant devoid of functional Lmo0415 (PgdA) protein. L. monocytogenes PgdA protein exhibited peptidoglycan N-acetylglucosamine deacetylase activity with natural substrates (peptidoglycan) from both L. monocytogenes and Escherichia coli as well as the peptidoglycan sugar chain component N-acetylglucosamine, but not with N-acetylmuramic acid. As was reported recently [6], inactivation of the structural gene was not lethal for L. monocytogenes nor did it affect growth rate or morphology of the cells. However, the pgdA mutant was more prone to autolysis induced by such agents as Triton X-100 and EDTA, and is more susceptible to the cationic antimicrobial peptides (CAMP) lysozyme and mutanolysin, using either peptidoglycan muramidases or autolysis-inducing agents. The pgdA mutant was also slightly more susceptible than the wild-type strain to the action of certain beta-lactam antibiotics. Our results indicate that protein PgdA plays a protective physiological role for listerial cells.
Triphenyl Tetrazolium Chloride(TCC) reduction test is simple and sensitive to some residual antibiotics (especially to penicillin) in milk, but comparatively insensible to sulfo-namides. The volumn of sample is also large. Thus this study was undertaken to increase the detectable level of sulfonamides in raw milk. In this study, we used small transparent plastic hole and pulp disc instead of 10m1 test tube and made test medium in which was added 0.08%TTC, 0.3% agar, 10% skim milk, approximately $10^6$ CFU/ml streptococcus thermophilus and 5ppm Trimethoprim to enhance the sensitivity for sulfonamides The results of TCC reduction test by disc plate method were summarized as follows : 1. sensitivity to residual sulfonamides were much higher than official TCC reduction test. Detectable limites of sulfamethazine, sulfamerazine, sulfathiazole, sulfachloropy-ridazine, sulfadimethoxine, sulfamononethoxine, sulfadiazine and sulfaquinoxaline were 0.1-0.5ppm levels. 2. Detectable limites to some antibiotics were simillar or good than that of official method as 0.005-0.1ppm to three ${\beta}$ -lactams, 0.25-0.5ppm to one macrolide, 2-10ppm to three aminoglycosides, 0.2-0.5ppm to three tetracycline, 0.1-0.5ppm to chloramphenicol. 3. Only 0.1ml of milk was needed to test and the test medium could be stored appnoximatly 7days in the refrigerator. So test procedure was convenient than offcial method. 4. These results suggest that disc plate method is more useful to detect bacterial growth inhibition substances including sulfonamides in raw milk.
Kim, Chansik;Ryu, Hong-Duck;Chung, Eu Gene;Kim, Yongseok;Rhew, Doug Hee
Journal of Korean Society on Water Environment
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v.32
no.6
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pp.600-627
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2016
Korea is one of the countries with a large veterinary antibiotics market, although antimicrobial resistance in bacteria is becoming a serious issue in many countries. The Korean government started to take interest in estimating the effects of livestock manure on rivers and agricultural soils and in monitoring of heavy metals, organic pollutants and antibiotics in the ambient water and soil. In this paper, pre-treatment methods to separate the selected antibiotics from solid samples were reviewed. It is essential to select an efficient and appropriate procedure for pre-treatment due to the high proportion of proteins and organics in biosolid samples. Pre-treatment consists of extraction followed by clean-up. Initially, homogenized samples were extracted by sonication, mechanical agitation or pressurized liquid extraction with methanol/acetonitrile/water mixture under acidic/basic conditions depending on the compound. However, aminoglycosides and colistin were extracted with 5% trichloroacetic acid and HCl, respectively. Since the ${\beta}-lactams$ are easily decomposed in acidic and basic conditions, they were extracted in neutral pH. Filtration with a membrane (pore size, $0.2{\mu}m$) or solid phase extraction with HLB and methanol, as eluents, was normally applied for the clean-up. At least, three different pre-treatment procedures should be adopted to screen all the selected antibiotics in solid samples.
Kim, Chansik;Ryu, Hong-Duck;Chung, Eu Gene;Kim, Yongseok;Rhew, Doug Hee
Journal of Korean Society on Water Environment
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v.32
no.6
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pp.628-648
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2016
Increased attention has been paid to the presence of veterinary antibiotics in various environmental matrices due to their toxicological behavior in the ecosystem and development of antibiotic-resistant strains of pathogenic bacteria. In the this review, 37 target antimicrobials were selected based on annual sales of antibiotics for livestock in South Korea 2014. Also, extraction and clean-up methods for the determination of the antibiotic residues in liquid samples including water, milk, and honey were comprehensively reviewed in the literature. Solid-phase extraction (SPE) was commonly used as a pre-treatment method for the samples. Most of the analytes were extracted in acidic conditions (2.5~4.0) except for aminoglycosides, which were extracted in neutral conditions (7.0~8.0). ${\beta}-Lactams$ showed the highest recoveries in neutral pH due to their degradation characteristics in acidic media. Starta-X, Oasis HLB, and Oasis MCX were frequently applied as an SPE cartridge and Oasis HLB showed the highest recoveries for the majority of antibiotic classes. The homogenized honey and milk were extracted by mixing with acids for deproteinization. Solids and other interfering substances in the extract were eliminated by centrifugation followed by membrane filtration or SPE before injection into HPLC.
From July of 1997 to June of 1998, total 279 raw milk samples over withdrawal period after mastitis treatment from dairy farms located in the provinces of Kyonggi and Choongchung were collected to test drug residues. Each sample was tested by TTC- II test and Delvotest SP. Among the total 152 raw milk samples of cow treated by ${\beta}$-lactams, 32 samples(21.2%) were positive on the Delvotest and 15 samples(9.9%) showed positive on the TTC-II test. Also, from the total 37 samples treated by sulfonamides, 5 samples(13.5%) were positive on the Delvotest and 3 samples(8.1%) showed positive on the TTC-II test. For the total 55 raw milk samples of cow treated by tetracyclines, 9 samples(16.4%) were positive on the Delvotest and 5 samples(9.1%) showed positive on the TTC-II test. In addition, from the total 35 samples treated by aminoglycosides, 7 samples(20.0%) were positive on the Delvotest and 5 samples(14.3%) showed positive on the TTC-II test. Our study shows that it is possible that drugs are to be detected by the drug residues test of an individual raw milk even over the withdrawal period after mastitis treatment and the raw milk of bulk tank.
Oh, Sang-Ik;Kim, Jong Wan;Kim, Jongho;So, Byungjae;Kim, Bumseok;Kim, Ha-Young
Journal of Veterinary Science
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v.21
no.4
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pp.57.1-57.11
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2020
Background: Streptococcus dysgalactiae subspecies equisimilis (SDSE) acts as an etiological agent for lameness, neurological signs, and high mortality in pigs. Despite its importance in pig industries and zoonotic potential, little is known about the effects of this pathogen. Objectives: This study aimed to determine the molecular characteristics and antimicrobial resistance of SDSE strains isolated from diseased pigs. Methods: A total 11 SDSE isolates were obtained from diseased pigs. Bacterial identification, PCR for virulence genes, emm typing, and antimicrobial resistance genes, multilocus sequence typing, and antimicrobial susceptibility test were performed. Results: Nine isolates were from piglets, and 8 showed lameness, sudden death, or neurological signs. The isolates were PCR-positive for sla (100%), sagA (100%), and scpA (45.5%), and only 1 isolate amplified the emm gene (stL2764). Eight different sequence types were detected, categorized into 2 clonal complexes and 4 singletons. All the isolates in this study were included in a small cluster, which also contained other strains derived from humans and horses. The minimum inhibitory concentrations for the tested beta-lactams were low, while those for macrolides, tetracyclines, and fluoroquinolones were relatively high. PCR analysis of the macrolide and tetracycline resistance genes demonstrated that the isolates carried erm(B) (18.2%, n = 2), mef(A/E) (9.1%, n = 1), tet(M) (18.2%, n = 2), and tet(O) (90.2%, n = 10). Two isolates presented a mutation in parC, which is associated with fluoroquinolone resistance. Conclusion: This study provided insight into swine-derived SDSE, as it is related to veterinary medicine, and elucidated its zoonotic potential, in the context of molecular epidemiology and antimicrobial resistance in public health.
Paik, Ji Yeun;Choi, Jae Hong;Cho, Eun Young;Oh, Chi Eun;Lee, Jina;Choi, Eun Hwa;Lee, Hoan Jong
Pediatric Infection and Vaccine
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v.18
no.2
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pp.109-116
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2011
Purpose : Pneumococcus is one of the most important causes of invasive infection through the childhood period. In January 2008, the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) published revised penicillin breakpoints for Streptococcus pneumoniae and penicillin susceptibility rates of S. pneumoniae increased in Korea. This study was performed to determine the probability of oral amoxicillin for the empirical treatment achieving bactericidal exposure against pneumococcus using pharmacodynamics model. Methods : Twenty-three isolates of pneumococci were subjected to determine minimum inhibitory concentration (MIC) for ${\beta}$-lactams and macrolide. For the ${\beta}$-lactams, exposure of fT >MIC (time that free drug concentrations remain above the MIC) for 50% of the administration interval have determined the probability of target attainment (PTA), and regimens that had a PTA >90% were considered optimal. An analysis was performed by applying MIC of 23 isolates to a 5000-patient Monte Carlo simulation model. Results : Among 23 isolates from healthy children, 7 (30.4%) isolates were MIC ${\leq}$1.0 ${\mu}g$/mL and 19 (82.6%) were MIC ${\leq}$2 ${\mu}g$/mL for amoxicillin. Amoxicillin 40 mg/kg/day achieved PTA >90% at MIC ${\leq}$1.0 ${\mu}g$/mL but PTA decreased to 52% at MIC 2 ${\mu}g$/mL, whereas amoxicillin 90 mg/kg/day can predict 97% of PTA at MIC 2 ${\mu}g$/mL. Overall, oral amoxicillin 90 mg/ kg/day for the empirical treatment against pneumococcus can expect more successful response in Korean children. Conclusion : Considering the resistantce pattern of pneumococci in Korean children, we estimate that oral amoxicillin 90 mg/kg/day will provide a pharmacodynamic advantage for the empirical treatment against pneumococcus. And low dose amoxicillin or macrolide are expected to have higher chance of treatment failure than high dose oral amoxicillin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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