• 한국미생물·생명공학회지
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• 제41권4호
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• pp.425-432
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• 2013

본 연구에서는 인체 대장암세포인 HT29를 사용하여 포황 메탄올 추출물(Methanol extract of Typha orientalis, METO)의 항암 활성 및 그 분자적 기전에 관하여 분석하였다. 먼저 METO가 다양한 암세포의 증식에 미치는 영향을 분석한 결과, 인체 대장암 세포, 폐암 세포, 간암 세포 등의 세포증식을 억제하였으며 그 중에서도 대장암 세포인 HT29에 대해 강한 세포 증식 억제 효과를 나타내었다. METO에 의한 세포 증식 억제 기전을 분석하기 위하여 Flow cytometry analysis를 수행한 결과, METO 농도의존적으로 HT29 세포의 G2/M기 세포분포가 증가하고 아울러 apoptosis 유발군인 SubG1기 세포분포가 증가하는 것을 확인할 수 있었다. METO에 의한 HT29 세포의 G2/M arrest는 Cdc2의 inactive form인 phospho-Cdc2의 증가에 의한 G2/M checkpoint 관련 단백질의 활성억제에 의한 것이라 사료된다. 이러한 phospho-Cdc2의 증가는 METO에 의해 발현이 증가된 Wee1 kinase와 발현이 감소된 Cdc25C phosphatase에 의해 야기된 것임을 확인하였다. 또한 METO에 의한 HT29의 apoptosis 유도에 관한 분자적 기전 분석을 위해 Western blot analysis를 수행한 결과, METO 농도가 증가할수록 종양 억제 유전자인 p53, death receptor인 FAS, Bcl-2 family 중 pro-apoptotic 단백질인 Bax 및 cytosolic cytochrome C의 발현이 증가되고, Caspase-3가 활성화되어 단편화된 Caspase-3의 증가가 관찰되었다. 또한 활성화된 Caspase-3의 기질 단백질인 PARP의 단편화가 일어나 apoptosis가 유도되는 것을 알 수 있었다. 이상의 결과들로부터 METO는 인체 대장암세포 HT29의 G2/M arrest 및 apoptosis 유도에 의한 항암활성을 보유함을 확인하였다.

• Nutrition Research and Practice
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• 제17권6호
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• pp.1043-1055
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• 2023

BACKGROUND/OBJECTIVES: The fruit of Cydonia oblonga Miller (COM) is used traditionally in Mediterranean region medicine to prevent or treat obesity, but its mechanism of action is still unclear. Beyond a demonstrated anti-obesity effect, the fruit was tested for the mechanism of adipogenesis in 3T3-L1 preadipocytes. MATERIALS/METHODS: 3T3-L1 preadipocytes were cultured for 8 days with COM fruit extract (COME) at different concentrations (0-600 ㎍/mL) with adipocyte differentiation medium. The cell viability was measured using an MTT assay; triglyceride (TG) was stained with Oil Red O. The expression levels of the adipogenesis-related genes and protein expression were analyzed by reverse transcription polymerase chain reaction and Western blotting, respectively. RESULTS: COME inhibited intracellular TG accumulation during adipogenesis. A COME treatment in 3T3-L1 cells induced upregulation of the adenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK)α phosphorylation and downregulation of the adipogenic transcription factors, such as sterol regulatory element-binding protein 1c, peroxisome proliferator-activated receptor γ, and CCAAT/enhancer binding protein α. The COME treatment reduced the mRNA expression of fatty acyl synthetase, adenosine triphosphate-citrate lyase, adipocyte protein 2, and lipoprotein lipase. It increased the mRNA expression of hormone-sensitive lipase and carnitine palmitoyltransferase I in 3T3-L1 cells. CONCLUSIONS: COME inhibits adipogenesis via the AMPK signaling pathways. COME may be used to prevent and treat obesity.

• 한국축산식품학회지
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• 제33권3호
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• pp.411-416
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• 2013

본 연구는 가르시니아 캄보지아의 항비만 효과의 분자기전을 알아보기 위하여 지방전구세포인 3T3-L1세포의 지방세포로의 분화 시, 가르시니아 캄보지아 추출물을 처리하여 세포 내 지질 적의 형성 및 중성지방의 축적, 지방 분화 특이 지표 단백질의 발현에 미치는 영향에 대하여 살펴보았다. 3T3-L1세포의 지방 세포로의 분화는 MDI로 유도 후, 2일째부터 지방 적 및 중성 지방이 유의하게 축적되기 시작하였는데, 1% 가르시니아 캄보지아 추출물을 동시에 처리한 세포에서 이러한 지방 적 및 중성 지방의 축적이 유의하게 억제되는 것을 실험을 통해 확인할 수 있었다. 또한 지방세포 분화 특이 지표 단백질로 알려진 $PPAR{\gamma}2$, $C/EBP{\alpha}$, aP2와 같은 단백질의 발현 또한 가르시니아 캄보지아 추출물이 효과적으로 억제하고 있음도 확인할 수 있었다. 한편, 가르시니아 캄보지아 추출물은 palmitate를 처리한 HepG2 세포에서 중성지방의 축적 및 세포사멸을 유의하게 억제함으로써 유리 지방산의 축적에 의한 지속적인 염증 반응으로 유발되는 지방독성(lipotoxicity)을 억제하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 이러한 결과들은 가르시니아 캄보지아 추출물이 세포 수준에서 비교적 낮은 농도로도 효과적으로 비만을 억제할 수 있으며, 기존에 알려지지 않았던 유리지방산에 의한 지방독성을 억제하는 효과가 있음을 본 연구에서 확인할 수 있었다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제22권5호
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• pp.744-750
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• 2015

본 연구에서는 연화 열수 및 에탄올 추출물의 3T3-L1 지방세포 분화 및 ROS생성 저감효과를 구명하기 위하여 3T3-L1 전지방세포 분화과정 중 연화 열수 및 에탄올 추출물에 의한 지방축적과 ROS 생성을 관찰하였다. 연화 열수 및 에탄올 추출물은 XTT assay에서 100, 200 및 $400{\mu}g/mL$ 농도에서 세포 독성을 보이지 않았다. 지방세포 분화 중 세포 내 지방축적 및 ROS 생성량을 비교한 결과, 연화 열수 및 에탄올 추출물을 처리한 지방세포의 경우 지방축적량과 ROS 생성량 모두 유의적으로 억제되는 것으로 나타났다. 특히 연화 열수 및 에탄올 추출물을 처리함으로써 지방세포분화와 관련된 전사인자인 $PPAR{\gamma}$, $C/EBP{\alpha}$ 및 aP mRNA의 발현을 유의적으로 감소시켰으며, ROS의 생성과 관련이 있는 주요 유전자인 NOX4 및 catalase의 유전자발현 또한 유의적으로 감소하였다. 이 결과를 통해 연화 열수 및 에탄올 추출물이 3T3-L1 지방세포 내 중성지방의 축적 억제효과와 더불어 ROS 생성 억제에 효과적으로 작용함을 확인하였다. 따라서 연화 열수 및 에탄올 추출물은 비만과 같은 대사증후군 관련 질환의 개선을 위한 천연물 기능성 소재로의 활용이 기대된다.

• 생명과학회지
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• 제21권3호
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• pp.358-367
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• 2011

대두는 여러 종류의 파이토케미컬을 함유하고 있으며 이에 의한 항산화, 항염증, 항비만 효능 등이 있음이 잘 알려져 있다. 대두 부산물 성분의 비만억제효능을 확인하기 위하여 Oil-Red O 염색법과 정량 PCR을 통하여 지방세포분화억제 및 지방생성억제 효능을 분석하였다. 분화유도물질인 isobutylmethylanthine (IBMX), dexamathasone 및 insulin 처리에 따른 지방세포 분화유도와 함께 대두부산물-침지수, 순물, 두유-의 처리는 세포손상 없이 지방세포분화 연관 유전자-PPAR${\gamma}$, Fabp4, Scd1, adipsin, apolipoprotein (APOE), adiponectin (ADIPOQ)-의 발현을 감소시키는 효능을 보였다. 또한 대두에서 잘 알려진 isoflavone -daidzein과 genistein- 분석을 통하여 대두 부산물에 포함된 두 종류의 isoflavone의 함량을 확인하였다. 결과적으로 대두부산물에는 지방세포분화유도 유전자의 발현억제를 통한 전지방세포의 분화 및 지방세포의 지방생성을 억제하고 있음을 확인하였다. 따라서 두부생산 시 발생하는 대두부산물은 지방세포분화 억제 효능을 바탕으로 이를 이용하는 건강기능 식품제조에 활용될 수 있을 것으로 판단된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제45권8호
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• pp.1107-1113
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• 2016

지방전구세포가 지방세포로 분화하는 과정에서 아선약 추출물의 영향을 확인하고자 분화유도제를 처리하여 3T3-L1 세포에서 아선약의 세포독성, 지방축적 억제 효과, triglyceride 억제 효능, 지방분화 관련 단백질들의 발현을 확인하였다. 아선약 추출물을 최대 $200{\mu}g/mL$ 농도까지 세포에 처리하여 세포독성을 측정한 결과 아선약 추출물은 $100{\mu}g/mL$ 이하의 농도에서는 세포에 독성을 유발하지 않는 것으로 확인되었다. Oil red-O 염색을 통해 지방축적률을 확인한 결과 아선약 추출물에 의한 농도 의존적인 지방축적의 감소 효과가 있었다. Triglyceride 생성량 역시 농도 의존적인 감소가 확인되었다. 아선약에 의한 지방분화의 감소가 어떠한 기작에 의해 조절되는지 확인하고자 관련 지표단백질인 $PPAR{\gamma}$와 SREBF-1 그리고 $C/EBP{\alpha}$의 발현량 변화를 확인해본 결과 $100{\mu}g/mL$ 농도에서 유의성 있게 감소하였다. 이상의 결과를 종합해볼 때 아선약 추출물은 지방세포의 분화억제와 분화된 지방세포의 지방축적을 저해함으로써 항비만 효과를 유도할 것으로 기대된다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제30권1호
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• pp.111-118
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• 2017

Objective: Adipose tissue plays a key role in the development of obesity and diabetes. We previously reported that lignosulfonic acid suppresses the rise in blood glucose levels through the inhibition of ${\alpha}$-glucosidase activity and intestinal glucose absorption. The purpose of this study is to examine further biological activities of lignosulfonic acid. Methods: In this study, we examined the effect of lignosulfonic acid on differentiation of 3T3-L1 cells. Results: While lignosulfonic acid inhibited proliferation (mitotic clonal expansion) after induction of differentiation, lignosulfonic acid significantly increased the size of accumulated lipid droplets in the cells. Semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction analysis showed that lignosulfonic acid increased the expression of the adipogenic transcription factor, peroxisome proliferator-activated receptor gamma ($PPAR{\gamma}$), leading to increased glucose transporter 4 (Glut-4) expression and 2-deoxyglucose uptake in differentiated 3T3-L1 cells. Additionally, feeding lignosulfonic acid to diabetic KK-Ay mice suppressed increase of blood glucose level. Conclusion: Lignosulfonic acid may be useful as a functional anti-diabetic component of food.

• Natural Product Sciences
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• 제19권3호
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• pp.263-268
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• 2013

The inhibitory effects of adipogenesis on ethyl acetate (EtOAc) fraction from leaves of the Tulip tree (TT) were evaluated. Exposure to TT EtOAc fraction (25~200 ${\mu}g/mL$) for a 72 hr incubation period did not significantly change cell viability. TT EtOAc fraction, with concentrations of 100 and 200 ${\mu}g/mL$, inhibited lipid accumulation in 3T3-L1 adipocytes in a dose dependent manner in adipogenesis. The expression of $PPAR{\gamma}$ and $C/EBP{\alpha}$, essential adipogenic markers, was significantly decreased when TT EtOAc fraction was added to cells for 8 days as compared with the untreated control group. These results suggest that TT EtOAc fraction might be a potential therapeutic agent as an effective, natural alternative material for obesity treatment.

• 약학회지
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• 제55권4호
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• pp.309-313
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• 2011

Abnormal growth of adipocyte characterized by increased cell numbers and differentiation is considered as an major pathological characteristic feature in obesity. Thus, inhibition of mitogenesis of preadipocytes and their differentiation to adipocytes would be beneficial for the prevention and inhibition of obesity. In the present study, we attempted to evaluate anti-adipogenic activity of eggplants (the fruits of Solanum melongena L.) employing preadipocytes cell line, 3T3-L1 as an in vitro assay system. Water extract of eggplants significantly inhibited adipocyte differentiation when treated during adipocyte differentiation process, as assessed by measuring fat accumulation using Oil Red O staining. Eggplant extract, however, showed little effects on fully differentiated adipocytes. Eggplant didn't show significant toxicity up to 500 ${\mu}g$/ml to the 3T3-L1 cells. Further studies with interval treatment demonstrated that eggplant exerted inhibitory activity on adipocyte differentiation via acting on early stage of adipogenesis. Conclusively, eggplants are suggested to be beneficial for the prevention of obesity.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제66권
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• pp.186-196
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• 2023

Dyglomera^® is an aqueous ethanol extract derived from the fruit and pods of Dichrostachys glomerata. A previous study has revealed that Dyglomera regulates adipogenesis and lipolysis by modulating AMP-activated protein kinase (AMPK) phosphorylation and increased expression levels of lipolysis-related proteins in white adipose tissue of high fat diet-induced mice and 3T3-L1 adipocyte cells. To further investigate mechanisms of Dyglomera, additional studies were performed using 3T3-L1 cells. Results revealed that Dyglomera downregulated adipogenesis by inhibiting the protein kinase B/mammalian target of rapamycin signaling pathway and reconfirmed that it downregulated gene expression levels of proliferator-activated receptor (PPAR)-γ, CCAAT enhancer binding protein α, sterol-regulation element-binding protein-1c. Dyglomera also reduced adipokines such as tumor necrosis factor alpha, interleukin-1β, and interleukin 6 by regulating leptin expression. Moreover, Dyglomera promoted beige-and-brown adipocyte-related phenotypes and regulated metabolism by increasing mitochondrial number and expression levels of genes such as T-box protein 1, transmembrane protein 26, PR domain 16, and cluster of differentiation 40 as well as thermogenic factors such as uncoupling protein 1, proliferator-activated receptor-gamma co-activator-1α, Sirtuin 1, and PPARα through AMPK activation. Thus, Dyglomera not only can inhibit adipogenesis, but also can promote lipolysis and thermogenesis and regulate metabolism by affecting adipokine secretion from 3T3-L1 adipocytes.