• 제목/요약/키워드: Xanthomonas campestris

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Glycosylation of Flavonoids with E. coli Expressing Glycosyltransferase from Xanthomonas campestris

  • Kim, Jeong-Ho;Kim, Bong-Gyu;Kim, Jae-Ah;Park, Young-Hee;Lee, Yoon-Jung;Lim, Yoong-Ho;Ahn, Joong-Hoon
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제17권3호
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    • pp.539-542
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    • 2007
  • Glycosyltransferase family 1 (UOT) uses small chemicals including phenolics, antibiotics, and alkaloids as substrates to have an influence in biological activities. A glycosyltransferase (XcGT-2) from Xanthomonas campestris was cloned and consisted of a 1,257 bp open reading frame encoding a 45.5 kDa protein. In order to use this for the modification of phenolic compounds, XcGT-2 was expressed in Escherichia coli as a glutathione S-transferase fusion protein. With the E. coli transformant expressing XcGT-2, biotransformation of flavonoids was carried out. Flavonoids having a double bond between carbons 2 and 3, and hydroxyl groups at both C-3' and C-4', were glycosylated and the glycosylation position was determined to be at the hydroxyl group of C-3', using nuclear magnetic resonance spectroscopy. These results showed that XcGT-2 regiospecifically transferred a glucose molecule to the 3'-hydroxyl group of flavonoids containing both 3' and 4'-hydroxyl groups.

세균의 5-Fluorocytosine Deaminase의 분포와 기질 특이성 (Distribution and Substrate Specificity of 5-fluorocytosine Deamiase in Bacteria)

  • 전홍기;김동완
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제13권4호
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    • pp.361-366
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    • 1985
  • 여러 가지 속의 세균을 대상으로 5-fluorocytosine deaminase의 생산균과 기질 특이성을 검토한 결과, 5-fluorocytosine deaminase의 생산성은 종, 속에 관계없이 다양하게 나타났으며 기질로서는 cytosine, 5-fluorocytosine, 5-methylcytosine이 모두 이용될 수 있는 것으로 나타났다. 효소 생산균 중에서 비교적 활성이 높다고 인정되는 Xanthomonas campestris IAM 1671의 효소 생산을 위한 배지의 조성은 glycerin 0.5%, peptone 1%, yeast extract 0.5%. NaCl 0.5% (pH 7.0)로 설정하였다. 본 균의 효소 생산은 500$m\ell$용 진탕 flask에 효소생성 최적배지 90$m\ell$를 넣어 3$0^{\circ}C$에서 24시간 배양했을 때 최대로 나타났다.

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곤충세포주에서 누에신 단백질의 발현 및 성상구명 (Characterization and Expression of Antibacterial Protein Gene, Nuecin)

  • 윤은영;구태원;황재삼;김상현;강석우;김근영;진병래
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제44권2호
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    • pp.64-68
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    • 2002
  • 본 연구는 곤충 유전자를 이용한 항세균성 펩타이드 생산 및 농업용 소재로서의 응용에 관한 연구로서 항세균성 단백질 누에신 유전자를 베큘로 바이러스 발현계(BEVS)를 이용하여 곤충세포주에서 발현한 후 누에신 단백질의 농업용 소재로서의 가능성을 모색하기 위해 농작물을 가해하는 감자 고추의 무름병을 일으키는 Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum, 가지 및 고추의 풋마름병을 일으키는 Ralstonia solanacearum, 양송이 버섯의 세균성 갈색 무늬 병을 일으키는 Pseudomonas tolaasii 및 무와 배추의 검은썩음병을 일으키는 Xanthomonas campestris pv. campestris 에 대해서 항세균 활성을 관찰하였다. 그 결과 Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum, Ralstonia solanacearum 및 Pseudomonas tolaasii에 대해 높은 활성을 나타내었으며 Xanthomonas campestris pv. campestris에는 활성을 나타내지 않았다. Ion exchange 및 gel filtration chromatography 를 수행하여 약 20 kDa의 성숙 누에신 단백질을 순수 분리하여 pH 및 온도에 대한 안정성을 조사한 결과, pH 2~12 완충액에서 30분간 처리하였을 때에도 항세균 활성이 그대로 유지되었고 10$0^{\circ}C$에서 2시간 처리시에는 활성이 안정되었으며 4시간 처리시에도 80% 정도로 유지됨을 확인함으로써 누에신 단백질은 pH 및 온도에 대한 안정성이 있음을 확인할 수 있었다.

Virulence Reduction and Differing Regulation of Virulence Genes in rpf Mutants of Xanthomonas oryzae pv. oryzae

  • Jeong, Kyu-Sik;Lee, Seung-Eun;Han, Jong-Woo;Yang, Seung-Up;Lee, Byoung-Moo;Noh, Tae-Hwan;Cha, Jae-Soon
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제24권2호
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    • pp.143-151
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    • 2008
  • To define the functions of the rpf genes in Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo), which regulates pathogenicity factors in Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc), marker-exchange mutants of each rpf gene were generated. When the mutants were inoculated on a susceptible cultivar, the lesion lengths caused by the rpfB, rpfC, rpfF, and rpfG mutants were significantly smaller than those caused by the wild type, whereas those caused by the rpfA, rpfD, and rpfI mutants were not. Several virulence determinants, including extracellular polysaccharide (EPS) production, xylanase production, and motility, were significantly decreased in the four mutants. However, the cellulase activity in the mutants was unchanged. Complementation of the rpfB and rpfC mutations restored the virulence and the expression of the virulence determinants. Expression analysis of 14 virulence genes revealed that the expression of genes related to EPS production (gumG and gumM), LPS (xanA, xanB, wxoD, and wxoC), phytase (phyA), xylanase (xynB), lipase (lipA), and motility (pitA) were reduced significantly in the mutants rpfB, rpfC, rpfF, and rpfG. In contrast, the expression of genes related to cellulase (eglxob, clsA), cellobiosidase (cbsA), and iron metabolism (fur) was unchanged. The results of this study clearly show that rpfB, rpfC, rpfF, and rpfG are important for the virulence of Xoo KACC10859, and that virulence genes are regulated differently by the Rpfs.

Expression of hpa1 Gene Encoding a Bacterial Harpin Protein in Xanthomonas oryzae pv. oryzae Enhances Disease Resistance to Both Fungal and Bacterial Pathogens in Rice and Arabidopsis

  • Choi, Min-Seon;Heu, Sunggi;Paek, Nam-Chon;Koh, Hee-Jong;Lee, Jung-Sook;Oh, Chang-Sik
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제28권4호
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    • pp.364-372
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    • 2012
  • Xanthomonas oryzae pv. oryzae causing bacterial leaf blight disease in rice produces and secretes Hpa1 protein that belongs to harpin protein family. Previously it was reported that Hpa1 induced defense responses when it was produced in tobacco. In this study, we expressed hpa1 gene in rice and Arabidopsis to examine the effects of Hpa1 expression on disease resistance to both fungal and bacterial pathogens. Expression of hpa1 gene in rice enhanced disease resistance to both X. oryzae pv. oryzae and Magnaporthe grisea. Interestingly, individual transgenic rice plants could be divided into four groups, depending on responses to both pathogens. hpa1 expression in Arabidopsis also enhanced disease resistance to both Botrytis cineria and Xanthomonas campestris pv. campestris. To examine genes that are up-regulated in the transgenic rice plants after inoculation with X. oryzae pv. oryzae, known defense-related genes were assessed, and also microarray analysis with the Rice 5 K DNA chip was performed. Interestingly, expression of OsACS1 gene, which was found as the gene that showed the highest induction, was induced earlier and stronger than that in the wild type plant. These results indicate that hpa1 expression in the diverse plant species, including monocot and dicot, can enhance disease resistance to both fungal and bacterial plant pathogens.

Improvement in the Stability of Glycinecin A through Protein Fusion of the Two Structural Components

  • Kim, Youngmee;Somi K. Cho;Moonjae Cho
    • Journal of Microbiology
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    • 제39권3호
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    • pp.177-180
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    • 2001
  • Glycinecin A, a bacteriocin produced by Xanthomonas campestris pv. glycines, inhibits the growth of X. c. pv. vesicatoria. We have reported that purified glycinecin A is composed of two polypeptides, is active over a wide range of pH (6 to 9), and is stable at temperatures up to 60$\^{C}$. Glycinecin A is a heterodimer consisting of 39- and 14-kDa subunits; the two encoding genes, glyA and glyB, respectively, have been cloned (Heu et al. 2001. Appl. Environ. Microbiol. 67, 4105-4110). Co-expression of glyA and glyB in the same cell is essential for bacteriocin activity. We constructed and produced a chimeric glycinecin A connecting glyA and glyB in one open reading frame. The chimeric glycinecin A has the same bactericidal activity as the wild-type glycinecin A. However, the chimeric glycinecin A is more stable in a wider range of pH and temperature.

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위장(圍場)과 수확후(收穫後)에 채소부패병(菜蔬腐敗病)를 일으키는 병원세균(病原細菌)의 동정(同定) -2. 양배추의 세균성(細菌性) 부패병(腐敗病) (Identification of Bacteria Causing Rot Diseases of Vegetables in Fields and Post-harvest Period in Korea -2. Bacterial Rot Diseases of Cabbage)

  • 최재을;한광섭;박종성
    • 농업과학연구
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    • 제15권2호
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    • pp.132-137
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    • 1988
  • 최근(最近)에 세균(細菌)에 의한 양배추 부패병(魔敗病)은 주목할 만큼 증가(增加)되어 양배추 생산(生産)에 중대(重大)한 문제(問題)가 되고 있는 세균성(細團性) 부패병(腐敗病)의 원인(原因)을 구명(究明)하기 위하여 실시(實施)하였다. 시장(市場)과 주요(主要) 양배추 생산지(生産地)로부터 26개(個)의 양배추 부패(腐敗) 병반(病斑)을 수집하여 병원세균(病原細菌)을 분리(分離)하였다. 분리(分離) 세균(細菌)의 세균학적(細菌學的) 특성(特性)과 병원성(病原性)에 따라 분리세균(分離細菌)을 Erwinia carotovora subsp. carotovora, Pseudomonas cichorii, P. viridiflava 그리고 X-anthomonas campestris pv. campestris로 동정(同定) 되었다. 이 중에서 E. carotovora subsp. carotovora와 X. campestris pv. campestris가 널리 분포(分布)되어 있으며 양배추 생산(生産)에도 중대(重大)한 피해(被害)를 준다는 것이 밝혀졌다. 경우에 따라서는 한개의 양배추 병반(病斑)으로부터 2종류(種類)의 세균(細園)이 분리(分離)되는 것으로 보아 포장(圃場)에서 2종류(種類)의 세균(細菌)이 복합(複合) 감염(感染)된 것으로 추정되었다.

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증점제 생산을 위한 생물 반응기에 대한 연구 -Xanthomonas Campestris에 의한 Xanthan gum 생산에서 질소원의 영향에 관한 연구- (A Bioreactor for the Production of Viscosifier -A Study on Effect of Nitrogen Source on the Production of Xanthan Gum by Xanthomonas campestris-)

  • 김재형;이기영
    • KSBB Journal
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    • 제6권4호
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    • pp.369-377
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    • 1991
  • Xanthomonas Campestris에 의한 Xanthan gum 생산에서 질소원의 영향에 관한 연구 결과를 요약하면 아래와 같다. Sodium glutamate를 질소원으로 채용한 xanthan gum 생산발효에서 세포 생산량에 대한 생산물 생성량, 세포 생산량에 대한 탄소원 소비량은 초기질소농도에 독립적이었다. 0.4-1.0g/L의 $S_o$범위에서 $B_s$${\beta}_s$는 상수를 보였고 sodium glutamate질소원과 peptone질소원 사이에서 질소원 차이에 따른 차이는 없었다. Xanthan gum생산수율은 탄소/질소농도가 10-16일 때 최대값을 보였다. Peptone질소원은 sodium glutamate질소원보다 세포 성장에 더 효율적이다. Peptone만을 질소원으로 사용한 발효와 혼합질소원을 질소원으로 사용한 발효가 생산물 생산수율 및 발효시간이 유사하므로 xanthan gum생산시 혼합질소원을 질소원으로 사용할 경우 xanthan생산원가를 절감할 수 있다.

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Endophytic Bacillus subtilis MJMP2 from Kimchi inhibits Xanthomonas oryzae pv. oryzae, the pathogen of Rice bacterial blight disease

  • Cheng, Jinhua;Jaiswal, Kumar Sagar;Yang, Seung Hwan;Suh, Joo-Won
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제59권2호
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    • pp.149-154
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    • 2016
  • An endophytic bacterial strain was isolated from kimchi, a Korean traditional fermented Brassica campestris and identified as Bacillus subtilis MJMP2 based on the 16S rRNA sequence. This strain showed strong antagonistic activity against Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) KACC10331, the pathogen of bacterial rice blight disease, as well as activity against some other rice phytopathogenic fungi. The active compound was purified through size-exclusion chromatography and preparative High-performance liquid chromatography. The molecular weight was determined as m/z 1043 by mass spectroscopy, which is identical to that of iturin A. Furthermore, a crude extract from the culture supernatant of Bacillus subtilis MJMP2 showed inhibitory activity against rice blight disease in both a rice leaf explant assay and a pot assay. The crude extract also enhanced the length of roots of Arabidopsis thaliana. These results suggest that the strain Bacillus subtilis MJMP2 could be used as a biological agent to control rice blight disease.

OCT 플라스미드를 갖는 원유 분해세균에 의한 Octane 분해능 (Octane Biodegradability by Crude Oil4 tilizing Bacteria Carrying OCT Plasmid)

  • 최순영;김창숙;황문옥;민경희;이명혜
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.82-87
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    • 1991
  • 원유 분해세균에 의한 원유 분해능을 조사한 결과, Xanthomonas camperstris M12, Xanthomonas sp. M28, Acintobacter lwoffi G1, Klebsiella pneumoniae L25, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 등의 순서로 나타났다. Xanthomonas maltophilia M12, Xanthomonas sp. M28, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 균주 모두 pctane 분해시의 온도는 $30^{\circ}C$에서 최적이었으며, 최적 pH는 X.camperstris M12와 Xanthomonas sp. M28이 7.0-7.5 이었고, P.maltophilia N246이 7.5-9.0이었다. N246 균주의 최적 NaCl농도는 3.0-3.5 이었다. P.maltophilia N246와 X.campestris M12는 모두 플라스미드를 갖고 있음을 확인하였고, N246 균주로 부터 플라스미드를 제거하였을 경우 octane 분해능이 소실되었으므로 이 플라스미드 위에 octane 분해 유전자가 있음이 확인되었다. 이 균주이 OTC 플라스미드의 크기는 118kb이었다. 또한, N246 균주는 ampicillin 항생제에 내성을 나타내었다.

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