To evaluate an effect of oxygen free radical on the toluence metabolism, the rats were fed on a tungstate sup-plemented diet(0.75g of tungstate included in 1kg of standard diet) or a standard diet. To the present xanthine oxidase deficient animal model, toluene(0.15ml/100g of body weight) was injected and then the animals were sacrificed after 24 hrs to determine the toluene metabolizing enzyme activities and toluene metabolite, hippuric acid concentration. The increasing rate of urinary hippuric acid concentration was significantly(p<0.01) higher in tungstate fed animals than in standard diet fed ones. Hepatic cytochrome P_450 contents were significantly higher(p<0.01) in tungstate fed animals than in standard diet fed ones. And tungstate fed animals showed a ten-dency of higher activities of benzylalcohol dehydrogenase while a significantly higher activites of benzaldehyde dehydrogenase (p<0.01) than standard diet fed animals. In conclusion, the more possibly reduced oxygen free radical in toluene-treated rats fed with a tungstate supplemented diet than in those fed with a standard diet would be responsible for the enhancement of toluene metabolism.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.2
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pp.268-273
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2000
To investigate an effect of the ethanol extract of Lycium chinense(EELC) on the activities of enzymes scavenging oxygen free radicals or detoxicating alcohol. The ground Lycium chinense was extracted with 30% edible ethanol and then diluted with 6% ethanol to contain 2% EELC(w/v). Three different groups of male Sprague-Dawley rats had taken a drink EELC, ethanol(ETH) or water(control), respectively for 2 months. At the end of experimental period, the animals were sacrificed and obtained the following findings. The EELC-treated animals showed the highest activity of hepatic glucose-6-phosphatase among three groups. The activities of xanthine oxidase and cytochrome p-450 from EELC treatment group were lower than those from ETH-treated group. However, the activity of superoxide dismutase was higher in the EELC-treated group than the ETH-treated(p<0.005). Furthermore, hepatic alcohol or aldehyde dehydrogenase activity, and glutathione content and glutathione peroxidase were significantly higher in EELC-treated animals than in ETH-treated those. The activity of glutathione S-transferase in liver was appeared the orderly higher value in EELC, ETH and control-treated group. As the result, EELC may affect the reduction of oxygen free radical production and help the detoxication of ethanol.
It has been well known that ischemia and reperfusion injury to skeletal muscle following an acute arterial occlusion causes significant morbidity and mortality. The skeletal muscle, which contains high energy phosphate compounds, has ischemic tolerance. During the ischemia, the ATP is catalyzed to hypoxanthine anaerobically and hypoxanthine dehydrogenase is converted to xanthine oxidase. During reperfusion, the hypoxanthine is catalyzed to xanthine by xanthine oxidase under $O_2$, presence and that results in production of cytotoxic oxygen free radicals. These cytotoxic free radicals, $O_2^-,\;H_{2}O_2,\;OH^-$, are toxic and make lesions in skeletal muscle during reperfusion. The authors perform the present study to investigate the effects of allopurinol, the inhibitor of xanthine oxidase, on reperfused ischemic skeletal muscles by observing the ultrastructural changes of the muscle fibers. A total of 48 healthy Sprague-Dawley rats weighing from 200 g to 250 g were used as experimental animals. Under urethane(3.0mg/kg., IP) anesthesia, lower abdominal incision was done and the left common iliac artery were ligated by using vascular clamp for 1, 2 and 6 hours. The left rectus femoris muscles were obtained at 6 hours after the removal of vascular clamp. In the allopurinol pretreated group, 50mg/kg of allopurinol was administered once a day for 2 days and before 2 hours of ischemia. The specimens were sliced into $1mm^3$ and prepared by routine methods for electron microscopic observations. All preparations were stained with uranyl acetate and lead citrate, and then observed with Hitachi -600 transmission electron microscope. The results were as follows: 1. In 1 hour ischemia/6 hours reperfused rectus femoris muscles of rats, decreased glycogen particles and electron density of mitochondrial matrix and dilated terminal cisternae are seen. In 2 hours ischemia/6 hours repersed rectus femoris muscles of rats, mitochondria with electron lucent matrix, irregularly dilated triad and spheromembranous bodies are observed. In 6 hours ischemia/6 hours reperfused rectus femoris muscles of rats, irregularly arranged myofibrils, and many spheromembranous bodies, fat droplets and lysosome are seen. 2. In 1 hour ischemia/6 hours reperfused rectus femoris muscles of rats pretreated with allopurinol, decreased glycogen particle and dilated cisternae of sarcoplasmic reticulum and triad are observed. In 2 hours ischemia/6 hours reperfused rectus femoris muscles of rats pretreated with allopurinol decreased electron density of mitochondrial matrix and spheromembranous bodies are seen. In 6 hours ischemia/6 hours reperfused rectus femoris muscles of rats pretreated with allopurinol, mitochondria with electron lucent matrix, spheromembranous bodies and dilated cisternae of sarcoplasmic reticulum and terminal cistern are observed. The results suggest that the allopurinol attenuates the damages of the skeletal muscles of rats during ischemia and reperfusion.
To evaluate the skin toxicity oj topical toluene application, toluene (35 mg/$cm^2$) was sequentially applied to the portion rat skin for five days. The topical toluene application resulted in increased xanthine oxidase activity and CYP content, and significantly decreased superoxide dismutase and glutathione peroxidase activities at five days in rat skin. Especially catalase activity was remarkably decreased in toluene-applied rat skin. And benzylalcohol dehydrogenase activity showed also a significant decrease in toluene-applied skin. On the other hand, histopathological ultrastructural examination revealed disrupted epidermal basement membrane, rared intercellular adhensions and degenerated keratin layer due to topical toluene application. Increased deposit of cerrous perhydroxide resulted from reaction with $H_2O_2$was abserved in toluene-treated animals. These results indicate that oxygen free radical may be responsible for ultrastructural changes in skin tissue by toluene application to rat skin.
To evaluate the skin toxicity of topical cyclohexane application (25mg/$\textrm{cm}^2$) was sequentially applied to the rat skin for four days. On the histopathological findings in the light micrographs, neutrophils and engulfed neutrophils are seen, and many cytoplasmic processes were appeared in proliferated layer whereas in the dermis area, increased numbers of fibroblast, accumulation of neutrophil and lipid droplets are demonstrated. On the other hand, applying the cyclohexane to the rat skin led to the remarkable rise of cutaneous xanthine oxidase activity and similar activities of superoxide dismutase and glutathione peroxidase and glutathione content and declined activity of glutathione S-transferase compared with control group. Especially the remarkably decreased activity of aniline hydroxylase (AH) was appeared in skin as little as scarcely determined. Furthermore, the applying the cyclohexane to skin led to the significantly increased activity of hepatic AH and alcohol dehydrogenase. These results indicate that oxygen free radical and intermediate metabolite of cyclohexane may be responsible for structural changes in skin by cyclohexane application to rat skin.
To investigate an effect of Gam-Roa tea on the free radical or alcohol detoxicating enzyme activities, the rats got a drink at the Gam-Roa tea instead of water for 3 months, and then the animals were sacrificed and obtained the following findings. The animals receiving Gam-Roa tea showed a decreasing tendency of hepatic xanthine oxithine oxidase activity and significantly incresed content of cytochrome P-450 compared with the control. Furthermore, hepatic superoxide dismutase and glutathione S-transferase activities were also more increased in rats received Gam-Roa tea than in the control group, those receiving water. On the other hand, alcohol or aldehyde dehydrogenase activities were more increased in rats receiving Gam-Roa tea than the control. In conclusion, it is likely that the liver of rats receiving Gam-Roa tea may have the oxygen free radical or alcohol detoxication potential.
In oder to investigate the effects of pH and temperature on the formation of bromate ion, which is ozonation by-products of bromine containing natural water. At the same intial pH condition, the increase of pH shown similar trends even if the reaction variables such as temperature and reaction time of ozonation were changed. As pH and temperature were increasing, the bromate concentration was increased but bromine components (HOBr/OBr-) were decreased with increasing pH from 3 to 10. Lipid peroxide content in the kidney was increased by bromate which was ingestion with 0.4g/L for 24 weeks in drinking water. Renal cytosolic enzyme system (XO, AO) of bromate group were significantly increased in comparison with those of normal group. But microsomal enzyme system were not affected. BUN level and urinary ${\gamma}$-glutamyltransferase activity were significantly increased in comparison with those of the normal. But, urinary lactate dehydrogenase activity was not affected. Renal glutathione content of rat was significantly decreased in comparison with those of normal rat given bromate. Renal glutathione S-transferase and ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase activities were significantly decreased in bromate-treated group, but change in renal glutathione reductase activity was not significantly different from any other experimental group.
Kwon Kang Beom;Park Cheon Su;Kim In Gyu;Kim Hyun Gyu;Choi Ki Bang;Kim Yong Bok;Ryu Do Gon
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.17
no.1
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pp.220-224
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2003
To test the protective effect of Sophorae Radix (SR) on the damage of cardiac endothelial cells by xanthine oxidase (XO)/hypoxanthine (HX)-induced oxygen tree radical, Neutral Red (NR), lactate dyhydrogenase (LDH), and c-fos immunopositive cells assay were used in the presence of SR extract. The results of these experiments were obtained as follows ; Cardiac endothelial cells treated with XO/HX showed the cytotoxicity such as a decrease in viability, and increases in LDH activity and c-fos immunopositive cells. Cardiac endothelial cells pretreated with SR extract protected the increase of LDH activity. Alos, cardiac endothelial cells pretreated with SR extract inhibited the increase of c-fos immunopositive cells. These results show that XO/HX induces toxic effects in cultured cardiac endothelial cells derived from neonatal rat, and suggest that SR extract is very effective in the prevention of XO/HX-induced toxicity.
Antioxidative and scavenging effects were investigated by using two hyaroxycinnamic acids (caffeetannins). such as caffeic acid and chlorogenic acid, on oxidative stress and hepatotoxicity that induced by paraquat. The results are summerized as follows: 1. To assess radical scavenging ability, reduction concentration (IC$\sub$50/) of 1.1 diphenyl-2-dipicrylhydrazine (DPPH) were measured. IC$\sub$50/ values of caffeic acid and chlorogenic acid were 29.7 ${\pm}$0.6 ${\mu}$M and 26.0${\pm}$0.5 ${\mu}$M respectively. Their radical scavenging activities showed concentration-dependent manner. 2. In H$_2$O$_2$-induced hemolysis assay to rat blood, caffeic acid and chlorogenic acid led to different effects, whose hemolysis inhibition ratios at 100 ${\mu}$M were 45.2${\pm}$7.1% and 11.6${\pm}$3.1% respectively 3. In hypoxanthine-xanthine oxidase system producing superoxide anion, caffeic acid and chlorogenic acid showed different inhibitory activities of xanthine oxidase showing 36.8${\pm}$4.3% and 5.4${\pm}$2.3% respectively. 4. To microsomal NADPH dependent cytochrome p-450 reductase in rat liver, paraquat consumed NADPH at a dose-dependent manner from 0 to 1 ${\mu}$M paraquat concentration. Caffeic acid and chlorogenic acid blocked NADPH consumption rates at concentration-dependent manner and inhibition ratios at 100 ${\mu}$M were 67.6% and 59.2% respectively. 5. Administration (30mg/kg, iv) of paraquat to rats caused the marked elevation of glutamic oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic pyruvic transaminase (GPT), lactate dehydrogenase (LDH), alkaline phosphatase (ALP) and lipid peroxides (LPO) in the serum and lipid peroxides in the microsome as compared to the control group. Serum GOT, GPT, LDH, ALP and LPO and liver microsomal LPO were reduced significantly by caffeic acid (50mg/kg), chlorogenic acid (25mg/kg) and silymarin (150 mg/kg) as compared to the paraquat group. From these results, caffeic acid and chlorogenic acid exerted their antioxidative agents by removing reactive oxygen substance (ROS) and scavenging effects by inhibiting ROS generating enzyme. As a general, two hydroxyeinnamic acids showed the useful compounds for scavenger and reducer on the paraquat induced hepatotoxicity.
Effect of cyclohexanone treatment on the activities oxygen free radical and cyclohexanone metabolizing enzyme in acute liver damaged rats, was investigated. Acute liver damage was induced in rats with pretreatment of 50% $CCl_4$ in olive oil(0.1ml/100g body wt) intraperitoneally 3 times every other day. Cyclohexanone(1.56g/kg body wt, i.p.) was administered to the animals 24 hours after the last Pretreatment of CC1$_4$. Rats were sacrificed at 4 hours after injection of cyclohexanone. On the basis of liver weight/body weight(%), serum levels alanine aminotransferase activity and hepatic protein content, cyclohexanone treatment to acute liver damaged animals led to the more enhanced liver damage. On the other hand, injection of cyclohexanone to the rats led to the increased activities of hepatic cytochrome P-450 dependent aniline hydroxylase and xanthine oxidase. Furthermore, by treatment of cyclohexanone to the acute liver damaged rats hepatic xanthine oxidase activity was more increased than the $CCl_4$ treated rats. In case of oxygen free radical scavenging system, the hepatic glutathione content and the activities of hepatic glutathione S-transferase, catalase, superoxide dismutase were generally increased by injection of cyclohexanone to rats, and the hepatic glutathione content, catalase and alcohol dehydrogenase activities were more decreased in liver damaged rats by the treatment of cyclohexanone. In conclusion, the cyclohexanone treatment to acute liver damaged rats led to enhancement of liver damage that may be due to oxygen free radical together with cyclohexanone.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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