Four sulfoanmides ; sulfamerazine ; sulfamethazine, sulfathiazole and sulfadimethoxine from muscle, kindney, liver and heart tissues of pork and chicken by LC. Residual sulfonamides were extracted with dichloromethane and determined on a Sperisorb ODS-1 column(250mm$\times$4.6mm id) with acetonitrile/water/acetic acid (30/70/0.3 v/v) as a mobile phase at 260nm. Recoveries from 4 tissues of pork and chicken samples fortified with 50 and 100 ppb were 71.2~87.2% and 73.7~89.6%, respectively. The detection limit was 0.03 $\mu\textrm{g}$/g in each drug. Sulfamethazine in 5 samples of pork. And sulfadimethoxine in 5 samples and sulfamethazine in 3 samples were also detected from 41 samples of chicken. The order of residue levels of sulfonamides in tissues was kidney>liver>heart>muscle, respectively. The residue levels of sulfonamides from kidney and liver were 0.03~0.15 $\mu\textrm{g}$/g in porks and 0.03~0.10 $\mu\textrm{g}$/g in chickens.
잔류물질 간이 시험법으로 EEC-4 plate test와 Charm II test가 항생물질과 합성항균제 잔류검사에 널리 이용되고 있는 바, 이들 상호간의 결과 수치를 비교, 분석한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. EEC-4 plate혹은 Charm II 에서 양성으로 나타난 돈육 71건에 대하여 HPLC로 정량 분석한 결과, only tetracyclines 46건, only sulfonamides와 solfonamides+tetracyclines가 각각 4건씩, amphenicols+tetracyclines와 amphenicols+sulfonamides+tetracyclines가 각각 1건씩 검출되었고, 15건에서는 검출되지 않았다. Sulfonamides 계열에서 검출된 9건의 경우, Charm-II test 결과 수치가 낮은 경우에 정량 검출량이 높게 나타났고, EEC-4 plate test 결과 pH 6.0, pH 7.2, pH 8.0 모두에서 양성으로 나타나는 등 두 시험방법 간에 연관성이 있었고, chloramphenicols 계열에서 검출된 2건과 검출되지 않은 7건의 경우, Charm-II test결과 수치가 낮은 경우에는 오히려 정량 검출되지 않았으나, control point 근방의 양성 수치에서는 검출량이 높게 나타날 뿐 아니라 EEC-4 plate test에서도 pH6.0, pH7.2, pH8.0 모두에서 양성으로 나타나는 등 두 시험방법 간에 연관성이 있었다. 한편, tetracycline계열의 경우, EEC-4 plate와 Cham-II간에 연관성은 없었다. 또한, EEC-4 plate와 Charm II에서 각각 양성을 나타내었으나 HPLC에서는 검출되지 않는 경우는 tetracyclines계열에서는 $10.5\%(6/57)$, sulfonamides계열의 경우는 없었고, chloramphenicols계열의 경우는 $81.8\%(9/11)$로 각각 나타나 EEC-4 plate와 Charm II가 세 가지 잔류물질 시험에 대한 screening method로서 적합함을 알 수 있었다.
A shake-flask method was used to determine the n-octanol/water partition coefficients of sulfamethazine, sulfadimethoxine, sulfamethoxydiazine, sulfamonomethoxine, sulfamethoxazole, sulfaquinoxaline and sulfachloropyrazine from (298.15 to 333.15) K. The results showed that the n-octanol/water partition coefficient of each sulfonamide decreased with the increase of temperature. Based on the fluid phase equilibrium theory, the thermodynamic relationship of n-octanol/water partition coefficient depending on the temperature is proposed, and the changes of enthalpy, entropy, and the Gibbs free energy function for sulfonamides partitioning in n-octanol/ water are determined, respectively. Sulfonamides molecules partitioning in n-octanol/water is mainly an enthalpy driving process, during which the order degrees of system increased. The temperature effect coefficient of n-octanol/water partition coefficient is discussed. The results show that its magnitude is the same as that of values in the literature.
The displacement of protein bound sulfonamides (sulfisoxazole, sulfamethoxazole, sulfisomidine) by furosemide was investigated in bovine serum albumin by equilibrium dialysis method. Furosemide $(2{\times}10^{-4}M)$ in bovine serum albumin ($7.24{\times}10^{-5}$, $1.45{\times}10^{-4}$, $2.89{\times}10^{-4}M$). Sulfisoxa캐1e and furosemide were bound reversibly to bovine serum albumin and competitive for the same binding sites when administered together. Consequently, dosage regimen of sulfisoxazole should be adjusted carefully when sulfisoxazole is administered along with furosemide.
HPLC를 이용한 분석은 항균, 항생제의 정량분석에 있어 가장 널리 이용되고 있으며, 최근에 개발된 MSPD방법은 고정상을 직접 갈아서 추출, 정제하는 방법으로 전처리 시 그조작이 간단하며, 유기용매가 적게 들고 전처리 시간이 짧다는 장점이 있다. 본 연구는 HPLC와 MSPD방법을 이용하여 가축 중 소비량이 가장 많은 돼지고기와 생선 중 회로 가장 많이 소비되는 광어에 대하여, 식품 중 잔류 가능성이 높은 tetracycline계 항생제 3종(oxytetracycline, tetracycline, chlortetracycline)과 sulfonamide(sulfadimethoxine, sulfamerazine, sulfamethazine, slfaquinoxaline, sulfamonomethoxine) 5종의 동시분석방법을 개발코자 하였다. HPLC의 최적 분석조건으로 파장은 tetracycline계 항생물질은 360 nm에서 sulfonamide는 270 nm였으며, 이동상은 TC와 SMR이 분리되는 시점인 15분까지는 pH 4.5, oxalic acid : acetonitrile (78.5 : 21.5, v/v)로 분석하고 이후 30분까지는 pH 6.1, oxalic acid : acetonitrile (78.5 : 21.5, v/v)로 분석을 실시하였을 때 기존의 실험방법보다 피크의 분리도와 검출한계의 개선이 이루어졌으며 이를 토대로 8가지 성분의 MRLs인 $0.1{\sim}0.2mg{\cdot}kg^{-1}$까지 충분히 분석이 가능하였다. MSPD 적용을 위한 시료의 전처리 방법개선은 기존의 0.5 g으로 제한된 시료량을 3 g으로 늘릴 수 있었고 dichloromethane 20 mL와 methanol 20 mL로 연속적으로 8가지 성분을 동시에 용출시켜 sulfonamide는 $80.25{\sim}101.25%$, tetracycline계 항생물질은 $85.77{\sim}121.42%$의 회수율을 얻을 수 있었다.
Kim, Sung Ah;Jo, Seung-Hyun;Cho, Jin Hwa;Yu, Min Yeong;Shin, Ho-Chul;Kim, Jung-Ae;Park, Sung Goo;Park, Byoung Chul;Kim, Sunhong;Kim, Jeong-Hoon
Molecules and Cells
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제43권11호
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pp.935-944
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2020
Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator (ARNT) plays an essential role in maintaining cellular homeostasis in response to environmental stress. Under conditions of hypoxia or xenobiotic exposure, ARNT regulates the subset of genes involved in adaptive responses, by forming heterodimers with hypoxia-inducible transcription factors (HIF1α and HIF2α) or aryl hydrocarbon receptor (AhR). Here, we have shown that ARNT interacts with DDB1 and CUL4-associated factor 15 (DCAF15), and the aryl sulfonamides, indisulam and E7820, induce its proteasomal degradation through Cullin-RING finger ligase 4 containing DCAF15 (CRL4DCAF15) E3 ligase. Moreover, the two known neo-substrates of aryl sulfonamide, RNA-binding motif protein 39 (RBM39) and RNA-binding motif protein 23 (RBM23), are not required for ARNT degradation. In line with this finding, aryl sulfonamides inhibited the transcriptional activities of HIFs and AhR associated with ARNT. Our results collectively support novel regulatory roles of aryl sulfonamides in both hypoxic and xenobiotic responses.
Triphenyl Tetrazolium Chloride(TCC) reduction test is simple and sensitive to some residual antibiotics (especially to penicillin) in milk, but comparatively insensible to sulfo-namides. The volumn of sample is also large. Thus this study was undertaken to increase the detectable level of sulfonamides in raw milk. In this study, we used small transparent plastic hole and pulp disc instead of 10m1 test tube and made test medium in which was added 0.08%TTC, 0.3% agar, 10% skim milk, approximately $10^6$ CFU/ml streptococcus thermophilus and 5ppm Trimethoprim to enhance the sensitivity for sulfonamides The results of TCC reduction test by disc plate method were summarized as follows : 1. sensitivity to residual sulfonamides were much higher than official TCC reduction test. Detectable limites of sulfamethazine, sulfamerazine, sulfathiazole, sulfachloropy-ridazine, sulfadimethoxine, sulfamononethoxine, sulfadiazine and sulfaquinoxaline were 0.1-0.5ppm levels. 2. Detectable limites to some antibiotics were simillar or good than that of official method as 0.005-0.1ppm to three ${\beta}$ -lactams, 0.25-0.5ppm to one macrolide, 2-10ppm to three aminoglycosides, 0.2-0.5ppm to three tetracycline, 0.1-0.5ppm to chloramphenicol. 3. Only 0.1ml of milk was needed to test and the test medium could be stored appnoximatly 7days in the refrigerator. So test procedure was convenient than offcial method. 4. These results suggest that disc plate method is more useful to detect bacterial growth inhibition substances including sulfonamides in raw milk.
Sulfonamides are widely used to treat mastitis of cattle in field. The study was carried out to analyze sulfonamid residues In raw milk from south Kyeonggi area. The milk sample was deproteinated with acetone and defatted with hexane. The residual sulfonamides were extracted with ethylacetate, concentrated under vaccum, reconstituted with the acetate buffer-methanol mixture, reacted with fluorescamine, and then analyzed by HPLC-fluorescence detector(EX. 39nm, Em. 495nm) with methanol : acetate buffer system(3/2, v /v) as a mobile phase. The results analyzed by Thin layer chromatography and High performance liquid chromatography were summarized as follows. 1. A total of 24 cases out of 478 raw milk samples(5.0%) collected during April and May showed positive reaction to sulfonamide residues. Among 24 positive reactors, 9 cases were positive to sulfanilamides(32.1%), 8 cases were positive to sulfathiazoles(28.6%) and 5 cases were positive to sulfamonomthoxines (7.9%) , respectively. 2. During July and August, 31 cases out of 464 raw milk samples(6.7%) showed positive re action to sulfonamide residues. Among them S cases were positive to sulfanilamides, 5 cases sulfathiazoles and 5 cases sulfamonomethoxines(16.1%), respectively.
A lateral flow immunoassay kit based on antigen-antibody interactions was developed to detect residues of beta-lactams, quinolones, tetracyclines, and sulfonamides in farmed fish. Group-specific antibodies showing cross-reactivity with other antibiotics in the same group were produced in rabbits. The rabbits were immunized eight times to obtain the maximum titers. Antibodies were extracted from the antisera collected from the immunized rabbits and produced group-specific reactions with antibiotics from the four groups. A kit was prepared that optimize conditions for the antigen-antibody reaction, using colloidal gold conjugated antibodies, and was designed to detect the four groups of antibiotics simultaneously. The kit enabled the detection of antibiotics in the four groups at below maximum residue limits (MRLs), which were $200{\mu}g/kg$ for tetracyclines, $100{\mu}g/kg$ for sulfonamides, $50{\mu}g/kg$ for beta-lactams, and $100{\mu}g/kg$ for quinolones. The cross-reactivity of the antibodies ranged from 10-80% for the sulfonamides, 20-100% for tetracyclines, 38-100% for quinolones, and 20-100% for the beta-lactams, confirming that the antibodies were group specific. The test kit was used 30 times to examine spiked antibiotics at the limits of detection (LODs) and all produced positive results, indicating high sensitivity. The LODs for the assay ranged from 4-20 ng/mL for beta-lactams, 25-50 ng/mL for sulfonamides, 20-100 ng/mL for tetracyclines, and 30-80 ng/mL for quinolones, and there were no false negative reactions at above these LODs. In addition, all of the LODs of the developed kit were correlated with high-performance liquid chromatography (HPLC) data. Our lateral flow immunoassay kit can simultaneously detect antibiotic residues from a large number of fish samples rapidly, strengthening the safety of domestic farmed and imported fish.
This study was carried out to compare the residual antibiotic materials in muscles of slaughter cattle and swine from slaughterhouses in Seoul from 2000 to 2001 by EEC-4-plate method, Charm II and HPLC method. 1. Residual antibiotic materials were detected from 95 samples(0.8%) by EEC-4-plate and 57 samples(10.2%) by Charm II. The final HPLC method determined the positives are 43(45.3%) and 27(47.3%) respectively. 2. The detection ratios were 45% by EEC-4-plate and 47% by Charm II. 3. Seventy samples were classified as tetracyclines 56(75.7.4%), sulfonamides 10(14.9%), $\beta$-lactam 6(8.1%) chloramphenicol 1(1.4%). Three of them were confirmed to be positive simmultaneously for tetracyclines, sulfonamides and chloramphenicol. 4. The highest residual concentration of chlortetracycline, oxytetracycline, sulfamethazine, sulfadimethoxine, sulfaquinoxaline, penicillin, ampicillin and chloramphenicol were 0.34, 11.29, 68.16, 0.13, 4.0, 0.12, 0.4 and 0.04ppm, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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