Optimization of submerged culture conditions for the production of exo-biopolymer from Paecilomyces japonica was studied. Maltose, yeast extract and potassium phosphate were the most suitable sources of carbon, nitrogen, and inorganic salt, respectively, for both production of the exo-biopolymer and mycelial growth. The optimal culture conditions in flask culture were pH 5.0, $25^{\circ}C$ and 150 rpm in a meidum containing of 30 g maltose, 6 g yeast extract, 2 g polypeptone, 0.5 g $K_2HPO_4$, 0.2 g $KH_2PO_4$, 0.2 g $MnSo_4\;{\cdot}\;5H_2O$, 0.2 g $MgSO_4\;{\cdot}\;7H_2O$ in 1-L distilled water. Exo-biopolymer production and mycelial growth in the suggested medium were significantly increased in a 2.5-L jar fermentor, where the maximum biopolymer concentration was 8 g/1.
본 연구는 주변에서 흔히 구할 수 있는 여뀌를 이용하며 유용한 미생물을 대량생산 할 수 있는 값싼 배지를 개발하는데 있다. 길항미생물 B. lentimorbus G-74를 이 배지를 이용하여 최적화한 결과, 30% 여뀌즙액 배지. $35^{\circ}C$. pH 5.0의 조건에서 가장 높은 균체성장을 보였다.
A wireless LAN medical information transmission system is useful for patients who need mobility in a local area environment. This paper proposes a method using WLAN(wireless local area network) and implements a stand-alone system with MAC(meidum access control) layer protocol referenced IEEE 802.11 draft standard. The system consists of a 8bit-microprocessor which handles media access control protocol and a WL100(GEC Plessey) chip which takes care of phsical layer specific routines and uses a RF module DE6003(GEC Plessey). The major features of the implemented system are the CSMA/CA protocol used a consecutive DATA-ACK trasmission method which yields more effective bandwidth allocation for asyncronous traffic transmission and the modified PCF protocol for time-bounded traffic transmission, which operates in ad-hoc network topology apart from IEEE 802.11 draft standard confirm PCF mode operate in infrastruture topology.
This experiment was carried out to improve in vitro development of rabbit one-cell embryos to the blastocyst stage. One-cell rabbit embryos were collected at 19\ulcorner20hr after superovulation induction and incubated at 39\ulcorner in 5% CO2 for 72hr. In order to find optimum conditions in medium that affects the rabbit embryo's development in vitro, RDH medium which mixed with RPMI1640, DMEM and Ham's F10 was compared with the previously reported mediums (Ham's F10 and RD) for embryo development and cell numbers. Three additives (BSA, taurine and glucose) were tested for the development of rabbit one-cell embryos in vitro. When the embryos were cultured in RDH medium, their development was markedly promoted as compared with Ham's F-10 or RD alone. Glucose exhibited no significant effects on embryo development and cell numbers. BSA a, pp.ared to promote transition from morula to blastocyst stage and taurine increased cell numbers of cultured embryos markedly regardless of medium. BSA and taurine together in RDH medium showed the additive effects on embryos development and cell number.
The studies were carried out to investigate the effects of co-culture with cumulus cell, oviduct epithelial cells and uterine endometrial cells on the in-vitro fertilization and cleavage rate of porcine follicular oocytes. The ovaries were obtained from slaughtered swine. The follicular oocytes surrounded with cumulus cells were recovered by aspirating follicular fluids from the visible follicles of diameter 3~5 mm. The follicular oocytes were cultured in TCM-199 medium containing hormones and 10% FCS for 24~48 hrs in a incubator with 5% CO2 in air at 38.5$^{\circ}C$ and then matured oocytes were again cultured for 12~18 hrs with motile capacitated sperm by preincubation. The results obtained in these experiments were summarized as follows : 1. The in-vitro maturation and fertilization rate of porcine oocytes co-cultured with cumulus cells in TCM-199 meidum were 64.6%~74.5% and 37.5%~55.3%, respectively. And in-vitro fertilization rate of cumulus-enclosed oocytes(51.5%) were significantly(p<0.05) higher than cumulus-denuded oocytes(21.7%). 2. The in-vitro maturation and fertilization rate of porcine oocytes co-cultured with 1$\times$104 cells/ml, 1$\times$106 cells/ml, 1$\times$108 cells/ml and 1$\times$1015 cells/ml oviduct epithelial cells in TCM-199 medium were 53.5% and 37.2%, 61.7% and 46.8%, 54.5% and 31.8%, 42.2% and 26.7%, respectively. 3. The in-vintro maturation and fertilization rate of porcine oocytes co-cultured with 1$\times$106/ml, 1$\times$108/ml, 1$\times$1015/ml uterine endometrial cells in TCM-199 medium were 54.3% and 39.1%, 58.3% and 43.8%, 55.5% and 33.3%, and 45.7% and 30.4%, respectively. 4. When the in-vitro fertilized oocytes were co-cultured with porcine cumulus cells, ovdiduct epithelial cells and uterine endometrial cells, the development rate to the blastocyst stage was 9.5%, 10.7% and 11.8%, respectively and the rates were higher than that of control, 2.1%(p<0.05).
억새즙액을 이용하여 유용한 미생물의 대량배양을 위한 새로운 배지를 개발하고자 본 연구를 수행하였다. 억새즙액의 성분을 조사한 결과 칼륨 (37,952 mg/L), 질소 (14,000 mg/L), 인산 (6,800mg/L), 마그네슘 (5,969 mg/L), 칼슘 (5,910 mg/L) 등이 주성분을 차지하였다. 본 연구를 위하여 먼저 식물병원성균인 뿌리썩음병 원인균인 Rhizoctonia solani, 잿빛곰팡이 병을 일으키는 Botrytis cinerea에 대하여 강력한 저해 활성을 갖는 길항균 G-74를 토양으로부터 분리하였으며, 이 균의 형태관찰과 MIDI 분석을 통하여 Bacillus lentimorbus G-74 균주로 최종 동정하였다. 이 균의 억새즙액 배지에 대한 최적 배양조건을 조사한 결과 30% (V/V) 희석배지, $35^{\circ}C$ 배양온도, 5.0의 초기 배지 pH에서 가장 좋은 성장을 기록하였다. 또한 이 배지에 탄소원으로서 2.0% (W/V)의 corn starch 및 질소 원으로서 1.0% (W/V)의 yeast extract를 추가적으로 첨가하면 최상의 성장을 보여주었으며, 이 경우 대조구인 LB 배지보다도 균체성장이 66% 이상 증가하였다.
Bacteroides fragiles Roid8은 인간의 장내에서 가장 우세한 균종에 속하는 것으로서 효소활성을 측정해본 결과 다른 균들에 비해 $\alpha-fucosidase$의 활성이 높은 것으로 나타났다. 본 연구실에서 조사된 $\alpha-fucosidase$의 생산 최적배지 조성은 1L 배지당 BHI 37g, hemin 10mg, cysteine 0.5g, resazurin 1mg, vitamin K 1mg, starch 5g을 함유하였다. 또한 DEAE-sepharose와 CM-cellulose 크로마토그래피를 거쳐 조효소액을 분리하여 조사한 결과 효소의 최적 반응온도는 $40^{\circ}C$, 최적반응 pH는 7.0이었다. 무기 금속이온의 영향은 $Co^{++}\;and\;Zn^{++}$ 존재 하에서 효소역가가 낮아졌다.
Pseudomonas 속에 속하는 여러균주의 원형질체 생성을 위한 최적조건과 이들의 재생에 영향을 미치는 몇 가지 요인들을 조사하였다. Pseudomonas는 lysozyme ($100{\mu}g/ml$)과 10mM EDTA를 처리하였을 때 99.0%에서 99.9%까지 원형침체로 천환 되었으며, 이때 사용한 완충액의 최적 pH는 8.0이였고 효소처리는 상온에서 진탕하지 않고 처리하였을 때가 비교적 균주간에 차이가 없이 효과적으로 원형질체가 생성되었다. $MgCl_{2}$ 그러고 Streptomycin수용액이 윈형 질체의 안정성을 높였고, 원형질체의 생성에는 $Mg^+\;and\;Na^+$ 이온이 효과적으로 작용하였다. 원형질체의 재생은 Rich Regeneration Medium배지에 20mM $MgCl_{2}$를 첨가하였을 때 원형질체의 재생율이 28배까지 증가하였다. 원형질체의 생성과 그것을 희석하는데 사용한 완충액에 1% Bovine Serum Albumlne를 첨가한 경우 재생율이 10배 가까이 증가되었고, 또한 완충액에 1% BSA를 첨가하고 재생배지에 0.5% 제라틴을 첨가했을 때에는 14배까지 재생율이 증가되어다.
1) The comparative studies of the quantitative measurement of growth characteristics and utilization of substrates by Euglena gracilis var. bacilla 10616 in the light and in darkness have been carried out. Eodogenous respiration, effect of respiratory inhibitors and responses to the added substrates for the exogenous respiration are also investigated. 2) All cultures are grown in the open air under the continuous illumination of fluorescent light of 3500 lux at room termperature, the growth rate of the culture in the basal medium added 0.5% lactate is found to be the highest. The growth rate decreases successively for the cultures of 0.5% sucinate, 0.5% Na-acetate, 0.5% malate, and control. There is no growth in the basal meidum added 0.5% butyrate and 0.5% hydroquinone. The similar results are obtained for the mentioned cultures in the darkness. However, the growth rate in basal medium added 0.5% glucose and 0.5% sucrose does seem to increase in the darkness unlike the illumination. 3) The endogenous rate of respiration for the organism cultured photosynthetically is about 12.94ul 02/mg/hr, in basal medium and the respiratory quotient is about 0.84. The rate is decreased by starvations to 6.5ul 02/mg/hr, about to a half, but the respiratory quotient does net change. 4) The oxygen consomption during initial 2 hours in suspending solution ranging from pH 4.5 to pH 9.3 is highest at pH 4.5 in which the algae had grown, at pH 5.5 and at pH 6.9. 5) Endogenous respiration of the cells is strongly inhibited by 0.1M of potassium cyanide, malomic acid, sodium fluoride and iodo-acetic acid. It is also strongly inhibited by 0.01M of potassium cyanide. 6) The respiratory response to added substrates for the exogenous respiration in the organism is coincided with the rate in the basal medium added the substrate in light and in darkness, whether the cells are fed or starved. 7) According to the results of this study, there seems to be the flexibility of the interconversion between photosynthesis and chemosynthesis, heterotropic mode of metabolism, in Euglena gracilis var. bacillaris, and that this organism utilizes the lactate most. It also may be suggested that the enayme systems linked in the each steps of Embden-Myerhof-Parnas path way and TCA cycle seem to exist in this organism.
본 연구는 느타리버섯 재배에 있어서 유기성폐기물의 일종인 남은 음식물을 대체배지로 이용할 수 있는지에 대한 가능성을 알아보기 위한 연구였다. 남은 음식물 배지를 이용시 문제점으로 지적되고 있는 수분 조절 및 배지 내 압밀현상 극복을 위해 지렁이 분변토를 첨가하여 그 효과를 검토하였다. 느타리버섯 주요 6 균주의 품종별 균사 생장 능력을 조사한 결과, 장안5호(PL. 6) 품종을 제외하면, 모든 품종에서 관행적으로 이용되고 있는 배지에 비해 음식물 배지에서의 초기 균사 생장이 미약한 것으로 나타났다. 또한, 남은 음식물의 수분조절을 위해 분변토를 첨가하여 퇴비화한 배지에서 생장한 결과 최적 분변토 혼합비율은 30%로 나타났다. 또한, 가장 생육이 우수한 장안5호(PL. 6)의 경우 남은 음식물 배지에서의 균사 생장 속도는 113mm/15day로 나타나 일반적인 느타리버섯 생육과 유사한 결과를 보였다. 남은 음식물에 분변토를 30% 첨가한 후 발효시켜 제작한 배지에서 재배한 장안5호(PL. 6)의 초발이 일수는 13일로 일반 비트펄프를 활용한 배지보다 2배 이상 길었으나, 자실체 갓의 크기는 20.5%, 자실체의 대 길이는 6.2% 더욱 커지는 것을 확인할 수 있었으며, 총 수확량에서 60.5% 이상 증가하는 것으로 확인하였다. 또한, 남은 음식물 배지를 이용하여 생산한 느타리버섯의 영양성분 분석결과 일반 비트펄프 재배 느타리버섯보다 단백질은 70.6%, 비타민 A는 2.4%, 비타민 E는 0.8% 증가하였고, 지방은 12.6% 낮게 분석되었으며, 지방산중 올레산의 함량이 미량 증가하는 것을 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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