Im, Jun Hyung;Yeo, In Jun;Hwang, Chul Ju;Lee, Kyung Sun;Hong, Jin Tae
Biomolecules & Therapeutics
/
v.28
no.2
/
pp.152-162
/
2020
Cerebral ischemia exhibits a multiplicity of pathophysiological mechanisms. During ischemic stroke, the reactive oxygen species (ROS) concentration rises to a peak during reperfusion, possibly underlying neuronal death. Recombinant human erythropoietin (EPO) supplementation is one method of treating neurodegenerative disease by reducing the generation of ROS. We investigated the therapeutic effect of PEGylated EPO (P-EPO) on ischemic stroke. Mice were administered P-EPO (5,000 U/kg) via intravenous injection, and middle cerebral artery occlusion (MCAO) followed by reperfusion was performed to induce in vivo ischemic stroke. P-EPO ameliorated MCAO-induced neurological deficit and reduced behavioral disorder and the infarct area. Moreover, lipid peroxidation, expression of inflammatory proteins (cyclooxygenase-2 and inducible nitric oxide synthase), and cytokine levels in blood were reduced by the P-EPO treatment. In addition, higher activation of nuclear factor kappa B (NF-κB) was found in the brain after MCAO, but NF-κB activation was reduced in the P-EPO-injected group. Treatment with the NF-κB inhibitor PS-1145 (5 mg/kg) abolished the P-EPO-induced reduction of infarct volume, neuronal death, neuroinflammation, and oxidative stress. Moreover, P-EPO was more effective than EPO (5,000 U/kg) and similar to a tissue plasminogen activator (10 mg/kg). An in vitro study revealed that P-EPO (25, 50, and 100 U/mL) treatment protected against rotenone (100 nM)-induced neuronal loss, neuroinflammation, oxidative stress, and NF-κB activity. These results indicate that the administration of P-EPO exerted neuroprotective effects on cerebral ischemia damage through anti-oxidant and anti-inflammatory properties by inhibiting NF-κB activation.
Yoo, Heon-Sook;Gim, Seon-Bin;Song, Hyang-Hee;Ji, Joong-Gu;Bak, Ji Won;Kim, Dong-Hee
Journal of Haehwa Medicine
/
v.21
no.1
/
pp.53-63
/
2012
Objectives : The aim of this study was to investigate the effect of Chunghwatang (CHT) for atopic dermatitis. Methods : CHT, a verified anti-oxidant and anti-inflammatory effect, was treated in atopic dermatitis animal model to investigate cytokine levels and immunoglobulin production. Results : Clinical skin index was 47.1%, suggesting significant efficacy of CHT in atopic dermatitis treatment. Serum IL-4, IL-6, IL-13, TNF-${\alpha}$ and histamine productions were significantly decreased to 52.3%, 61.8%, 68.0%, 37.4%, and 46.6%, respectively. The production of IL-5 was decreased to 33.3%. The increase of Immunoglobulin IgG1 production along with IgE through the interaction of IgE and IL-4 induced by IL-4 and IL-13 were measured as 20.7% and 23.4%, respectively. Conclusions : The results above, along with the in vitro test results, strongly supports the CHT samples as effective immunomodulator in AD treatments, suggesting its use in clinical practice and basic information for EBM.
Park, Jung-Min;Choi, Woo-Ik;Jin, Sang-Chan;Lee, Jae-Ho;Choi, In-Jang
Journal of The Korean Society of Clinical Toxicology
/
v.14
no.2
/
pp.78-82
/
2016
Purpose: Green tea is known as a potent anti-oxidant, anti-carcinogen, and genetic protector. Glyphosate (N-phosphonomethyl glycine) is a widely used non-selective herbicide that causes DNA damage. The present study was conducted to investigate the protective effects of green tea in human blood lymphocytes exposed to glyphosate using the Sister Chromatid Exchange (SCE) frequency method. Methods: Peripheral blood was obtained from 10 volunteers and cultured through four different conditions. Four groups were divided into control, glyphosate only (300 ng/mL), glyphosate and low ($20{\mu}m$) concentrations of epigallocatechin gallate (EGCG) and glyphosate and high ($100{\mu}m$) concentrations of EGCG. Results: The glyphosate exposed groups had a higher mean SCE frequency ($10.33{\pm}2.50$) than the control group ($6.38{\pm}2.28$, p<0.001). The low concentrations of EGCG groups had a lower mean SCE frequency ($9.91{\pm}1.93$) than the glyphosate-only group, although this difference was not significant (p=0.219). However, the high concentration group ($9.49{\pm}1.85$) had a significantly lower SCE frequency than the glyphosate-only group (p=0.001). Conclusion: EGCG has a gene protective effect in human lymphocytes exposed to the genotoxicity of glyphosate in the case of high concentrations.
Kim, Ji-Hyun;Choi, Jung Ran;Cho, Eun Ju;Kim, Hyun Young
Journal of Korean Medicine for Obesity Research
/
v.20
no.1
/
pp.10-19
/
2020
Objectives: Oxidative stress-mediated neuroinflammation has been supposed as a crucial factor that contributes to the pathogenesis of many neurodegenerative diseases. In this study, we aimed to investigate the protective activity against oxidative stress and neuroinflammation of protocatechuic acid (PA), active phenolic compound from Momordica Charantia. Methods: Protective activity of PA from oxidative stress was performed under in vitro conditions. Our study investigated the protective mechanism of PA from neuroinflammation in cellular system using C6 glial cell. To investigate the improvement the effects on oxidative stress and neuroinflammation, we induced oxidative stress by H2O2 (100 μM) stimulation and induced neuroinflammation by treatment with lipopolysaccharide (LPS) (1 ㎍/mL) and interferon-gamma (IFN-γ) (10 ng/mL) in C6 glial cells. Results: PA showed strong radical scavenging effect against 1,1-dipenyl-2-picrylhydrazyl, hydroxy radical (·OH) and nitric oxide (NO). Under oxidative stress treated by H2O2, the result showed the increased mRNA expressions of oxidative stress markers such as nuclear factor-kappaB (NF-κB), cyclooxygenase (COX-2) and inducible nitric oxide (iNOS). However, the treatment of PA led to reduced mRNA expressions of NF-κB, COX-2 and iNOS. Moreover, PA attenuated the production of interleukin-6 and scavenged NO generated by both endotoxin LPS and IFN-γ together. Furthermore, it also reduced LPS and IFN-γ-induced mRNA expressions of iNOS and COX-2. Conclusions: In conclusion, our results collectively suggest that PA, phenolic compound of Momordica Charantia, could be a safe anti-oxidant and a promising anti-neuroinflammatory molecule for neurodegenerative diseases.
In this study, Coffea arabica ethanol extract (CAE) was tested for possible functional cosmetic agent. Whitening effect was measured by tyrosinase inhibition assay, and anti-oxidant activity was checked by SOD-like activity. SOD-like activity of CAE showed $94.8{\pm}6.2%$ at $500{\mu}g/mL$. The anti-bacterial activities CAE was evaluated against three different gram-positive bacteria and six gram-negative bacteria including MRSA strains. CAE exhibited in vitro broad spectrum antimicrobial activities of gram-negative bacteria without antifungal activity. CAE was strong exhibited against MRSA CCARM3561. The tyrosinase and L-DOPA inhibitory activities of the CAE lower than those positive control arbutin. CAE reduced melanin contents of B16-F10 melanoma cell in a dose dependent manner and decrease about 89.2% at a concentration $100{\mu}g/mL$. These result highlight the potential of coffee extract as a naturally active and non-toxic antibacterial suitable for cosmetic applications.
Eum, Won Sik;Jang, Sang Ho;Kim, Dae Won;Choi, Hee Soon;Choi, Soo Hyun;Kim, So Young;An, Jae Jin;Lee, Sun Hwa;Han, Kyuhyung;Kang, Jung Hoon;Kang, Tae-Cheon;Won, Moo Ho;Cho, Yong Joon;Choi, Jin Hi;Kim, Tae Yoon;Park, Jinseu;Choi, Soo Young
Molecules and Cells
/
v.19
no.2
/
pp.191-197
/
2005
The human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) Tat protein transduction domain (PTD) is responsible for highly efficient protein transduction across plasma membranes. In a previous study, we showed that Tat-Cu,Zn-superoxide dismutase (Tat-SOD) can be directly transduced into mammalian cells across the lipid membrane barrier. In this study, we fused the human SOD gene with a Tat PTD transduction vector at its N- and/or C-terminus. The fusion proteins (Tat-SOD, SOD-Tat, Tat-SOD-Tat) were purified from Escherichia coli and their ability to enter cells in vitro and in vivo compared by Western blotting and immunohistochemistry. The transduction efficiencies and biological activities of the SOD fusion protein with the Tat PTD at either terminus were equivalent and lower than the fusion protein with the Tat PTD at both termini. The availability of a more efficient SOD fusion protein provides a powerful vehicle for therapy in human diseases related to this anti-oxidant enzyme and to reactive oxygen species.
A diarylheptanoid, (5S)-1,7-bis-(3,4-dihydroxyphenyl)-5-hydroxyheptane-3-one-5-O-${\beta}$-D-xylopyranoside, named oregonin (1), was isolated from the of Alnus japonica (A. japonica), which is a species of the genus Betulaceae, growing throughout Korea, Japan and China. The structure was elucidated by various spectroscopic methods including negative and positive LC/MS, 1H-NMR, and 13C-NMR techniques or by comparison with authentic samples. In order to evaluate the anti-oxidative activities of oregonin (1) isolated from A. japonica, 1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and 2,2'-azino-bis[3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid] (ABTS) radical scavenging activity were measured in vitro. Oregonin from A. japonica exhibited potent DPPH and ABTS radical scavenging activities. A. japonica shows not only 1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and ABTS radical scavenging activity, but also apoptosis modulative effects. The present results indicate that A. japonica could be a hair-growth-promoting agent for cosmetic products.
Raw-red bean (RR) should be boiled in hot water, and only boiled-red bean (BR) has been used in the food industry. In the course of development of functional food using red- bean (Phaseolus radiatus L), hot- water extracts (HWEs) of RR and BR were prepared, respectively and their components and various biological activities were compared. The extraction yield at $100^{\circ}C$ of RR (16.2%) was higher than that of BR (14.8%), and contents of total polyphenols, total flavonoids and reducing sugars of HWE of RR were 2.5-fold, 2.1-fold and 1.5-fold higher than those of HWE of BR. In anti-oxidation activity assay, scavenging activities against DPPH anion and ABTS cation as well as reducing power of RR was higher than those of BR. The results suggest that the anti-oxidant compounds in red bean might be heat-liable or discarded during boiling in hot-water as a cooking drip. Unexpectedly, nitrite scavenging activity was stronger in HWE of BR than RR. In anti-microbial activity assay, HWE of RR ($500{\mu}g/disc$) showed growth inhibition activity against gram-positive bacteria, whereas HWE of BR did not show any activity against any tested bacteria and fungi. Assay of in-vitro anti-diabetes and anti-thrombosis activities, which were previously reported in ethanol extract of red-bean, revealed that HWEs of RR and BR did not show significant activities against ${\alpha}$-amylase, ${\alpha}$-glucosidase, thrombin, prothrombin, or blood coagulation factors. Our results suggest that the anti-oxidation, anti-diabetes and anti-thrombosis activities of HWEs of RR and BR were lower than those of ethanol extracts of red bean, and bioactive substances in RR were destroyed during boiling or discarded after boiling. Further research on suitable boiling and re-use of cooking drip of red bean is necessary.
Morphology of cumulus-oocyte-complexes (COCs) at germinal vesicle (GV) stage as one of the evaluation criteria for oocyte maturation quality after in vitro maturation (IVM) plays important roles on the meiotic maturation, fertilization and early embryonic development in pigs. When cumulus cells of COCs are insufficient, which is induced the low oocyte maturation rate by the increasing of reactive oxygen species (ROS) in porcine oocyte during IVM. The ROS are known to generate including superoxide and hydrogen peroxide from electron transport system of mitochondria during oocyte maturation in pigs. To regulate the ROS production, the cumulus cells is secreted the various antioxidant enzymes during IVM of porcine oocyte. Our previous study showed that Mito-TEMPO, superoxide specific scavenger, improves the embryonic developmental competence and blastocyst formation rate by regulating of mitochondria functions in pigs. However, the effects of Mito-TEMPO as a superoxide scavenger to help the anti-oxidant functions from cumulus cells of COCs on meiotic maturation during porcine oocyte IVM has not been reported. Here, we categorized experimental groups into two groups (Grade 1: G1; high cumulus cells and Grade 2: G2; low cumulus cells) by using hemocytometer. The meiotic maturation rate from G2 was significantly (p < 0.05) decreased (G1: $79.9{\pm}3.8%$ vs G2: $57.5{\pm}4.6%$) compared to G1. To investigate the production of mitochondria derived superoxide, we used the mitochondrial superoxide dye, Mito-SOX. Red fluorescence of Mito-SOX detected superoxide was significantly (p < 0.05) increased in COCs of G2 compared with G1. And, we examined expression levels of genes associated with mitochondrial antioxidant such as SOD1, SOD2 and PRDX3 using a RT-PCR in porcine COCs at 44 h of IVM. The mRNA levels of three antioxidant enzymes expression in COCs from G2 were significantly (p < 0.05) lower than COCs of G1. In addition, we investigated the anti-oxidative effects of Mito-TEMPO on meiotic maturation of porcine oocyte from G1 and G2. Meiotic maturation and mRNA levels of antioxidant enzymes were significantly (p < 0.05) recovered in G2 by Mito-TEMPO ($0.1{\mu}M$, MT) treatment (G2: $68.4{\pm}3.2%$ vs G2 + MT: $73.9{\pm}1.4%$). Therefore, our results suggest that reduction of mitochondria derived superoxide by Mito-TEMPO may improves the meiotic maturation in IVM of porcine oocyte.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
/
v.44
no.3
/
pp.331-337
/
2015
Citrus and its peels, which are by-products from juice and/or jam processing, have long been used in Asian folk medicine. Citrus peels show an abundant variety of flavanones, and these flavanones have glycone and aglycone forms. Aglycones are more potent than glycones with a variety of physiological functions since aglycone absorption is more efficient than glycones. Bioconversion with cytolase converted narirutin and naringin into naringenin and hesperidin into hesperetin. Therefore, this study aimed to investigate the anti-oxidant and anti-inflammatory effects of bioconversion of Citrus unshiu (CU) peel extracts with cytolase (CU-C) in RAW264.7 cells. HPLC chromatograms showed that CU and CU-C had 23.42% and 29.39% total flavonoids, respectively. There was substantial bioconversion of narirutin to naringenin and of hesperidin to hesperetin. All citrus peel extracts showed DPPH scavenging activities in a dose-dependent manner, and CU-C was more potent than intact CU. RAW264.7 cells were pre-treated with $0{\sim}500{\mu}g/mL$ of citrus peel extracts for 4 h and then stimulated by $1{\mu}g/mL$ of lipopolysaccharide (LPS) for 8 h. All citrus peel extracts showed decreased mRNA levels and protein expression of LPS-induced inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in a dose-dependent manner. Especially, CU-C markedly inhibited mRNA and protein expression of iNOS and COX-2 compared to intact citrus peel extracts. All citrus peel extracts showed decreased NO production by iNOS activity. This result suggests that bioconversion of citrus peel extracts with cytolase may provide potent functional food materials for prevention of chronic diseases attributable to oxidation and inflammation by boosting the anti-inflammatory effects of citrus peels.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.