Objective: Heat shock protein 70-2 (Hsp70-2) gene knockout mice are found to have premeiotic arrest at the primary spermatocyte stage with a complete absence of spermatids and spermatozoa. This observation led to the hypothesis that hspA2 may be disrupted in human testes with abnormal spermatogenesis. To test this hypothesis, we studied the mRNA expression of hspA2 in infertile men with azoospermia. Design: The mRNA expression were analyzed by competitive RT-PCR among testes with normal spermatogenesis, pachytene spermatocyte arrest, and sertoli-cell only syndrome. Materials and methods: Testicular biopsy was performed in men with azoospermia (n=15). Specimens were subdivided into three groups: (group 1) normal spermatogenesis (n=5), (group 2) spermatocyte arrest (n=5), (group 3) Sertoli-cell only syndrome (n=5). Total RNA was extracted by Trizol reagent. Total extracted RNA was reverse transcribed into cDNA and amplified by PCR using specific primers for hspA2 target cDNAs. A competitive cDNA fragment was constructed by deleting a defined fragment from the target cDNA sequence, and then coamplified with the target cDNA for competitive PCR. Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) gene was used as an internal control. Results: On Competitive RT-PCR analyses for hspA2 mRNA, significant amount of hspA2 expression was observed in group 1, whereas a constitutively low level of hspA2 was expressed in groups 2 and 3. Conclusion(s): The study demonstrates that the hspA2 gene expression is down-regulated in human testes with abnormal spermatogenesis, which in turn suggests that hspA2 gene may play a specific role during meiosis in human testes.
Olive flounder was treated with oxytetracycline (OTC) and changes in blood physiology, antioxidant enzymes and heat shock protein (HSP) were recorded to obtain preliminary data for optimal OTC treatment. Blood parameters were measured 1 and 3 h after the OTC treatments at the concentration of 0 (control), 100, 300 and 500 ppm for I h. Hematocrit decreased with time, however the difference was not significant (P>0.05). Reduced number of red blood cell was observed with increasing OTC concentration. Serum glucose level increased as the OTC concentration increased. However, glucose level was similar to control after 3 h. Blood total protein decreased immediately after the OTC treatment but increased after 1 and 3 h. However, the increment in blood total protein was low. Activities of superoxide dismutase enzymes in 300 and 500 ppm groups increased by the OTC concentration. Catalase enzyme activity was negatively affected by the OTC concentration. However, the differences were not significant (P>0.05). High expression of HSP-70 protein was recorded for groups treated with 100 and 500 ppm compared to that of the control group. However HSP-70 mRNA showed a lower increment which was not significant (P>0.05).
Objectives: Investigation of the antidepressant effects of Citri Reticulatae Viride Pericarpium(CR) Methods: In order to investigate the antidepressant effects of Citri Reticulatae Viride Pericarpium(CR), we performed the forced swimming test. Also the expression of CRF, HSP70 and c-fos was measured with immunohistochemical method at PVN. Results: 1. The duration of immobility in the forced swimming test was significantly decreased in the CR 100mg/kg, 400mg/kg groups. 2. In the Control group, CRF expression was significantly increased in the PVN. Also, these CRF increase were significantly reduced in the CR 100mg/kg and 400mg/kg treated group. 3. HSP70 expression was significantly decreased at PVN in the CR 100mg/kg and 400mg/kg treated group. 4. C-fos expression was significantly decreased at PVN in the CR 100mg/kg and 400mg/kg treated group. Conclusions: According to the results, it can be considered that Citri Reticulatae Viride Pericarpium has antidepressant effect.
This study was conducted to investigate the change of antioxidant enzyme activity (catalase and superoxide dismutase) and variation of blood physiology in olive flounder (Paralyticus olivaceus) by hydrogen peroxide (H2O2) treatment. Blood parameters were measured 1, 3 and 5 hours after H2O2 treatment with 0 (control), 100, 300 and 500 ppm for 1 hr. The value of hematocrit was decreased significantly dependently on treatment concentrate and elapsed time in the treatment of H2O2. Hemoglobin concentration in the test groups were lower than that of the control group. Red blood cell value in the test groups were significantly lower compared to that of the control group, but recovered to the level of the control group after 5 hr. Protein concentration was significantly lower compared to that of the control group at 0 and 1 hr, but recovered after 3 hr in 500 ppm treatment group. The superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) enzyme activities were observed to be increased. Heat-shock protein 70 (HSP70) was significantly increased compared to that of control group in all of the test groups. HSP70 mRNA groups was highly expressed in 500 ppm treatment.
Cadmium (Cd), a heavy metal found in the aquatic environment, accumulates in organisms through the food chain. In the study, we investigated the survival rates, measurement of body Cd levels, and expression analysis of the stress response genes (Heat shock protein 70: HSP70 and Heat shock protein 60: HSP60) and antioxidant enzyme Glutathione S-Transferases (GST) on benthic oligochaete worm Tubifex tubifex exposed three concentrations of Cd, to analyze the bioaccumulation and changes of stress gene expressions to exposure toxicity of the Cd-spiked sediment. Survival rates of T. tubifex exposed to the Cdspiked sediment were 93% at 0.4 mg kg-1 Cd, 96% at 1.87 mg kg-1 Cd, and 93% at 6.09 mg kg-1 Cd for 10 days. Cd concentration in the body of T. tubifex was higher than that in the sediment. After Cd exposures for 10 days, the body Cd levels were 18.4 mg kg-1, 13.06 mg kg-1, and 79.11 mg kg-1 at exposed three concentrations of Cd, respectively. Upregulation of HSP70 gene expression was observed at all concentrations of exposed Cd as a time-dependent manner, whereas transcriptional expression of the HSP60 gene increased as a timedependent manner in T. tubifex exposed to the relative high concentration (6.09 mg kg-1) of Cd. However, GST gene expression increased on day 1 at all concentrations after Cd exposures, and then downregulated until 10 days. These results indicate to ecotoxicological and molecular effects in benthic oligochaete worm T. tubifex to Cd-spiked sediment and provide the basic information for the utilization of environmental toxicity assessment using the T. tubifex as a aquatic pollution indicator species.
Sohn, Sea Hwan;Cho, Eun Jung;Park, Dhan Bee;Jang, In Surk;Moon, Yang Soo
Korean Journal of Poultry Science
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v.41
no.2
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pp.115-125
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2014
With Single Comb White Leghorn (WL) and Korean Native Chicken (KNC) breeds, we compared the stress response with chicken breeds that were subjected to a high stocking density. Stress response was analyzed by the quantity of telomeric DNA, the rate of DNA damage and the expression levels of heat shock proteins (HSPs) and hydroxyl-3-methyl-glutaryl coenzyme A reductase (HMGCR) genes on tissues and blood. The telomere length and telomere shortening rates were analyzed by quantitative fluorescence in situ hybridization on the nuclei of lymphocytes and tissues. The DNA damage rate of lymphocytes was quantified by the comet assay. The expression levels of HSP70, HSP90-${\alpha}$, HSP90-${\beta}$ and HMGCR genes were measured by quantitative real-time polymerase chain reaction in lymphocytes. There was no significant difference between KNC and WL in body weight, weight gain, telomere shortening rate and DNA damage rate. However, the growth rate significantly decreased in chickens raised under high stocking density conditions, as compared to the control group. The telomere-shortening rate, DNA damage and HSPs expression of the lymphocytes were significantly higher in the high stocking density group than the control. The stress condition and breeds had a significant effect on the expressions of HSP70, HSP90-${\alpha}$ and HSP90-${\beta}$ in lymphocytes, except HMGCR. The stress response of WL was higher than that of KNC, as analyzed to the expression of HSP70 and HSP90-${\alpha}$. Therefore, we concluded that the chickens which were exposed to a high stocking density had increased the individual physiological stress response regardless of breeds, and White Leghorns are more susceptible to stress condition than Korean Native Chickens.
Non-small cell lung cancer (NSCLC) is the most common type of lung cancer representing 85% of lung cancer patients. Despite several EGFR-targeted drugs have been developed in the treatment of NSCLC, the clinical efficacy of these EGFR-targeted therapies is being challenged by the occurrence of drug resistance. In this regard, Hsp90 represents great promise as a therapeutic target of cancerous diseases due to its role in modulating and stabilizing numerous oncogenic proteins. Accordingly, inhibition of single Hsp90 protein simultaneously disables multiple signaling networks so as to overcome drug resistance in cancer. In this study, we synthesized a series of 11 butein analogues and evaluated their biological activities against gefitinibresistant NSCLC cells (H1975). Our study indicated that analogue 1h inhibited the proliferation of H1975 cells, down-regulated the expression of Hsp90 client proteins, including EGFR, Met, Her2, Akt and Cdk4, and upregulated the expression of Hsp70. The result suggested that compound 1h disrupted Hsp90 chaperoning function and could serve a potential lead compound to overcome the drug resistance in cancer chemotherapy.
Mutations in the APP gene lead to enhanced cleavage by ${\beta}-$ and ${\gamma}-secretase$, and increased $A{\beta}$ formation, which are closely associated with Alzheimer's disease (AD)-like neuropathological changes. Recent studies have shown that exercise training can ameliorate pathogenic phenotypes ($A{\beta}-42$, BDNF, GLUT-1 and HSP70) in experimental models of Alzheimer's disease. Here, we have used NSE/APPsw transgenic mice to investigate directly whether exercise training ameliorates pathogenic phenotypes within Alzheimer's brains. Sixteen weeks of exercise training resulted in a reduction of $A{\beta}-42$ peptides and also facilitated improvement of cognitive function. Furthermore, GLUT -1 and BDNF proteins produced by exercise training may protect brain neurons by inducing the concomitant expression of genes that encode proteins (HSP-70) which suppress stress induced neuron cell damages from APPsw transgenic mice. Thus, the improved cognitive function by exercise training may be mechanistically linked to a reduction of $A{\beta}-42$ peptides, possibly via activation of BDNF, GLUT-1, and HSP-70 proteins. On the basis of the evidences presented in this study, exercise training may represent a practical therapeutic management strategy for human subjects suffering from Alzheimer's disease.
Jo, Ku-Sung;Sim, Dae-Won;Kim, Eun-Hee;Kang, Dong-Hoon;Ma, Yu-Bin;Kim, Ji-Hun;Won, Hyung-Sik
Journal of the Korean Magnetic Resonance Society
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v.22
no.3
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pp.64-70
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2018
Human Tid1, belonging to the family of the Hsp40/DnaJ, functions as a co-chaperone of cytosolic and mitochondrial Hsp70 proteins. In addition, the conserved J-domain and G/F-rich region of Tid1 has been suggested to interact with the p53 tumor suppressor protein, to translocate it to the mitochondria. Here, backbone NMR assignments were achieved for the putative p53-binding domain of Tid1. The obtained chemical shift information identified five ${\alpha}$-helices including four helices characteristic of J-domain, which are connected to a short ${\alpha}$-helix in the G/F-rich region via a flexible loop region. We expect that this structural information would contribute to our progressing studies to elucidate atomic structure and molecular interaction of the domain with p53.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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