Infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) is s significant viral pathogen affecting cultured rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) in Korea. In this study, five monoclonal antibodies (mAbs) (IHNV-1, 2, 3, 4, and 5) were produced using purified IHNV. Reactivities of these mAbs were analyzed by western blot (WB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and indirect fluorescent antibody test (IFAT). These mAbs recognized glycoprotein (69 kDa, IHNV-1), nucleocapsid protein (39 kDa, IHNV-3, 4, and 5), or phosphoprotein (27 kDa, IHNV-2) of IHNV by WB analysis. ELISA results indicated that these five mAbs were specific to IHNV without showing any cross-reactivity against other fish viruses (hirame rhabdovirus, infectious pancreatic necrosis virus, and viral hemorrhagic septicemia virus). IFAT demonstrated specific fluorescence signals of IHNV-infected epithelioma papulosum cyprini (EPC) cells, whereas no reactivity of normal EPC cells was observed. These mAbs can be very useful for immuno-diagnosis of IHNV infection.
뇌 유구낭미충증 진단에는 영상진단을 가장 널리 이용하고 있으나 낭미충증의 영상진단은 감염충체수, 감염경과 기간, 감염위치 및 포도낭미충 존재여부 등에 따라 소견이 매우 다양하므로 감별진단에 도움이 되는 혈청학적 진단이 요구된다. 이때에 이용하는 혈청학적 진단 방법은 특이항체를 혈청이나 뇌척수액에서 증명하는 것이나 몇 가지 경우에 위음성 반응을 나타내어 민감도가 낮은 결점이 있다. 민감도가 낮은 경우를 해결하는 방법으로시, 또 기생충에서 유래하는 특이항원을 측정함으로써 항체측정 때 나타나는 교차반응을 최소화하고, 충체검 출에 준하는 진단방법으로서 유구낭미충 특이항원을 환자 혈청 및 뇌척수액에서 측정하는 연구를 시도하고 있다. 이 연구에서는 유구낭미층중 환자에서 이중항체-효소면역 측정 법을 실시하여 유구낭미충의 낭액 항원의 구성 단백질을 측정하였다. 항원반응용 항체로는 낭액으로 감작시킨 토끼혈청과, 낭액을 구성하는 단백질중 150 kDa 에만 반응하는 단클론항체를 이용하였다. 이중항체-효소면역측정 법으로는 150 kDa단백질을 8ng/ml까지 측정할 수 있었고, 61ng/m1 이상에서는 농도에 따른 흡광도 차이가 적었다. 이 방법으로 스파르가눔, 간흡충, 폐흡충, 요꼬가와흡충, 간질, 고래회충 제 3기유충 및 선모충 등의 생리식염수 추출액을 검색한 바 모두 음성반응이어서 특이도가 높다고 판단하였다. 뇌 유구낭미충증으로 진단한 환자 255명의 혈청 351개를 측정한 바 측정 가능범위 에 미치지 못하여 모두 음성이었다. 환자 212명에서 얻은 뇌척수액 276개 중 31개 (11.2%)는 양성이었다. 이와 같이 민감도가 낮아 항인측정법은 진단용으로 이용하기 어렵다고 생각하였다. 뇌척수액에서 150kDa단백질이 증 멸된 환자는 프라지관텐 치료 후 2일이 경과한 경우, 그리고 약제치료에도 불구하고 임상결과가 불량하여 결국 외과적으로 충체를 제거한 바 낭벽이 초점 성으로 변성된 포도낭미충에 감염되었던 환자의 뇌척수액에서 불규칙하게, 양적으로는 일정하지 않게 출현하였다. 150kDa 단백질은 뇌 낭종성 병변에서 채취한 낭미충 낭액에서도 측점할 수 있었다. 그리고 150kDa단백질의 농도가 61 ng/ml이상인 뇌척수액이나 외과적으로 얻은 낭액으로 SDS-폴리아크릴아미드 전기영동을 실시하여 150kDa 단백질의 subunit인 15, 10, 7kDa를 증명할 수 있었다.
본 연구에서는 활성탄 흡착, 오존 단독, 오존/활성탄 혼합공정을 이용하여 부식산을 처리하고 부식산의 처리효율을 $UV_{254}$와 DOC를 통해 살펴보았으며, 부식산의 분해특성은 분자량 크기분포의 변화와 활성탄 표면변화를 통해 관찰하였다. 각 공정에서의 DOC 제거효율을 살펴본 결과, 활성탄 흡착공정은 약 19%, 오존 단독공정은 38%이었으나, 오존/활성탄 혼합공정에서는 약 80%로 활성탄 흡착공정과 오존 단독공정의 DOC 처리효율을 합한 것보다 훨씬 높아, 혼합공정을 도입함으로써 시너지 효과를 얻을 수 있는 것으로 나타났다. 기리고 $UV_{254}$ 감소율 역시 오존/활성탄 혼합공정에서 가장 크게 나타났다. 오존/활성탄 혼합공정에서 활성탄은 고유의 흡착제 역할뿐만 아니라 흡착된 유기물과 오존의 접촉을 촉진시키는 반응자리를 제공하는 역할을 하는 것으로 사료된다. 각 공정에서의 분자량크기분포 변화를 살펴본 결과, 활성탄 흡착공정에의 분자량 크기분포는 반응 전후에 큰 차이가 없었으며, 오존 단독공정에서는 30 kDa 이상의 분자량이 반응시간 10분 이후에는 거의 감소하지 않고 일정하였으나, 0.5 kDa 이하의 저분자량은 초기 4.8%에서 120분 처리시 12.3%로 증가하였다. 한편 오존/활성탄 혼합공정에서는 120분 처리시 30 kDa 이상 분자량이 초기 36.3%에서 3.9%로 뚜렷하게 감소하였으며, 0.5 kDa 이하의 저분자량은 초기 4.8%에서 40.1%로 크게 증가하였다.
맥주의 숙성기간을 단축시키기 위해 네 종류의 고정화용 담체를 활용한 고정화 효모 반응기를 시험하였다. 전발효가 끝난 Green Beer (GB)를 효모를 제거하고 열처리할 경우 처 리온도가 높을수록 전구체인 $\alpha$-acetolactate의 diacety 1로의 전 환율이 낮고 전환속도도 빨라 $70^{\circ}C$이상의 온도에서는 4분이면 충분하였다 GB 중의 산소농도는 전구체에서 DA로의 변환율에 매우 큰 영향을 끼쳤는데 그 농도가 낮을수록 전환율이 낮았으며 0.1 ppm 이하의 농도에서는 거의 대부분의 전 구체가 DA이외의 물칠로 전환되었다. 열처리한 전발효 맥주 를 HAN, G-2, FLO, GDC 담체 column에 $\alpha$, 체류시간 80-150분으로 통과시킬 경우 diacety I 농도를 상품 맥주의 품질로 적합한 0.1 ppm이하로 떨어뜨릴 수 있어서 시험한 담체 모두 맥주 숙성용 효모고정화용 답체로의 실용화 가능 성이 있었다. 이 때 세라믹 담체 column의 경우 GDC 담체 column에 비해 미발효된 잔당의 발효에 의한 새로운 DA 전 구체의 생성이 많았다. 위와 같은 방법으로 생산한 맥주를 공장에서 기존의 방법으로 생산한 맥주와 맛을 비교한 결과 미세한 차이가 있으나 불쾌한 느낌을 주는 이취등은 발견되지 않아 고정화 효모 반응기에 의한 고속 숙성공정의 현장적 용 가능성이 높음을 확인할 수 있었다.
Dissolved oxygen (DO) and shear stress have pronounced effects on hyaluronic acid (HA) production, yet various views persist about their effects on the molecular weight of HA. Accordingly, this study investigated the effects of DO and shear stress during HA fermentation. The results showed that both cell growth and HA synthesis were suppressed under anaerobic conditions, and the HA molecular mass was only $(1.22{\pm}0.02){\times}10^6 Da$. Under aerobic conditions, although the DO level produced no change in the biomass or HA yield, a high DO level favored the HA molecular mass, which reached a maximum value of $(2.19{\pm}0.05){\times}10^6 Da$ at 50% DO. Furthermore, a high shear stress delayed the rate of HA synthesis and decreased the HA molecular weight, yet had no clear effect on the HA yield. Therefore, a high DO concentration and mild shear environment would appear to be essential to enhance the HA molecular weight.
S. rugosoannulata의 배양액으로부터 4단계를 거쳐 분자량이 54 kDa인 CMCase를 분리 정제하였다. 이 효소는 pH 4.0에서 최대의 활성을 보여주는 acidic CMCase로 $40^{\circ}C$에서 최대활성을 나타냈다. EDTA에 의해 활성이 저해되는 것으로 보아 metalloenzyme으로 추정되며 1,10-phenanthroline과 KCN 및 L-cystein 등의 저해제에 효소활성이 크게 감소하였으며, $AgNO_{3},\;MgSO_{4},\;KCl$등의 금속염에서는 효소활성이 증가되었으나, $ZnSO_{4},\;BaCl_{2},\;CaCl_{2}$ 등에서는 효소활성이 저해되었다.
Efficacy and general pharmacology of recombinant human erythropoietin (rHu-EPO), were investigated. Efficacy studies were conducted in normal, cisplatin- and acute hemorrhage-induced anemic rats. Normal and anemic animals were treated intravenously with rHu-EPO for 5 days and the changes in the numbers of red blood cells (RBC), hemoglobin (Hb), hematocrit (Hct) and reticulocytes (Ret) were examined. In normal rats, rHu-EPO significantly increased RBC, Hb, Hct and Ret at doses of 50∼ 1250 IU/kg/day. Cisplatin-induced anemic rats showed significant increase of RBC, Hb, Hct and Ret in a dose-dependent manner after administration of rHu-EPO (50∼200 lU/kg/day). And in acute hemorrhage-induced anemic rats, rHu-EPO(4∼100 Iu/kg/day) accelerated recovery of anemia with significant increase in Ret. These changes disappeared gradually after cessation of the treatment. The general pharmacological effects of rHu-EPO were investigated in mice, rats, guinea-pigs, rabbits and cats. rHu-EPO had no influences on central nervous, cardiovascular, gastrointestinal and blood coagulation system. It also had no influence on the contraction of phrenic nerve-diaphragm preparation. rHu-EPO produced significant increase of urine volume at a dose of 7000 IU/kg. These results suggest that rHu-EPO might be useful for the therapy of anemia without serious side effect.
The counter-diffusion of two gaseous substances permeating a polymeric membrane has been investigated both experimentally and theoretically. The aim of the study was to find mutual effects, if any, that could influence the permeability and diffusivity data. The experimental data were obtained with an isostatic permeameter operating at ambient pressure and 303 K: helium, nitrogen, carbon dioxide methane were used as permeating gas at different partial pressure; helium or nitrogen as equilibrating or carrier gas. No evident mutual effect of the counter-diffusing gas was observed. The theoretical analysis gave some insight into the phenomena and it was concluded that at near-atmospheric pressures, and in the absence of swelling phenomena no mutual interaction exists. On a theoretical basis any mutual interaction between diffusing and counter-diffusing gases could only occur: i) at high pressures , when the free movement of permeating gas molecules within the polymer is hindered by the counter-diffusing gas; ii) when a large part of the free volume fraction is occupied by the counter--diffusing gas; iii) swelling phenomena modify the structure and free volume fraction of the polymer.
Pellinus linteus has been used for the prevention of cancer traditionally. There are three origins of Pellinus linteus, Korea, China and Cambodia. However, their immunological activities were not evlauated comparatively. Thus, this study was done to evaluate immunomodulatory effects of Phellinus linteus(PL) from Korea, china and cambodia, We confirmed PL showed two major protein bands, 50 kDa and 80 kDa by protein analysis. These PL effectively upregulated the expressions of IL-2 at 10 ug/ml and GM-CSF, IL-4, IL-10, IL-12(p35), IL-12(p40), IL-18, IFN-r in all concentrations. However, Korea-PL upregulated the expression of IL-12 more effectively than the other PLs. It intended to increase NO with no significance. Those results indicate Phellinus linteus had cytokine modulating effect
Using a murine T cell hybridoma, activation-induced cell death (AICD) was studied. As an in vitro model system for the AICD, 1 cell hybridoma expressing TCR/CD3 complex was incubated onto the immobilized purified anti-CD3 antibody. The immobilized anti-CD3 antibody induced AICD effectively up to 40%. At 1-100 $\mu$M range of SNP, an exogenous source of nitric oxide (NO), the cell proliferation was not affected, but at 1 mM SNP, cell proliferation was significantly reduced. The AICD of T cell hybridoma was inhibited by exogenous NO at non-cytotoxic concentration, In the cells undergoing AICD, the expressions of caspase-3 and FasL were detected, but not iNOS. Similar result was recognized in the apoptosis induced by dexamethasone, an apoptosis-inducing agent. However, the conversion from the inactive form of caspase-3 (32 kDa) to the active form (17 kDa) was significantly reduced in the cells in AICD induced by anti-CD3 antibody, With the result of increased PARP cleavage in the cells, we propose that another PARP cleavage pathway not involving caspase-3 may function in the anti-CD3 antibody induced AICD in the T cell hybridoma.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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