Fungal pathogens have huge impact on health and economic wellbeing of human by causing life-threatening mycoses in immune-compromised patients or by destroying crop plants. A key determinant of fungal pathogenesis is their ability to undergo developmental change in response to host or environmental factors. Genetic pathways that regulate such morphological transitions and adaptation are therefore extensively studied during the last few decades. Given that epigenetic as well as genetic components play pivotal roles in development of plants and mammals, contribution of microbial epigenetic counterparts to this morphogenetic process is intriguing yet nearly unappreciated question to date. To bridge this gap in our knowledge, we set out to investigate histone modifications among epigenetic mechanisms that possibly regulate fungal adaptation and processes involved in pathogenesis of a model plant pathogenic fungus, Magnaporthe oryzae. M. oryzae is a causal agent of rice blast disease, which destroys 10 to 30% of the rice crop annually. Since the rice is the staple food for more than half of human population, the disease is a major threat to global food security. In addition to the socioeconomic impact of the disease it causes, the fungus is genetically tractable and can undergo well-defined morphological transitions including asexual spore production and appressorium (a specialized infection structure) formation in vitro, making it a model to study fungal development and pathogenicity. For functional and comparative analysis of histone modifications, a web-based database (dbHiMo) was constructed to archive and analyze histone modifying enzymes from eukaryotic species whose genome sequences are available. Histone modifying enzymes were identified applying a search pipeline built upon profile hidden Markov model (HMM) to proteomes. The database incorporates 22,169 histone-modifying enzymes identified from 342 species including 214 fungal, 33 plants, and 77 metazoan species. The dbHiMo provides users with web-based personalized data browsing and analysis tools, supporting comparative and evolutionary genomics. Based on the database entries, functional analysis of genes encoding histone acetyltransferases and histone demethylases is under way. Here I provide examples of such analyses that show how histone acetylation and methylation is implicated in regulating important aspects of fungal pathogenesis. Current analysis of histone modifying enzymes will be followed by ChIP-Seq and RNA-seq experiments to pinpoint the genes that are controlled by particular histone modifications. We anticipate that our work will provide not only the significant advances in our understanding of epigenetic mechanisms operating in microbial eukaryotes but also basis to expand our perspective on regulation of development in fungal pathogens.
Rashidan, Kianoush Khajeh;Nassoury, Nasha;Tazi, Samia;Giannopoulos, Paresa N.;Guertin, Claude
BMB Reports
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제36권5호
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pp.475-487
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2003
A gene that encodes a homologue to baculoviral p74, an envelope-associated viral structural protein, has been identified and sequenced on the genome of Choristoneura fumiferana granulovirus (ChfuGV). A part of the ChfuGV p74 gene was located on an 8.9 kb BamHI subgenomic fragment using different sets of degenerated primers. These were designed using the results of the protein sequencing of a major 74 kDa structural protein that is associated with the occlusion-derived virus (ODV). The gene has a 1992 nucleotide (nt) open-reading frame (ORF) that encodes a protein with 663 amino acids with a predicted molecular mass of 74,812 Da. Comparative studies revealed the presence of two major conserved regions in the ChfuGV p74 protein. This study also shows that all of the p74 proteins contain two putative transmembrane domains at their C-terminal segments. At the nucleotide sequence level, two late promoter motifs (TAAG and GTAAG) were located upstream of the first ATG of the p74 gene. The gene contained a canonical poly(A) signal, AATAAA, at its 3' non-translated region. A phylogenetic tree for baculoviral p74 was constructed using a maximum parsimony analysis. The phylogenetic estimation demonstrated that ChfuGV p74 is related the closest to those of Cydia pomonella granulovirus (CpGV) and Phthorimaea operculella granulovirus (PhopGV).
Little evidence supports the existence of imprinted genes in chicken. Imprinted genes are thought to be intimately connected with the acquisition of parental resources in mammals; thus, the predicted lack of this type of gene in chicken is not surprising, given that they leave their offspring to their own heritance after conception. In this study, we identified several imprinted genes and their orthologs in human, mouse, and zebrafish, including 30 previously identified human and mouse imprinted genes. Next, using the HomoloGene database, we identified six orthologous genes in human, mouse, and chicken; however, no orthologs were identified for SLC22A18, and mouse Ppp1r9a was not included in the HomoloGene database. Thus, from our analysis, four candidate chicken imprinted genes (IGF2, UBE3A, PHLDA2, and GRB10) were identified. To expand our analysis, zebrafish was included, but no probe ID for UBE3A exists in this species. Thus, ultimately, three candidate imprinted genes (IGF2, PHLDA2, and GRB10) in chicken were identified. GRB10 was not significant in chicken and zebrafish based on the Wilcoxon-Mann-Whitney test, whereas a weak correlation between PHLDA2 in chicken and human was identified from the Spearman's rank correlation coefficient. Significant associations between human, mouse, chicken, and zebrafish were found for IGF2 and GRB10 using the Friedman's test. Based on our results, IGF2, PHLDA2, and GRB10 are candidate imprinted genes in chicken. Importantly, the strongest candidate was PHLDA2.
국내에서 육성된 옥수수 90 품종 및 자식 계통에 대하여 microsatellite 마커를 활용하여 DNA 프로파일 데이터베이스를 구축한 다음 공시품종에 따른 유전적 유사도 분석 및 품종식별력 검정에 대한 연구를 수행하였다. 옥수수 90품종을 100개의 microsatellite 마커로 검정하고 대립유전자의 패턴이 우수하고 다형성 정도가 높은 13개를 선정하여 분석하였을 때 대립유전자의 수는 5 ~ 24개까지 다양하게 분포하였고 평균 대립유전자의 수는 13.69개로 높았다. PIC 값의 경우도 0.716 ~ 0.942 범위에 속하였고 평균값은 0.865로 아주 높았다. 옥수수 90품종 및 계통에 대하여 UPGMA 분석에 의한 계통도를 작성하였을 때, 옥수수의 품종 유형 및 품종 육성 계보에 따라 5개의 대그룹으로 나누어졌다. 본 연구에서 구축됨 옥수수 자식계통 및 품종별 microsatellite DNA 프로파일 데이터베이스는 신품종과 기 육성된 품종과 유전적 유사도 분석이 가능하기 때문에 품종보호출원시 대조품종 선정 및 품종진위성과 관련된 종자분쟁에 매우 유용하게 활용될 수 있을 것이다.
Host resistance is usually parasite-specific and is restricted to a particular pathogen races, and commonly is expressed against specific pathogen genotypes. In contrast, resistance shown by an entire plant species to a species of pathogen is known as non-host resistance. Therefore, non-host resistance is the more common and broad form of disease resistance exhibited by plants. As a first step to understand the mechanism of non-host plant defense, expressed sequence tags (EST) were generated from a hot pepper leaf cDNA library constructed from combined leaves collected at different time points after inoculation with non-host soybean pustule pathogen (Xanthomonas axonopodis pv. Glycines; Xag). To increase gene diversity, ESTs were also generated from cDNA libraries constructed from anthers and flower buds. Among a total of 10,061 ESTs, 8,525 were of sufficient quality to analyze further. Clustering analysis revealed that 55 % of all ESTs (4685) occurred only once. BLASTX analysis revealed that 74% of the ESTs had significant sequence similarity to known proteins present in the NCBI nr database. In addition, 1,265 ESTs were tentatively identified as being full-length cDNAs. Functional classification of the ESTs derived from pathogen-infected pepper leaves revealed that about 25% were disease- or defense-related genes. Furthermore, 323 (7%) ESTs were tentatively identified as being unique to hot pepper. This study represents the first analysis of sequence data from the hot pepper plant species. Although we focused on genes related to the plant defense response, our data will be useful for future comparative studies.
Jiansheng Wei;Liangyan Liu;Xiaolong Yuan;Dong Wang;Xinyue Wang;Wei Bi;Yan Yang;Yi Wang
Mycobiology
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제51권5호
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pp.360-371
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2023
Hispidin is an important styrylpyrone produced by Sanghuangporus sanghuang. To analyze hispidin biosynthesis in S. sanghuang, the transcriptomes of hispidin-producing and non-producing S. sanghuang were determined by Illumina sequencing. Five PKSs were identified using genome annotation. Comparative analysis with the reference transcriptome showed that two PKSs (ShPKS3 and ShPKS4) had low expression levels in four types of media. The gene expression pattern of only ShPKS1 was consistent with the yield variation of hispidin. The combined analyses of gene expression with qPCR and hispidin detection by liquid chromatography-mass spectrometry coupled with ion-trap and time-of-flight technologies (LCMS-IT-TOF) showed that ShPKS1 was involved in hispidin biosynthesis in S. sanghuang. ShPKS1 is a partially reducing PKS gene with extra AMP and ACP domains before the KS domain. The domain architecture of ShPKS1 was AMP-ACP-KS-AT-DH-KR-ACP-ACP. Phylogenetic analysis shows that ShPKS1 and other PKS genes from Hymenochaetaceae form a unique monophyletic clade closely related to the clade containing Agaricales hispidin synthase. Taken together, our data indicate that ShPKS1 is a novel PKS of S. sanghuang involved in hispidin biosynthesis.
Eclipta prostrata and E. alba are annual herbal medicinal plants and have been used as Chinese medicinal tonics. Both species are widely distributed in tropical and subtropical regions as well as in Korea. Both species have similar morphological features but E. alba has smoother leaf blade margins compared with E. prostrata. Although both species are utilized as oriental medicines, E. prostrata is more widely used than E. alba. Morphological semblances have confounded identification of either species. Here, we report the complete chloroplast genomes of both species to provide an authentication system between the two species and understand their diversity. Both chloroplast genomes were 151,733-151,757 bp long and composed of a large single copy (83,285-83,300 bp), a small single copy (18,283-18,346 bp), and a pair of inverted repeats (25,075-25,063 bp). Gene annotation revealed 80 protein coding genes, 30 tRNA genes and four rRNA genes. A phylogenetic analysis revealed that the genus Eclipta is grouped with Heliantheae tribe species in the Asteraceae family. A comparative analysis verified 29 InDels and 58 SNPs between chloroplast genomes of E. prostrata and E. alba. The low chloroplast genome sequence diversity indicates that both species are really close to each other and are not completely diverged yet. We developed six DNA markers that distinguish E. prostrata and E. alba based on the polymorphisms of chloroplast genomes between E. prostrata and E. alba. The chloroplast genome sequences and the molecular markers generated in this study will be useful for further research of Eclipta species and accurate classification of medicinal herbs.
Background: Dried tuberous roots of Cynanchum wilfordii are known to relieve menopause symptoms. However, the dried roots of C. wilfordii are morphologically similar to those of C. auriculatum, which makes it difficult to distinguish when used as a medicine. Various comparative studies have focused on chemical or molecular analysis of these roots. However, the differences between the two species at the cytogenetic level based on chromosome structure and composition remain to be elucidated. Methods and Results: For chromosome slides, the roots were fixed in 8-hydroxyquinoline, digested with enzyme mixture, and spread on slides. 5S and 45S rDNA were used as cytogenetic markers for the analysis of nuclear genomes by FISH. The chromosome number of the two species was 2n = 22, with a relatively short length, 1.13 ㎛ - 4.24 ㎛ and 1.00 ㎛ - 3.42 ㎛ with respect to each other. Both species represent one pair of 5S and 45S rDNA signal on chromosome 1, at the proximal region and peri-centromeric region, respectively. Conclusions: These preliminary cytogenetic data using FISH in C. wilfordii and C. auriculatum could be valuable for the comprehension of Cynanchum genome history.
Oriental melon (Cucumis melo L. var. makuwa) is one of six subspecies of melon and is cultivated widely in East Asia, including China, Japan, and Korea. Although oriental melon is economically valuable in Asia and is genetically distinct from other subspecies, few reports of genome-scale research on oriental melon have been published. We generated 30.5 and 36.8 Gb of raw RNA sequence data from the female and male flowers, leaves, roots, and fruit of two oriental melon varieties, Korean landrace (KM) and Breeding line of NongWoo Bio Co. (NW), respectively. From the raw reads, 64,998 transcripts from KM and 100,234 transcripts from NW were de novo assembled. The assembled transcripts were used to identify molecular markers (e.g., single-nucleotide polymorphisms and simple sequence repeats), detect tissue-specific expressed genes, and construct a genetic linkage map. In total, 234 single-nucleotide polymorphisms and 25 simple sequence repeats were screened from 7,871 and 8,052 candidates, respectively, between the KM and NW varieties and used for construction of a genetic map with 94 F2 population specimens. The genetic linkage map consisted of 12 linkage groups, and 248 markers were assigned. These transcriptome and molecular marker data provide information useful for molecular breeding of oriental melon and further comparative studies of the Cucurbitaceae family.
Lactobacillus plantarum is a lactic acid bacterium that promotes animal intestinal health as a probiotic and is found in a wide variety of habitats. Here, we investigated the genomic features of different clusters of L. plantarum strains via pan-genomic analysis. We compared the genomes of 108 L. plantarum strains that were available from the NCBI GenBank database. These genomes were 2.9-3.7 Mbp in size and 44-45% in G+C content. A total of 8,847 orthologs were collected, and 1,709 genes were identified to be shared as core genes by all the strains analyzed. On the basis of SNPs from the core genes, 108 strains were clustered into five major groups (G1-G5) that are different from previous reports and are not clearly associated with habitats. Analysis of group-specific enriched or depleted genes revealed that G1 and G2 were rich in genes for carbohydrate utilization (${\text\tiny{L}}-arabinose$, ${\text\tiny{L}}-rhamnose$, and fructooligosaccharides) and that G3, G4, and G5 possessed more genes for the restriction-modification system and MazEF toxin-antitoxin. These results indicate that there are critical differences in gene content and survival strategies among genetically clustered L. plantarum strains, regardless of habitats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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