토양세균 B.subtilis subsp. krictiensis로부터 항진균활성물질 KRF-001 복합체를 생산하기 위한 발효 조건을 조사하였다. Whey와 mannitol 등이 탄소원으로, CSL, corn gluten meal 그리고 polypeptone이 복합질소원으로 좋았다. 중온균인 생산균은 중성 pH조건에서 P.oryzae에 대한 bioactivity가 가장 높았으며, 0-10 DO의 낮은 용존산소 조건에서도 bioactivity가 유지되었다. 인산염의 농도가$ K_2HPO_4$, 0.047에서 0.097로 높아짐에 따라 1/2의 bioactivity 감소가 관찰되었다. 한편 UV 및 MNNG에 의한 돌연변이에 의해 우수균주 3개를 선별하였다.
Kim, Jung-Hyung;Roh, Chang-Hyun;Lee, Chang-Won;Kyung, Do-Hyun;Choi, Soo-Keun;Jung, Heung-Chae;Pan, Jae-Gu;Kim, Byung-Gee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권4호
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pp.677-680
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2007
To analyze a cotG-based Bacillus subtilis spore display system directly, $GFP_{UV}$ was expressed on the surface of Bacillus subtilis spores. When $GFP_{UV}$ was fused to the C-terminal of the cotG structural gene and expressed, the existence of a $CotG-GFP_{UV}$ fusion protein on the B. subtilis spore was confirmed by flow cytometry confocal microscopic analysis. When the cotG anchoring motif was deleted, no fluorescence emission was observed under flow cytometry and confocal microscopic analysis from the purified spore, confirming the essential role of CotG as an anchoring motif. This $GFP_{UV}$ displaying spore might be used for another signaling application triggered by intracellular or extracellular stimuli.
인삼 근부병의 생물학적 방제를 위해 인삼 재배토양으로부터 분리된 길항미생물 Bacillu subtilis B-4228을 사용하여 방제효과를 검정하였다. 공시 균주 B-4228과 C. destructans의 대치배양결과, C destructans의 균사가 비정상적인 형태로 팽창하였으며 강한 생장억제력을 보였다. C. destructans에 의해 오염된 이병토를 이용한 pot시험결과, 건전근율이 무처리구에서 20%였으나 공시 균주 B-4228의 처리구는 82%로 높게 나타났고, 이병율(개체 인삼에 대한 뿌리썩음 이병정도의 총합비율)은 무처리의 경우 50.4%였으나 공시 균주 B-4228의 처리구는 6.0%로 낮았다.
Light fermentation has been conducted under different light conditions such as normal dark light, white light, and light emitting diodes (LEDs) various color (blue, green, red, white on blueberry powder with fermenting bacteria Bacillus subtilis (B2). The bacteria B2 was isolated and identified by 16S rRNA sequencing method. RYRP biologically converted to secondary metabolites through light fermentation in the presence of Bacillus subtilis, the bacteria actively involved in bioconversion process. LEDs fermentation to enhance the production of phenolic content while comparing to normal dark and white light. Among the different color LEDs, blue LEDs mediated fermentation showed higher amount of total phenolic and flavonoid content. Then blue LEDs mediated fermented compound were characterized by FTIR and GC-MS, subsequently the compound was analyzed antioxidant activity tests and the antioxidant activity exhibited higher. This is the first study to demonstrate that B. subtilis-LEDs mediated fermentation is useful for facilitating phenolic compound production and enhancing antioxidant activity, which may have greater application fermentation fields.
Stachowiak, R.;Granicka, L.H.;Wisniewski, J.;Lyzniak, M.;Kawiak, J.;Bielecki, J.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제21권11호
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pp.1193-1198
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2011
Encapsulation of biological material in the permiselective membrane allows to construct a system separating cells from their products, which may find biotechnological as well as biomedical applications in biological processes regulation. Application of a permiselective membrane allows avoiding an attack of the implanted microorganisms on the host. Our aim was to evaluate the performance of Bacillus subtilis encapsulated in an elaborate membrane system producing listeriolysin O, a cytolysin from Listeria monocytogenes, with chosen eukaryotic cells for future application in anticancer treatment. The system of encapsulating in membrane live Bacillus subtilis BR1-S secreting listeriolysin O was proven to exert the effective cytotoxic activity on eukaryotic cells. Interestingly, listeriolysin O showed selective cytotoxic activity on eukaryotic cells: more human leukemia Jurkat T cells were killed than human chronic lymphocytic B cells leukemia at similar conditions in vitro. This system of encapsulated B. subtilis, continuously releasing bacterial products, may affect selectively different types of cells and may have future application in local anticancer treatment.
Abdelmoteleb, Ali;Troncoso-Rojas, Rosalba;Gonzalez-Soto, Tania;Gonzalez-Mendoza, Daniel
Mycobiology
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제45권4호
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pp.385-391
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2017
The ability of Bacillus subtilis, strain ALICA to produce three mycolytic enzymes (chitinase, ${\beta}$-1,3-glucanase, and protease), was carried out by the chemical standard methods. Bacillus subtilis ALICA was screened based on their antifungal activity in dual plate assay and cell-free culture filtrate (25%) against five different phytopathogenic fungi Alternaria alternata, Macrophomina sp., Colletotrichum gloeosporioides, Botrytis cinerea, and Sclerotium rolfesii. The B. subtilis ALICA detected positive for chitinase, ${\beta}$-1,3-glucanase and protease enzymes. Fungal growth inhibition by both strain ALICA and its cell-free culture filtrate ranged from 51.36% to 86.3% and 38.43% to 68.6%, respectively. Moreover, hyphal morphological changes like damage, broken, swelling, distortions abnormal morphology were observed. Genes expression of protease, ${\beta}$-1,3-glucanase, and lipopeptides (subtilosin and subtilisin) were confirmed their presence in the supernatant of strain ALICA. Our findings indicated that strain ALICA provided a broad spectrum of antifungal activities against various phytopathogenic fungi and may be a potential effective alternative to chemical fungicides.
흑두청국으로부터 분리된 혈전용해력이 우수한 Bacillus subtilis BB-1(KFCC 11344P)으로부터 혈전용해효소 유전자를 PCR법에 의해 크로닝하였고 이를 BCF-1으로 명명하였다. BCF-1의 DNA 염기서열결정 결과 1,145 bp 크기의 혈전용해 효소로, 일본의 natto로부터 분리된 nattokinase 유전자와 99%의 상동성을 보임을 확인하였다. 혈전용해효소 유전자의 발현을 위하여 Bacillus 발현계인 Bacillus-E. coli의 shuttle vector인 pEB vector에 크로닝 하고 host로서 B. subtilis 168에 형질전환시켜 대량 발현시켰다. 생산된 혈전용해효소의 최 적활성 pH와 온도는 7.0과 $35^{\circ}C$로 확인되었다, 기질에 대한 분해양상을 조사한 결과 fibrin에서만 특이적으로 강한 분해가 일어났으며, skim milk에서 아주 약한 분해능을 보였으나 blood agar, gelatin, casein에서는 전혀 분해능을 보이지 않았다. 특히 blood agar plate에서 분해능이 없는 것으로 보아 혈액 내에서의 적혈구 파괴현상과 같은 부작용에 대한 위험을 배제할 수 있을 것으로 사료된다. BCF-1에 의해 생산된 혈전용해효소는 fibrin 특이적으로 활성을 나타냄을 확인할 수 있으며, 이는 임상적이나 산업적으로 적용하였을 때 부작용에 대한 위험적인 문제는 배제될 수 있으리라 생각된다.
본 연구는 E. tarda에 대한 특이박테리오phage와 생균제의 일종인 B. subtilis KM-1의 혼합제가 E. tarda에 대한 항균활성에 미치는 효과를 알아보고자 수행되었다. 가장 효과적인 혼합제의 항균활성을 보인 phage의 적정 수는 B. subtilis 가 $2{\times}10^5$ CFU/ml의 농도로 존재할 때 배양 36시간째 $2{\times}10^5$ PFU/ml로 나타났다. B. subtilis의 경우 $2{\times}10^5$ PFU/ml의 phage가 존재할 때 첨가량에 비례하는 항균활성을 보여주었다. phage와 B. subtilis의 혼합투여는 phage나 B. subtilis 각각을 투여한 그룹보다 훨씬 높은 항균활성을 나타냈다. 본 연구의 결과는 수산양식에서 대두되고 있는 양식어류의 E. tarda 감염성 질병 치료를 위한 항생제 대체제로서의 사료첨가제 개발 가능성을 제시하고 있다.
고추 탄저병균 Colletotrichum gloeosporioides의 생장을 저해하는 물질을 생산하는 세균인 Bacillus subtilis의 각종 배양조건을 달리하여 최적 생산 조건을 조사하였다. 병원균 생장 저해물질 생산을 위한 배지의 초기 산도는 pH 7.0이 최적이였으며, 탄소원으로는 glucose를 첨가했을 경우 다른 탄소원에 비해 2배 이상 높은 활성을 보였다. 질소원으로는 유기 질소원일 경우 비교적 높은 병원균 생장저해활성을 보였으나, 무기 질소원인 ammonium sulfate에서 가장 높은 활성을 보였다. 여러 가지 배지를 사용하여 조사한 결과, LB(Luria Bertani) 배지의 배양액에서 가장 높은 활성이 나타났다.
The xylA gene of Bacillus stearothermophilus encoding the major ${\beta}$-xylosidase was previously cloned and sequenced. In the present study we examined the regulation of the cloned xylA gene expression in Bauillus subtilis MW15 carrying the xylA::aprA fusion plasmids. The induction of the fused xylA gene expression remained uninfluenced by any of the carbon sources tested but the gene expression was repressed about 2-3 fold in the presence of glucose. Two CRE-like sequences (CRE-1: nucleotides + 124 to +136 and CRE-2: +247 to +259) were recognized within the reading frame region of the xylA gene. The deletion experiments showed that the CRE-2 sequence had a role in catabolite repression (CR) as a true CRE of the xylA gene, but the CRE-1 had no effect on CR of the xylA gene expression. Surprisingly, the deletion of the CRE- 1 sequence reduced about 2~3 fold of the expression of the xylA fused gene. The repression ratios of the xylA gene expression were estimated to be about 0.4 from the assay of subtilisin activity, and about 0.3 at the level of transcription by determining the amounts of xylA transcripts in B. subtilis. While, the level of CR of the xylA gene was assessed to be about l0-fold in previous work when the relative amounts of the xylA transcripts were measured in B. stearothermophilus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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