The incidence of mutation in three loci of GDF9, BMP15 and BMP15-1B and their effects on litter sizes was evaluated in Baluchi sheep. Wild-type alleles were detected for BMP15 and BMP15-1B loci and all individuals were found to be as non-carriers for FecB and $FecX^G$ mutations but, a G to A nucleotide substitution was found in GDF9 locus. The frequency of $FecG^+$ (0.82) wild type allele was higher than the frequency of $FecG^l$ (0.18) mutant allele and the frequencies of $FecG^+/FecG^+$, $FecG^+/FecG^1$ and $FecG^1/FecG^1$ genotypes were 0.72, 0.20 and 0.08, respectively in GDF9 locus. The heterozygous ($FecG^+/FecG^1$) and homozygous ($FecG^+/FecG^+$) non-carrier ewes had 0.35 and 0.21 more lambs than the homozygous ($FecG^1/FecG^1$) carrier ewes, respectively (p<0.05). In addition to the finding of segregation of non-additive gene effect on litter size in the previous study in Baluchi sheep, these findings for the first time shows that the $FecG^1$ gene has a major effect on litter size in this breed.
The average twin lambing rate of Bayanbulak sheep is 2% to 3%. However, a flock of sheep with a close genetic relationship and an average of 2 to 3 lambs per birth has been found recently. To determine the major genes controlling the prolificacy of the flock in the present study, the flock was designated A while 100 normal Bayanbulak sheep were randomly selected to comprise the control flock B. Ligase detection reaction method was applied to detect and analyze the 10 mutational loci of the 3 candidate prolificacy genes including bone morphogenetic protein type I receptors, bone morphogenetic protein 15, and growth differentiation factor 9. The 10 mutational loci are as follows: FecB locus of the BMPR-IB gene; $FecX^I$, $FecX^B$, $FecX^L$, $FecX^H$, $FecX^G$, and $FecX^R$ of the BMP15 gene; and G1, G8, and FecTT of the GDF9 gene. Two mutations including BMPR-IB/FecB and GDF9/G1 were found in Bayanbulak sheep. Independence test results of the two flocks demonstrate that the FecB locus has a significant effect on the lambing number of Bayanbulak sheep. However, the mutation frequency of the G1 locus in GDF9 is very low. Independence test results demonstrate that the GDF9 locus does not have a significant impact on the lambing performance of Bayanbulak sheep. Among the 10 detected loci, BMPR-IB/FecB is the major gene that influences the high lambing rate of Bayanbulak sheep.
Liu, Gabriel;Tan, Jun Hao;Yang, Changwei;Ruiz, John;Wong, Hee-Kit
Asian Spine Journal
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v.12
no.6
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pp.1010-1016
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2018
Study Design: Retrospective cohort study. Purpose: To report on spinal fusion assessment using computed tomography (CT) after adult spinal deformity (ASD) surgery using ultra-low dose recombinant human bone morphogenetic protein 2 (RhBMP-2). Overview of Literature: The reported dose of RhBMP-2 needed for successful spinal posterolateral fusion in ASD ranges from 10 to 20 mg per spinal level. This study reports the use of ultra-low dose of RhBMP-2 (0.07 mg per facet) to achieve spinal fusion in multilevel ASD surgery. Methods: Consecutive patients who underwent ASD surgery using ultra-low dose RhBMP-2 were recruited. Routine postoperative CT analysis for spinal fusion was performed by two spine surgeons. Inter-observer agreement was calculated for facet fusion (FF) and interbody fusion (IBF) at 6 and 12 months after the procedure. Results: Six consecutive ASD patients with a mean age of 62 years (28-72 years) were examined. Each patient received a total dose of 12 mg with an average dose of $0.69{\pm}0.2mg$ (0.42-1 mg) per single FF and $1.38{\pm}0.44mg$ (0.85-2 mg) for IBF. Total 131 FF and 15 IBF were examined in the study, with 88 FFs and nine IBFs being analyzed specifically at 6 months after the surgery. FF and IBF reported by surgeons A and B at 6 months were 97.7% vs. 91.9% FF, respectively (${\kappa}=0.95$) and 100% vs. 100% IBF, respectively (${\kappa}=1$). Two patients underwent longitudinal follow-up CT at 12 months, and the FF rates reported by surgeons A and B were 100% vs. 95.8%, respectively (${\kappa}=0.96$). Five out of nine facet (56%) non-unions were identified at the cross-links. The remaining four facet pseudarthrosis were noted at 1-2 spinal levels caudal to the cross-links. At the final clinical follow-up, there was no rod breakage, deformity progression, neurological deficit, or symptom recurrence. The Oswestry Disability Index improved by an average of $32.8{\pm}6.3$, while the mental component summary of the 36-item Short-Form Health Survey improved by an average of $4.7{\pm}2.1$, and physical component summary improved by an average of $10.5{\pm}2.1$. Conclusions: To our knowledge, this is the first study to report a CT that defined 92%-98% FF and 100% IBF using the lowest reported dose of RhBMP-2 in multilevel ASD surgery. The use of ultra-low dose RhBMP-2 reduces the RhBMP-2 related complications and healthcare costs.
Park, Jung-Chul;Lee, Jong-Bin;Daculsi, Guy;Oh, Sang-Yeop;Cho, Kyoo-Sung;Im, Gun-Il;Kim, Byung-Soo;Kim, Chang-Sung
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.42
no.4
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pp.136-143
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2012
Purpose: The osseointegration around titanium mini-implants installed in macroporous biphasic calcium phosphate (MBCP) blocks was evaluated after incubation with recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2) in an ectopic subcutaneous rat model. Methods: Mini-implants (${\varphi}1.8{\times}12$ mm) were installed in MBCP blocks (bMBCPs, $4{\times}5{\times}15$ mm) loaded with rhBMP-2 at 0.1 mg/mL, and then implanted for 8 weeks into subcutaneous pockets of male Sprague-Dawley rats (n=10). A histomorphometric analysis was performed, and the bone-to-implant contact (BIC) and bone density were evaluated. Results: Significant osteoinductive activity was induced in the rhBMP-2/bMBCP group. The percentage of BIC was $41.23{\pm}4.13%$ (mean${\pm}$standard deviation), while bone density was $33.47{\pm}5.73%$. In contrast, no bone formation was observed in the bMBCP only group. Conclusions: This model represents a more standardized tool for analyzing osseointegration and bone healing along the implant surface and in bMBCPs that excludes various healing factors derived from selected animals and defect models.
The present study assessed the effect of FSH and LH on oocyte meiotic, cytoplasmic maturation and on the expression level and polyadenylation status of several maternal genes. Cumulus-oocyte complexes were cultured in the presence of FSH, LH, or the combination of FSH and LH. Significant cumulus expansion and nuclear maturation was observed upon exposure to FSH alone and to the combination of FSH and LH. The combination of FSH and LH during entire IVM increased the mRNA level of four maternal genes, C-mos, Cyclin B1, Gdf9 and Bmp15, at 28 h. Supplemented with FSH or LH significantly enhanced the polyadenylation of Gdf9 and Bmp15; and altered the expression level of Gdf9 and Bmp15. Following parthenogenesis, the exposure of oocytes to combination of FSH and LH during IVM significantly increased cleavage rate, blastocyst formation rate and total cell number, and decreased apoptosis. In addition, FSH and LH down-regulated the autophagy gene Atg6 and upregulated the apoptosis gene Bcl-xL at the mRNA level in blastocysts. These data suggest that the FSH and LH enhance meiotic and cytoplasmic maturation, possibly through the regulation of maternal gene expression and polyadenylation. Overall, we show here that FSH and LH inhibit apoptosis and autophagy and improve parthenogenetic embryo competence and development.
Kim, Seung-Hwan;Oh, Seung-Yong;Kim, Chang-Hyun;Yoon, Young-Man
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.45
no.6
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pp.1086-1093
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2012
This research was carried out to develop the correction method of VDI4630 method improving accuracy, and investigated the effects of carbonate ion ($CO_3{^{2-}}$) and reactant water ($H_2O$) on anaerobic organic biodegradability in VDI4630 method. Pig blood, pig intestine residue, pig digestive tract content, and cattle rumen content were experimented as waste biomasses. Chemical formulas of pig blood, pig intestine residue, pig digestive tract content, and cattle rumen content were $C_{3.78}H_{8.39}O_{1.46}N_1S_{0.01}$, $C_{9.69}H_{15.42}O_{2.85}N_1S_{0.03}$, $C_{25.17}H_{43.32}O_{15.04}N_1$, $C_{27.23}H_{42.38}O_{15.93}N_1S_{0.11}$, respectively. And amount of reactant moisture for the anaerobic degradation of organic materials were 0.336, 0.485, 0.227, 0.266 mol, respectively. In pig blood, pig intestine residue, pig digestive tract content, and cattle rumen content, anaerobic organic biodegradability presented as $B_u/B_{th}$ were 82.3, 81.5, 70.8, and 66.1%, and anaerobic organic biodegradability (AB) by VDI4630 method were 72.2, 87.8, 74.2, 62.0%, and that were significantly different with anaerobic organic biodegradability presented as $B_u/B_{th}$. The effects of carbonate ion and reactant water on anaerobic organic biodegradability were not significant, But Accuracy of anaerobic organic degradability was expected to able to be improved by the correction method of VDI4630 considering the carbonate ion at digestate and the reactant water quantified.
Maternal malnutrition during pregnancy may give rise to female offspring with disrupted ovary functions in adult age. Neonatal ovary development predisposes adult ovary function, yet the effect of maternal nutrition on the neonatal ovary has not been described. Therefore, here we show the impact of maternal protein restriction on the expression of folliculogenic and steroidogenic genes, their regulatory microRNAs and promoter DNA methylation in the ovary of neonatal piglets. Sows were fed either standard-protein (SP, 15% crude protein) or low-protein (LP, 7.5% crude protein) diets throughout gestation. Female piglets born to LP sows showed significantly decreased ovary weight relative to body weight (p<0.05) at birth, which was accompanied with an increased serum estradiol level (p<0.05). The LP piglets demonstrated higher ratio of bcl-2 associated X protein/B cell lymphoma/leukemia-2 mRNA (p<0.01), which was associated with up-regulated mRNA expression of bone morphogenic protein 4 (BMP4) (p<0.05) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) (p<0.05). The steroidogenic gene, cytochrome P450 aromatase (CYP19A1) was significantly down-regulated (p<0.05) in LP piglets. The alterations in ovarian gene expression were associated with a significant down-regulation of follicle-stimulating hormone receptor mRNA expression (p<0.05) in LP piglets. Moreover, three microRNAs, including miR-423-5p targeting both CYP19A1 and PCNA, miR-378 targeting CYP19A1 and miR-210 targeting BMP4, were significantly down-regulated (p<0.05) in the ovary of LP piglets. These results suggest that microRNAs are involved in mediating the effect of maternal protein restriction on ovarian function through regulating the expression of folliculogenic and steroidogenic genes in newborn piglets.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.13
no.8
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pp.3532-3536
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2012
Understanding of the maternal transcriptome increased to elucidate the underlying molecular mechanism of normal oocyte maturation, which depends on a precise sequence of changes in maternal genes expression. Previous reports that the translational potential of a maternal mRNA is generally determined by the length of the poly(A) tail, and deadenylation is usually the first sign of mRNA degradation. However, in vitro cultured system has the underlying molecular mechanisms remain unclear. We determined whether the role of molecular basis, four important maternal genes, C-mos, cyclin-B1 (regulatory subunit of MPF), BMP15 and GDF9, were selected for detection of their precise mRNA expression patterns by real-time PCR and for determination of their polyadenylation status by poly(A) tail PCR during oocyte maturation. In the present study. the abnormal expression of maternal mRNAs prior to zygotic genome activation, which results in suppression of the corresponding protein level, may be responsible for, at least in part, a profound defect in further embryonic development. Reasonable expression of maternal gene is crucial for proper oocyte maturation and further embryonic development.
As a result of the growing livestock industry, varieties of organic solid and waste biomass are be generated in swine breeding and slaughtering stages. Anaerobic digestion is a promising alternative for the treatment of livestock waste biomass, as well as for the material recovery and energy production. Objectives of this study were to analyze the biochemical methane potential of swine waste biomasses that were generated from swine pen and slaughterhouse and to investigate the material recovery and methane yield per head. As pig waste biomass, swine slurry, blood, intestine residue, and digestive tract content were collected for investigation from pig farmhouse and slaughterhouse. The $B_{th}$ (Theoretical methane potential) and $B_0$ (Biochemical methane potential) of swine slurry generating in swine breeding stage were 0.525 and $0.360Nm^3\;kg^{-1}-VS_{added}$, the ratio of degradation ($B_0/B_{th}$) was 68.6%. $B_{th}$ of blood, intestine residue, and digestive tract content were 0.539, 0.664, and $0.517Nm^3\;kg^{-1}-VS_{added}$, and $B_0$ were 0.405, 0.213, and $0.240Nm^3\;kg^{-1}-VS_{added}$, respectively. And the ratio of degradation showed 75.1, 32.1, and 46.4% in blood, intestine residue, and digestive tract content. Material yield of swine waste biomass was calculated as TS 73.79, VS 46.75, TN 5.58, $P_2O_5$ 1.94, and $K_2O$$2.91kg\;head^{-1}$. And methane yield was $16.58Nm^3\;head^{-1}$. In the aspect that slaughterhouse is a large point source of waste biomass, while swine farmhouse is non-point source, the feasibility of an anaerobic digestion using the slaughtering waste biomass need to be assessed in the economical aspect between the waste treatment cost and the profitable effect by methane production.
Lee, Seung Eun;Kim, Eun Young;Choi, Hyun Yong;Moon, Jeremiah Jiman;Park, Min Jee;Lee, Jun Beom;Jeong, Chang Jin;Park, Se Pill
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.27
no.5
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pp.635-647
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2014
Unfertilized oocytes age inevitably after ovulation, which limits their fertilizable life span and embryonic development. Rapamycin affects mammalian target of rapamycin (mTOR) expression and cytoskeleton reorganization during oocyte meiotic maturation. The goal of this study was to examine the effects of rapamycin treatment on aged porcine oocytes and their in vitro development. Rapamycin treatment of aged oocytes for 24 h (68 h in vitro maturation [IVM]; $44h+10{\mu}M$ rapamycin/24 h, $47.52{\pm}5.68$) or control oocytes (44 h IVM; $42.14{\pm}4.40$) significantly increased the development rate and total cell number compared with untreated aged oocytes (68 h IVM, $22.04{\pm}5.68$) (p<0.05). Rapamycin treatment of aged IVM oocytes for 24 h also rescued aberrant spindle organization and chromosomal misalignment, blocked the decrease in the level of phosphorylated-p44/42 mitogen-activated protein kinase (MAPK), and increased the mRNA expression of cytoplasmic maturation factor genes (MOS, BMP15, GDF9, and CCNB1) compared with untreated, 24 h-aged IVM oocytes (p<0.05). Furthermore, rapamycin treatment of aged oocytes decreased reactive oxygen species (ROS) activity and DNA fragmentation (p<0.05), and downregulated the mRNA expression of mTOR compared with control or untreated aged oocytes. By contrast, rapamycin treatment of aged oocytes increased mitochondrial localization (p<0.05) and upregulated the mRNA expression of autophagy (BECN1, ATG7, MAP1LC3B, ATG12, GABARAP, and GABARAPL1), anti-apoptosis (BCL2L1 and BIRC5; p<0.05), and development (NANOG and SOX2; p<0.05) genes, but it did not affect the mRNA expression of pro-apoptosis genes (FAS and CASP3) compared with the control. This study demonstrates that rapamycin treatment can rescue the poor developmental capacity of aged porcine oocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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