기능성 옥수수 수염을 가지는 옥수수 계통을 선발하기 위해 다양한 자식계통과 F1을 대상으로 옥수수 수염의 항산화 성분과 항산화능을 측정하였다. 측정결과, 총 페놀 함량, 총 플라보노이드 함량의 경우 각각 980${\sim}$2,420 mg 100 $g^{-1}$, 1,532${\sim}$3,274 mg 100 $g^{-1}$의 범위를 나타내었다. 안토시아닌의 고유영역인 517 nm에서의 흡광도는 0.05에서 0.76까지의 범위를 보였다. 옥수수 수염의 항산화 성분과 DPPH, ABTS, FRAP assay에서 얻어진 항산화능간의 상관관계를 분석한 결과, ABTS와 FRAP assay에서 옥수수 수염의 항산화 활성과 페놀성물질 및 안토시아닌간의 상관계수가 유의하게 높았다. 옥수수 수염의 안토시아닌을 추출하는 용매가 산성이라는 점과 안토시아닌의 DPPH 용액과의 가시영역 파장에서의 간섭을 고려할 때, DPPH 보다는 ABTS assay나 FRAP assay가 더 적합한 항산화능 측정 방법이 될 것이다. 이들 중 특히 ABTS assay는 옥수수 수염의 주요한 기능성 성분인 안토시아닌과 플라보노이드 및 페놀성 물질과 모두 높은 상관성을 보여 옥수수 수염의 종합적인 항산화능을 평가하고 우수 계통을 선발하는데 적합한 측정 방법이 될 것으로 사료된다. 본 실험에서 안토시아닌 함량과 페놀 함량이 높고 ABTS assay와 FRAP assay에서 모두 높은 항산화능을 보여준 S15은 고 기능성 품종 육종 및 옥수수 수염을 이용한 기능성 소재 개발에 이용될 수 있을 것이다. 또한 옥수수 수염의 항산화능 측정에 대한 항산화 실험의 적합성 연구는 우수한 옥수수 수염을 선발하는데 도움이 될 것이다.
On-line screening high performance liquid chromatography (HPLC)-$ABTS^+$ assay를 이용한 청호로부터 chlorogenic acid, caffeic acid, vitexin, queretin, aremisinin의 항산화 활성을 온라인스크리닝 하였다. 이때 침적방법을 적용한 추출시간과 추출용매 조성으로부터 추출효율을 확인하였다. 이 결과 100% 물 추출물에서 수율이 가장 좋왔고 chloroenic acid의 항산화 활성이 가장 높았다. 또한 on-line screening HPLC-$ABTS^+$ assay 분석은 천연물에서 항산화 활성을 신속하게 탐색하는데 효율적이다.
Lee, Sang Gil;Wang, Taoran;Vance, Terrence M.;Hurbert, Patrice;Kim, Dae-Ok;Koo, Sung I.;Chun, Ock K.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권2호
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pp.388-394
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2017
Although several analytical methods for measuring total antioxidant capacity (TAC) have been applied to biological samples, there were often dissimilar results due to the different principles of methods applied. Thus, this study aimed to validate four conventional analytical methods for measuring plasma TAC, including the ABTS assay, DPPH assay, FRAP assay, and ORAC assay, by comparing with urinary 8-isoprostane concentration. In addition, TAC results were compared with antioxidant enzyme activities including superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase in erythrocyte, and catalase in plasma. Plasma TAC measure by ABTS assay was strongly correlated with the result by FRAP assay. Plasma TAC by FRAP and ORAC assays were negatively correlated with erythrocyte SOD activity. The agreement among the four TAC assay methods and 8-isoprostane was determined using 95% prediction limits of linear regression, expressed as the mean of 8-isoprostane ${\pm}95%$ prediction limits. The ABTS method better agreed with 8-isoprostane than the other methods, demonstrating narrow prediction of limits. Furthermore, only plasma TAC determined by the ABTS assay was inversely correlated with urinary 8-isoprostane (r = -0.35, p < 0.05). In summary, the ABTS assay would be an appropriate method to measure overall plasma antioxidant capacity and predict the body's antioxidant status.
Acer tegmentosum was a traditional Korean herbal medicine showing various pharmacological activities. In this work, A. tegmentosum were extracted with boiling water and then successively partitioned with dichloromethane, ethyl acetate, n-butyl alcohol (n-BuOH), and water. Salidoside, the target compound, was purified in n-BuOH phase using a chromatography method. For the analysis of salidoside, TLC and LC-MS were used as well as on-line screening $HPLC-ABTS^+$ assay with three different wavelength of 254, 280, and 320 nm. An amount of 1.34 g of salidoside were obtained in n-BuOH phase fromAcer tegmentosum was a traditional Korean herbal medicine showing various pharmacological activities. In this work, A. tegmentosum were extracted with boiling water and then successively partitioned with dichloromethane, ethyl acetate, n-butyl alcohol (n-BuOH), and water. Salidoside, the target compound, was purified in n-BuOH phase using a chromatography method. For the analysis of salidoside, TLC and LC-MS were used as well as online screening $HPLC-ABTS^+$ assay with three different wavelength of 254, 280, and 320 nm. An amount of 1.34 g of salidoside were obtained in n-BuOH phase from 3 kg of dry biomass. The on-line screening $HPLC-ABTS^+$ assay is rapid and efficient tool to search bioactivity from A. tegmentosum. 3 kg of dry biomass. The on-line screening $HPLC-ABTS^+$ assay is rapid and efficient tool to search bioactivity from A. tegmentosum.
도꼬마리 (X. strumarium )는 국화과에 속하며, '창이자'라는 한약명으로 사용되는 다년생 식물이다. 열매부위와 지상부위의 추출물을 이용하여 융합 식물활성작용을 관찰하였다. 산화적 스트레스에 대항하는 실험법으로는 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical (DPPH), ABTS assay를 사용하였다. 도꼬마리의 추출물은 단일분리가 아닌 ethanol, petroleum ether, 그리고 ethyl acetate로 추출하였다. 산화적 스트레스연구에 사용되는 radical scavenging 능력을 확인하기 위하여 DPPH radical and ABTS를 투여하였다. 본 연구에서 도꼬마리는 천연유래 항산화 효과를 보였다.
2,2'-diphenylpicrylhydrazyl ($DPPH^{\cdot}$) assay와 2,2'-azino-bis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid ($ABTS^+$) decolorization assay는 자연상태의 플라보노이드와 이소플라보노이드의 항산화 활성을 확인하는데 사용된다. 억제중간값(half maximal inhibitory concentration ($IC_{50}$) values)과 트롤록스당량 항산화능값(trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) values)은 $DPPH^{\cdot}$ assay와 $ABTS^+$ assay로 계산되었다. DPPH assay 결과, 쿼세틴(quercetin)은 가장 강한 항산화 능력을 가졌고 뒤이어 피세틴(fisetin), 7,8-디하이드록시플라본(7,8-dihydroxyflavone), 모린(morin), 캠퍼롤(kaempferol) 순이었다. 쿼세틴, 피세틴, 7,8-디하이드록시플라본은 부틸하이드록시 아니솔(butyl hydroxyl anisole)보다 더 높은 항산화 능력을 가졌다. 쿼세틴은 플라보노이드와 이소플로보노이드 중에서 TEAC 값이 가장 높았고 뒤이어 3-하이드록시플로본(3-hydroxyflavone), 피세틴, 7,8-디하이드록시플라본과 모린 순이었다. 다른 나머지 플라보노이드와 이소플라보노이드는 트롤록스 보다 더 약한 $ABTS^+$ 분해능력(scavenging potential)을 가졌다. 테스트된 13개 플라보노이드/이소플라보노이드에서 이소플라보노이드는 플라보노이드보다 매우 약한 항산화 능력을 보였다.
본 연구에서는 서리태 에탄올 추출물의 항산화 활성을 측정하고, 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량을 분석하였으며, MTT 및 SRB assay를 통한 암세포 증식 억제 활성을 측정하였다. 서리태 에탄올 추출물의 DPPH 및 ABTS 라디칼에 대한 전자공여능은 500 ${\mu}g$/assay의 농도에서 각각 63.75%와 87.68%로 나타났고, $IC_{50}$ 값은 각각 385.39 ${\mu}g$/assay와 209.39 ${\mu}g$/assay로 나타났으며, 항산화 활성 물질로 알려져 있는 총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량은 각각 1.65 mg/g과 0.59 mg/g으로 분석되었다. 또한 서리태 에탄올 추출물(800 ppm)은 MTT assay에서 인체 폐암세포인 A-549에 대해 76.48%의 암세포 증식 억제 활성을 나타내었고, SRB assay에서 인체 자궁암세포인 HeLa에 대해 80.54%의 암세포 증식 억제 활성을 나타내었다. 이들 결과는 서리태 에탄올 추출물이 높은 항산화 활성과 우수한 암세포 증식 억제 활성을 가지고 있음을 나타낸 것으로 서리태 에탄올 추출물의 천연 기능성 소재로서의 이용 가능성을 보여주었다.
강황(Curcuma longa)으로부터 bisdemethoxycurcumin (BDMC), demethoxycurcumin (DMC) 및 curcumin의 생물 활성을 offline-ABTS 측정법과 on-line screening high-performance liquid chromatography (HPLC)-ABTS 측정법을 적용한 빠른 스크리닝을 통해 정량 및 성분 분리를 하였다. 이때, off-line-ABTS와 on-line screening HPLC-ABTS 비교는 미미한 오차를 보여주었다.
Kim, Chul-Young;Lee, Hee-Ju;Lee, Eun-Ha;Jung, Sang-Hoon;Lee, Dong-Un;Kang, Suk-Woo;Hong, Sae-Jin;Um, Byung-Hun
Food Science and Biotechnology
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제17권4호
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pp.846-849
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2008
This study employed high performance liquid chromatography (HPLC) coupled to an on-line $ABTS^+$ radical scavenging detection (RSD) system along with HPLC-electro spin impact/mass spectrometry (ESI/MS), to rapidly determine and identify antioxidant compounds occurring in blueberry extract. The extract was separated by HPLC, and then the radical scavenging activities of the separated compounds were evaluated by the on-line coupled $ABTS^+$-RSD system. The negative peaks of the $ABTS^+$-RSD system, which indicates the presence of antioxidant activity, were monitored by measuring the decrease in absorbance at 734 nm. The active components in the blueberry extract were identified by HPLC-ESI/MS using their MS spectra and retention times. According to the data acquired from the on-line HPLC-$ABTS^+$-based assay and HPLC-ESI/MS systems, the antioxidant compounds detected in the blueberry extract were identified as chlorogenic acid and 11 anthocyanins.
Shinseoncho and kale were made into green vegetable juices by building block [shinsenocho branch (SB), shinsenocho leaf (SL), kale branch (KB), and kale leaf (KL)]. Fluctuations in their phenolic contents and antioxidant capacities were analyzed during refrigerated storage at $4^{\circ}C$ for 28 days. Total polyphenolic contents of leaf parts showed a decreasing tendency after 4 days (SL) or 7 days (KL), whereas branch parts showed fluctuating values during the entire storage period. The 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radical scavenging capacity was rapidly decreased in SB and in SL at 28 days (P<0.001), whereas KL showed a slightly increasing tendency after 14 days. For the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging capacity, SL showed a sharp fall at 28 days (P<0.001), and KL showed a decreasing tendency after 14 days (P<0.001). SB showed a steady decrease during the entire storage period and KB indicated a nearly zero (0.97%) at 28 days. Pearson's coefficients for the correlation between antioxidant capacities measured by the ABTS and DPPH assays, and the total polyphenolic contents were determined. The results showed that the ABTS assay (r=0.934, P<0.001) was more strongly positively correlated with the total phenolic contents than the DPPH assay (r=0.630, P<0.001). In conclusion, when considering all building blocks, green vegetable juices, including kale and shinseoncho may have kept antioxidant capacities for up to 14 days under refrigeration, and the ABTS assay better reflects a positive correlation with the total phenolic contents when compared to the DPPH assay.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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