Bacillus cereus 1-1 strain produced 2 mM of ALA in the aerobic dark condition without any inhibitor like levulinic acid. The optimum culture conditions for the ALA production were that preculture and main culture were continued for 18 hr in TCY medium, and 16 mM of organic acids like acetic acid were added at the late log phase when the pH was 6.8. And the addition of 0.3% glucose was effective at the beginning of the main culture. ALA production was continued for more than 8 hr by the addition of glutamic acid instead of acetic acid, and was inhibited by addition of $40\;{\mu}M$ gabaculine seriously. These results confirmed that B. cereus 1-1 strain produced ALA through C-5 pathway.
LEE , DAE-HEE;JUN, WOO-JIN;YOON, JEONG-WEON;CHO, HONG-YON;HONG, BUM-SHIK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.6
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pp.1310-1317
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2004
The extracellular production of 5-aminolevulinic acid (ALA) by recombinant E. coli BL21 harboring a fusion gene hemA was investigated in a fermenter. For this purpose, the effects of various physiological factors, such as isopropylthio$\beta$-D-galactopyranoside (IPTG) concentrations and the time of induction, on enzyme activity were studied. Optimum concentrations of glycine and succinic acid were found to be 30 mM and 90 mM, respectively. When the cells were permitted to grow for 2 h prior to the addition of 0.1 mM IPTG, the activity of ALA synthase was higher than when IPTG was initially added. A 36-fold increase in the activity was observed with only 0.1 mM IPTG added. The pH of the medium also influenced the ALA synthase activity with the maximal activity occurring at pH 6.5. In recombinant E. coli extracts, the repeated addition of glycine and D-glucose increased the production of ALA and the inhibited intracellular ALA dehydratase activity, with up to 32 mM ALA being produced in the cultivation.
ALA (5-aminolevulinic acid) has been proposed as a tetrapyrrole-dependent photodynamic herbicide and insecticide by the action of the protoporphyrinogen IX oxidase (Protox IX). The present study was conducted to determine growth responses of plant and insects to ALA, biodegradable biopesticidal substance. In the paddy condition experiment, plant height and shoot fresh weight of barnyardgrass (Echinochloa crus-galli) was more reduced by ALA than rice plants, even though both plant species show great phytotoxicity. Hairy crabgrass (Digitaria sanguinalis), a monocot weed, was more sensitive to ALA at 5mM under upland condition when ALA applied on the foliage, compared with soybean (Glycine max) as a dicot crop. ALA solutions were tested for their insecticidal and larvicidal activities against Spodaptera exigua (Hubner) and Tetranychus urticae Koch. by foliar application and leaf-dipping method. The result showed higher insecticidal activity of ALA at 10mM and its mixture with insecticide luferon against S. exigua. Strongest insecticidal activity against T. urticae was observed from the ALA solution at 10mM 72 days after application. This results show that ALA solution had potent herbicidal and insecticidal activities against agricultural pests even though their activities were lower than those of synthetic pesticides.
Kang Min-Seok;Kim Dong-Myung;Kim Jeong Sook;Jeong Jin-Hyun
Archives of Pharmacal Research
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v.28
no.10
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pp.1111-1113
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2005
5-Aminolevulinic acid and its derivatives, which are known to affect the early diagnosis and treatment of cancer, have been synthesized. Simple methods for the synthesis of 5-aminole-vulinic acid (ALA), a precursor of porphyrins, have been developed in our laboratory for use in studies on the biosynthesis of porphyrins.
Laboratory and greenhouse experiments were conducted to determine the herbicidal effect of two types of ${\delta}$-aminolevulinic acid (ALA), microbiologically-produced ALA (Bio-ALA) and synthetically produced ALA (Synthetic-ALA), on plant growth and chlorophyll content of Chinese cabbage. ALA effect on early plant growth was greatly concentration dependant, showing significant inhibition at higher concentrations. Both pre- and post-emergence application of ALA exhibited significant degree of photodynamic phytotoxicity. Older plants with many leaves were more tolerant to ALA than younger plants, showing less injury. No significant difference in herbicidal activity of two types of ALA, Bio-ALA and Synthetic-ALA, on plant height and chlorophyll content of Chinese cabbage was observed. However, residual biological activity and physico-chemical properties of Synthetic-ALA were more stable than those of Bio-ALA. Our results suggest that ALA had herbicidal potential with both pre- and post-emergence application, and that the chemical may be a valuable mean of eco-friendly weed control based on natural microbial substance.
5-aminolevulinic acid (ALA) is a representative photosensitizer used in numerous fields including cancer diagnosis and treatment. In this study, experiments were conducted to optimize the growth of Rhodobacter sphaeroides and production of ALA through LED irradiation of various wavelengths, addition of organic acid precursors of ALA, and changes in glucose concentration. After 72 h cultivation, the 850 nm wavelength LED irradiated at the same light intensity as the incandescent lamp increased the growth of R. sphaeroides and the production of ALA about 1.5- and 1.8-fold as compared with the control, respectively (p <0.0001 and p <0.0001). As a result of culturing R. sphaeroides by irradiating an LED with a wavelength of 850 nm after adding organic acid to the final concentration of 5 mM in culture medium, the production of ALA was increased about 2.8-fold in medium supplemented with pyruvic acid compared with the control (p <0.0001). In addition, the growth of the strain and the production of ALA were increased about 2.9- and 3.4-fold in medium supplemented with 40 mM glucose compared to the control which added only 5 mM pyruvic acid, respectively (p <0.0001 and p <0.0001). The yield of ALA per cell dry mass was about 1.4 folds higher than that of the control in 20 and 40 mM glucose, respectively (p <0.001). In conclusion, the growth of R. sphaeroides and production of ALA were increased by 850 nm wavelength LED irradiation. It also optimized the growth of R. sphaeroides and production of ALA through organic acid addition and glucose concentration changes.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.10
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pp.1606-1610
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2004
This study was. conducted to investigate the effects of $\delta$-aminolevulinic acid supplementation on growth. performance, nutrient digestibility and hematological changes in weaned pigs. Seventy five Duroc${\times}$Yorkshire${\times}$ Landrace pigs (7.21$\pm$0.02 kg average BW) were used in a 20 d growth assay. Dietary treatments included 1) NC (negative control; basal diet), 2) PC (positive control; NC diet + 0.1% Apramycin + 0.1% Oxytetracycline), 3) ALA0.l (NC diet+0.l% $\delta$-aminolevulinic acid), 4) ALA0.2 (NC diet+0.2% $\delta$-aminolevulinic acid) and 5) ALA + AB (PC diet+0.2% $\delta$-aminolevulinic acid). In entire experimental period, ADG (Average Daily Gain) was greater in pigs fed ALA + AB diet than in pigs fed NC diet (p<0.05). However, there was no significant difference in ADG for pigs fed PC, ALA0.l or ALA0.2 diets. Also, ADFI (Average Daily Feed Intake) and G/F (Gain/Feed) were not affected by treatments. For 20 d, fecal digestibilities of DM (Dry Matter) and N (Nitrogen) were higher (p<0.05) for pigs fed ALA + AB diet than for pigs fed NC and ALA0.l diets. Total protein concentration of serum was increased in ALA + AB treatment compared to NC and PC treatments (p<0.05). In iron concentration of serum, pigs fed $\delta$-aminolevulinic acid supplementation diets were greater than for pigs fed NC and PC diets (p<0.05). TIBC (Total Iron Binding Capacity) concentration of serum was increased in ALA + AB treatment compared to NC, PC and ALA0.l treatments (p<0.05). Pigs fed ALA + AB and ALA0.2 diets were higher hemoglobin (Hb) and hematocrit (HCT) concentration of blood than pigs fed NC and PC diets (p<0.05). RBC and WEC concentrations of blood were significantly higher (p<0.05) for the pigs fed ALA0.2 and ALA + AB diets than for pigs fed NC diet. Lymphocyte concentration of blood was increased in $\delta$-aminolevulinic acid supplementation treatment compared to NC treatment (p<0.05). In conclusion, $\delta$-aminolevulinic acid supplementation for weanling pigs had improved growth performance and nutrient digestibilities and had increased total protein, iron, hemoglobin and lymphocyte concentration of blood. Also, feeding for dietary $\delta$-aminolevulinic acid and antibiotic mixture supplementation may have more higher effective growth performance in weanling pigs.
A novel system has been developed to produce ${\delta}-aminolevulinic$ acid (ALA) using the intact cells of late logarithmic phase of Rhodocyclus gelatinosus KUP-74. The system was shown optimum yield of extracellular ALA under a condition of anaerobic light irradiation (4 Klux) at $30^{\circ}C$ with no variation in cell mass. The rate of extracellular ALA formation was stimulated by low doses of either $C_4\;or\;C_5$ ALA biosynthetic precursors, where 5 mM ($C_4) and 3 mM ($C_5) of each precursors were appeared to generate the maximum rates of 3.3 and 4.0 nmoles of ALA per 0.35 mg cells per hr, respectively. Half-life of the system was 10 hr in a sense of an ability of portage transport of L-glutamate, and sequential dose of this compound was resulted in promising recovery of the ALA.
Recombinant Escherichia coli BLR(DE3) harboring the hemA gene from Rhodobacter capsulatus under the control of a constitutive promoter, which we constructed previously, was used for the extracellular production of 5-aminolevulinic acid (ALA). The effects of several factors on ALA production were investigated in flask culture. ALA production by the recombinant E. coli was more efficient at $30^{\circ}C$ than $37^{\circ}C$. The glycine concentration had an important effect on cell growth. Glycine and succinic acid concentration of 5-10 and 10-20 g/L, respectively, resulted in high ALA production. In addition, the partial replacement of succinic acid by sodium glutamate increased the ALA production. The ALA production was inhibited by the presence of glucose in the medium. Using the optimal conditions, an ALA concentration of 8.2 g/L was achieved in jar fermentation without an added inducer or ALA dehydratase inhibitor; this is the highest reported concentration.
Aminolevulinic acid(ALA) was shown to be synthesized via active pathways of either C4 or C5 ALA biosynthesis in cells of a photosynthetic bacterium, Rhodocyclus gelatinosus KUP-74, where the C5 pathway was appeared to be preferntially expressed in the cells. It was strongly suggested that L-glutamine might be utilized more effectively than L-glutamate to synthesize ALA via C5 pathway in this bacterium from the fact of relationship between the cellular uptake rates of glutamate and its Gamma-derivaties and corresponded ALA productivities in vitro and in vivo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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