한국에서 주요하게 재배되는 세 개의 품종(켐벨, 청포도, 머루포도)을 대상으로 껍질과 씨 추출물의 미백효능을 검색하였다. Mouse melanoma인 B16세포에 $\alpha$-MSH와 샘플을 처리하여 melanin 생성을 측정하였다. 세 품종의 껍질은 효과가 없었으며 켐벨과 청포도의 씨 추출물은 세포독성이 매우 강하였다. 머루포도 씨 추출물은 $50{\mu}g/ml$에서 대조구에 비해 melanin 생성은 $51.6{\pm}20.5%$ 이었으며 세포 생존율은 $90.4{\pm}11.3%$ 이어서 약간의 세포 독성에도 불구 melanin 생성 억제 효과가 뚜렷하였다. 머루포도 씨 추출물은 B16세포에서 $\alpha$-MSH에 의한 tyrosinase 발현량 증가를 억제하였다. 이후 연구는 1) 머루포도 씨의 생리활성 단일물질 검색과 2) $\alpha$-MSH의 신호전달 과정에 추출물 및 생리활성 단일물질이 어떻게 영향을 미치는지 하는 점이고 현재 실험에 진행 중에 있다.
Melanin determines phenotypic appearance and its election-opaque property protects cells from physical, including ultraviolet (UV) radiation, and chemical stimuli such as free radicals. However hyper-pigmentation is associated with various skin diseases such as keloid scar. The aim of present study was to investigate the effects of aqueous extracts from Angelica dahurica Benth. (AEAD) on ${\alpha}-Melanocyte$ stimulating hormone $({\alpha}-MSH)-induced$ melanogenesis in B16 mouse melanoma cell. Relative high doses ($5\;mg/m{\ell}$) of AEAD could inhibit melanin formation without apoptotic death in cells treated with ${\alpha}-MSH$. And also, ${\alpha}-MSH-induced$ activation of tyrosinase was inhibited in cells treated with AEAD. These results suggest that AEAD inhibit melanogenesis through inhibiting tyrosinase activity, and also, AEAD may apply to develop whitening drugs and cosmetics.
We investigated the effects of aqueous extracts from twelve medical herbs on ${\alpha}$-melanocyte stimulating hormone (${\alpha}$-MSH)-induced melanogenesis in B16F10 mouse melanoma cell. The cells were incubated with ${\alpha}$-MSH and aqueous extracts 5 days and 2 days and then analysed melanin amount and tyrosinase activities, respectively. Nine aqueous extract of herbs examined at 1 mg/m${\ell}$ level decreased melanin synthesis in B16F10 cell, especially in Agastache rugosa, Leonurus siviricus and Murus bombycis. The significant decrease of released extracellular melanin were also observed in treated cells with aqueous extract from Leonurus siviricus, Murus bombycis and Ledebouriella seseioides. The ${\alpha}$-MSH-induced activation of tyrosinase was inhibited in cells treated with aqueous extract from Cuscutae semen, Angelica tenuissima and Agastache rugosa. These results suggest that herbs inhibiting melanogenesis through tyrosinase activity may apply to develop whitening drugs and cosmetics.
This study evaluated the change in whitening activity of ${\beta}-glucan$ by gamma-irradiation. Tyrosinase inhibition was significantly increased in the samples with 30, 50, 100 kGy irradiated ${\beta}-glucan$. Melanin synthesis of irradiated ${\beta}-glucan$ was measured from B16BL6 melanoma cell line treated with ${\alpha}-melanin$ stimulating hormone. Melanin synthesis was increased in the ${\alpha}-melanin$ stimulating hormone added group. However, it was decreased in the groups of 30, 50 and 100 kGy gamma-irradiated ${\beta}-glucan$ treated with ${\alpha}-melanin$ stimulating hormone. These results indicate that gamma irradiated ${\beta}-glucan$ may elevate the whitening activity. Therefore, gamma-irradiated ${\beta}-glucan$ could be used for nutraceutical foods in cosmetic industry.
Objectives : The purpose of this study was to investigate melanogenesis inhibition of ethanol extract of Polyporus (EP) by using B16F10 melanoma cells. Methods : We measured antioxidant effect of EP by using 1,1-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay and we confirmed melanin contents and tyrosinase activity of EP in cells. Additionally, the expression of tyrosinase-related protein-1 (TRP-1) and TRP-2 was observed by Western blot. Results : EP showed significantly high radical scavenging activity and inhibition of melanogenesis in dose-dependent manner by decreasing cellular tyrosinase activity and melanin content with or without α-melanin stimulating hormone. TRP-1 and TRP-2 expressions were also suppressed by EP in B16F10 cells. Conclusions : These results suggest that EP inhibits the melanogenesis and it could be a new organic ingredient for hyper-pigmentation.
Previous research showed that resveratrol (trans-3,4',5-trihydroxystilbene) and pinostilbene (trans-3-methoxy-4',5-dihydroxystilbene) were able to inhibit tyrosinase directly; however, anti-melanogenic effects of pterostilbene (trans-3,5-dimethoxy-4'-hydroxystilbene) and resveratrol trimethyl ether (RTE) have not been compared. To investigate the hypopigmentation effects of pterostilbene and RTE, melanin contents and intracellular tyrosinase activity were determined by western blot analysis. Firstly, pterostilbene showed the inhibitory effects on ${\alpha}$-melanocyte stimulating hormone (MSH)-induced melanin synthesis stronger than RTE, resveratrol, and arbutin. Pterostilbene inhibited melanin biosynthesis in a dose-dependent manner in ${\alpha}$-MSH-stimulated B16/F10 murine melanoma cells. Specifically, melanin content and intracellular tyrosinase activity were inhibited by 63% and 58%, respectively, in response to treatment with $10{\mu}m$ of pterostilbene. The results of western blot analysis indicated that pterostilbene induced downregulation of tyrosinase protein expression and suppression of ${\alpha}$-MSH-stimulated melan-A protein expression stronger than RTE or resveratrol. Based on these results, our study suggests that pterostilbene can induce hypopigmentation effects more effectively than resveratrol and RTE, and it functions via downregulation of protein expression associated with hyperpigmentation in ${\alpha}$-MSH-triggered B16/F10 murine melanoma cells.
The aqueous extract from Asiasari radix (AEAR) was used to investigate the effect of ${\alpha}$-melanocyte stimulating hormone induced melanogenesis in B16F10 mouse melnoma cells. The treatment with AEAR at the 1.0 and 2.0 mg/ml level significantly inhibited the biosynthesis of melanin without changes of cell growth and morphology compared with untreated control. The AEAR-treated cells at the 2.0 mg/ml level were more efficient than commercial arbutin at 0.1 mg/ml. The tyrosinase activity also significantly decreased in AEAR-treated cells at the 1.0 and 2.0 mg/ml level. The Western analyses confirmed the slightly decreased expression of tyrosinase by AEAR treatment. These results indicate that AEAR may contribute to the inhibition of melanin biosynthesis through regulating tyrosinase activity and expression and serve as a new candidate in the design of new skin-whitening or therapeutic agents.
Objective : Melanin is one of the most important facor in skin color. Melanin protects human skin from ultraviolet radiation otherwise it causes melanin pigmentation. So this experiment is carried out for test whether Scutellaria baicalensis Georgi(SBG) inhibits melanin synthesis and tyrosinase activity in mouse B16 melanoma cells. Method : The melanin synthesis inhibition effects of SBG were examined by in vitro melanin production assay. We assessed inhibitory effects of SBG on melanin contents from B16F1 melanoma cell, on tyrosinase activity(cell and cell free system), effect of SBG on the expression tyrosinase, Microphthalmia-associated Transcription Factor(MITF), Extracellular signal-regulated Kinase(ERK). Result : SBG inhibited melanin synthesis induced $\alpha$-MSH($\alpha$-Melanin Stimulating Hormone) in B16F1. SBG inhibited tyrosinase activity and expression. And SBG down-regulates MITF and stimulated ERK activation in B16F1. Conclusion : According to above results, SBG was improved its suppression effect to the inhibition of melanin synthesis, tyrosinase activation, and tyrosinase promotor activation. So SBG is considered to be used for an strong source of skin whitening effect.
Objectives : Since hypopigmentation is known to increase the risk of skin cancer, melanogenesis in the skin needs to be regulated. Here, we evaluated the melanogenesis stimulatory effects of a modified Goagium herbal remedy (HR) and HR+ox bile (Bos taurus domesticus) extract (OBE) to address hypopigmentation disorders. Methods : B16F10 melanoma cells were treated with different dosages of HR and HR+OBE for 24 to 48 h after 1 h of 10 nM ${\alpha}$-melanocyte stimulating hormone (${\alpha}$-MSH). After the treatment, cell viability, tyrosinase activity, melanin synthesis and the expression of genes related to melanin synthesis were measured and the regulation of the ${\alpha}$-MSH signalling through cAMP responding element binding protein (CREB) was determined. Results : HR and HR+OBE with the ranges of $15{\sim}100{\mu}g/mL$ did not affect cell viability in melanoma cells. The 1 h treatment of HR+OBE (50 and $100{\mu}g/mL$) potentiated the phosphorylation of CREB by enhancing ${\alpha}$-MSH signaling and its 24 h treatment increased CREB expression. Consistent with CREB potentiation, their treatment for 24 h, the expression of microphthalmia-associated transcription factor (MIFT), tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP)-1 and TRP-2 were increased in realtime PCR. Ultimately, the 48 h treatment of HR+OBE (50 and $100{\mu}g/mL$) increased tyrosniase activity and melanin contents in the melanoma cells in comparison to the control. Conclusions : HR+OBE (50 and $100{\mu}g/mL$) increases melanin synthesis in B16F10 melanoma cells via the stimulation of tyrosinase activity and expression of MIFT, tyrosinase, TRP-1 and TRP-2. HR+OBE can be used as the a possible treatment for hypopigmentation of the skin.
To further access honeybee (Apis mellifera L.) venom (BV) as a cosmetic ingredient and potential external treatment for topical use, we investigated its ability to inhibit tyrosinase activity and melanin biosynthesis on melanogenesis in B16F1 melanoma cells. We found that BV increased the cell viability in B16F1 melanoma cell and BV (0.01~1 ${\mu}g/ml$) inhibited melanin synthesis in with 10 nM ${\alpha}$-melanocyte-stimulating hormone (${\alpha}$-MSH) for 48 h. In addition, we used reverse transcription-polymerase chain reaction and western blotting for me melanogenesis-related genes such as tyrosinase to examine the mechanisms underlying the inhibitory effects of BV on melanogensis. BV inhibited direct tyrosinase activity, which decreased melanin synthesis in ${\alpha}$-MSH stimulated B16F1 melanoma cells. Thease findings suggest that BV induces the downregulation of melanogenesis by inhibiting tyrosinase activation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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