Out of plant-associated bacteria, certain plant growth-promoting bacteria (PGPB) have been reported to increase plant growth and productivity and to elicit induced resistance against plant pathogens. In this study, our objective was to broaden the range of applications of leaf-colonizing PGPB for foliar parts of road tress and pepper. Total 1,056 isolates of endospore-forming bacteria from tree phylloplanes were collected and evaluated for the enzymatic activities including protease, lipase, and chitinase and antifungal capacities against two fungal pathogens, Colletotrichum graminicola and Botrytis cinerea. Fourteen isolates classified as members of the bacilli group displayed the capacity to colonize pepper leaves after spraying inoculation. Three strains, 5B6, 8D4, and 8G12, and the mixtures were employed to evaluate growth promotion, yield increase and defence responses under field condition. Additionally, foliar application of bacterial preparation was applied to the road tress in Yuseong, Daejeon, South Korea, resulted in increase of chlorophyll contents and leaf thickness, compared with non-treated control. The foliar application of microbial preparation reduced brown shot-hole disease of Prunus serrulata L. and advanced leaf abscission in Ginkgo biloba L. Collectively, our results suggest that leaf-colonizing bacteria provide potential microbial agents to increase the performance of woody plants such as tree and pepper through spray application.
Doenjang samples were prepared by inoculation of multiple starters consisting of two Bacillus spp., one yeast, and one fungus. Doenjang A was fermented with Bacillus amyloliquefaciens EMD17, B. amyloliquefaciens MJ1-4, Pichia farinosa SY80, and Rhizopus oryzae. Doenjang B and C were fermented with the same yeast and fungus but different Bacillus strains; namely, B. amyloliquefaciens EMD17 and B. subtilis CH3-5 for doenjang B, and B. amyloliquefaciens MJ1-4 and B. subtilis CH3-5 for doenjang C. Doenjang D was fermented with microorganisms present in rice straw (control). The doenjang samples were spiked with B. cereus ATCC14579 at two different levels, 104 CFU/g doenjang (I) and 107 CFU/g doenjang (II). All eight doenjang samples were fermented for 70 days at 25℃. Growth of B. cereus was inhibited in doenjang A, B, and C, with the bacterial cell count after 70 days being less than the initial 104 CFU/g added, whereas B. cereus was not inhibited in doenjang D. Doenjang B showed the strongest inhibitory activity against B. cereus, with a cell count of less than 103 CFU/g after 42 days, even when B. cereus was initially added at 107 CFU/g. Some properties of the doenjang samples, such as pH, TA, and amino-type nitrogen content, were similar to those of doenjang fermented with starters only. The results indicate that carefully selected starters can effectively prevent the growth of B. cereus during doenjang fermentation.
This study was conducted to determine the effect of treatment with the plant-growth-promoting bacteria on the growth and yield of red pepper(Capsicum annuum L.) with different soil electrical conductivity(EC) levels. The mixed liquid culture was done pseudomonas P and saboraud dextrose medium. The isolated bacteria(IB) were inoculated by spray of 3.7ml at 1/2000a pot filled with different soil electrical conductivity level(2.9, 8.6, 11.5dS/m) every week, respectively, with mixed liquid culture (Pseudomonas P+Sabouraud dextrose) of eight strains. The plant height of red pepper with IBs treatment in different soil EC levels showed better growth than IBs nontreatment in the order of the 2.9>8.6>11.5 dS/m. The yield of pepper with IBs treatment in different soil EC level was higher in 13% than IBs nontreatment and chemical properties($P_2O_5$, K, Ca, Mg) of the soil after harvest in IBs treatment were slightly increased, while organic matter and EC of IBs treatment were slightly decreased than those of IBs nontreatment. Moisture content of the soil after the harvesting with IBs treatment was slightly increased than IBs nontreatment.
The entomopathogenic nematodes, Steinernema carpocapsae All strain (ScA), S.glaseri NC strain (SgN) and H. bacteriophora NC 1 strain (HbN), were evaluated for the effects on egg mass formation by the northern root-knot nematode, Meloidogyne hapla in pot experiment using tomato. In the first experiment, 2.5$\times$10$^{5}$ infective juveniles (Ijs) of entomopathogenic nematodes were inoculated to 100 g of the soil infected with ca. 450 Ijs of M. hapla/100 ㎤ in 150 $mell$ container. The number of egg mass was significantly decreased to 9.4-36.5 in ScA, to 5.7-24.7 in SgN and to 11.2-16.0 in HbN treatments compared with 62.5 in M.hapla alone. In the second experiment, ScA and S.carpocapsae Pocheon strain (ScP) and SgN and S.glaseri Dongrae strain (SgD) were treated to 350 g of the soil infected with 100, 200 M.hapla larvae/100 ㎤ in 450 $mell$ container The entomopathogenic nematodes were inoculated at the rate of 2,020 Ijs and 1.6$\times$105 Ijs in 350 g soil. The number of egg mass of M.hapla were significantly decreased in the entomopathogenic nematode treatments compared with M.hapla alone although no differences were observed among Steinernema species, strains, or infection concentrations. Treatments of entomopathogenic nematodes 3 days before M.hapla inoculation were more effective on reduction of egg mass formation than those of 3 days after M.hapla treatments. Growth of tomato was not affected by entomopathogenic nematode treatments.
Crown gall on lower stem of weeping fig(Ficus benjamina Roxb.) was first observed at Daejon in 2003. Tumors were about 15 cm in size and semi-round with rough surface texture of dark brown color. Two virulent isolates among ten bacteria isolated from the tumor tissues were characterized. Their colonies were convex, glistening, circular with an entire edge, and white or tannish cream in color on potato dextrose agar supplemented with 0.5% $CaCO_3$. They were rod shape with peritrichous flagellae, gram-negative, aerobic growth, oxidase-positive, and grew on D1M agar. The isolates were identified as Agrobacterium larrymoorei and A. tumefaciens based on biochemical and physiological characteristics, fatty acid profiles and substrate utilization patterns. Seedlings of some host plants excepting grapevine produced typical galls two to three weeks after inoculation with cell suspensions of the virulent strains. This is the first report on crown gall of weeping fig in Korea.
The mushroom species Cordyceps militaris has been studied and cultivated as a medicinal mushroom due to its multiple valuable biological and pharmaceutical activities. For breeding new strains of C. militaris, multiplex PCR assays were performed using primers specific for its mating type genes, MAT1-1 and MAT1-2. Mating types and mating status were confirmed, as evidenced by DNA bands at 233-bp and 191-bp for MAT1-1 and MAT1-2 respectively. The novel 'Dowonhongcho 2ho' was developed through mating; they were found to possess high-quality fruiting bodies when grown in artificial media. The stromata of the new strain were club-shaped, with a bright orange-red color, and measured 7.1 cm in length. They had an average cordycepin content of 0.33%. Compared to 'Dowonhongcho,' the new strain had a 7% higher yield, as well as firm fruiting bodies. The optimum temperature for mycelial growth was $20{\sim}25^{\circ}C$, and the optimum temperature for stroma development was $18{\sim}22^{\circ}C$. The fruiting bodies developed after 49.1 days from inoculation. The use of mating type molecular markers improved the breeding efficiency of the new strain 'Dowonhongcho 2ho.' Thus, they may be valuable for artificial cultivation and industrial-scale production of C. militaris with excellent characteristics.
Many plant-pathogenic bacteria are dependent on quorum sensing (QS) to evoke disease. In this study, the population of QS and quorum quenching (QQ) bacteria was analyzed in a consecutive monoculture system of Pseudostellaria heterophylla. The isolated QS strains were identified as Serratia marcescens with SwrIR-type QS system and exhibited a significant increase over the years of monoculture. Only one QQ strain was isolated from newly planted soil sample and was identified as Bacillus thuringiensis, which secreted lactonase to degrade QS signal molecules. Inoculation of S. marcescens to P. heterophylla root could rapidly cause wilt disease, which was alleviated by B. thuringiensis. Furthermore, the expression of lactonase encoded by the aiiA gene in S. marcescens resulted in reduction of its pathogenicity, implying that the toxic effect of S. marcescens on the seedlings was QS-regulated. Meanwhile, excess lactonase in S. marcescens led to reduction in antibacterial substances, exoenzymes, and swarming motility, which might contribute to pathogensis on the seedlings. Root exudates and root tuber extracts of P. heterophylla significantly promoted the growth of S. marcescens, whereas a slight increase of B. thuringiensis was observed in both samples. These results demonstrated that QS-regulated behaviors in S. marcescens mediated by root exudates played an important role in replanting diseases of P. heterophylla.
Kim, Dong-Wook;Chung, So-Young;Park, Ki-Moon;Choi, Chun-Un
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.21
no.1
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pp.120-126
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1989
Streptococcus diacetylactis and Leuconostoc cremoris were isolated from commercial culture and the effects of culture conditions on the diacetyl production by these strains and their mixture(1:1) were investigated. Optimum temperatures and culture times for the diacetyl production by Str. diacetylactis, Leu, cremoris and their mixture were 60hr at $22^{\circ}C$(diacetyl content, 2.24ppm), 48hr at $22^{\circ}C$(2.29ppm) and 48hr at $22^{\circ}C$ (2.21ppm), respectively Optimum initial pH for the diacetyl production by Str. diacetylactis, Leu. cremoris and the mixture were all 4.8(4.32, 6.66, 7.30ppm, respectively) and optimum sodium citrate concentrations(%, w/v) were 0.30(2.58ppm), 0.1(2.54ppm) and 0.1(2.52ppm), respectively. The diacetyl contents were gradually increased according as inoculation rates(%, w/v) were increased. The amounts of diacetyl produced under optimum conditions at 24hr incubation by Str. diacetylactis, Leu. cremoris and the mixture were 4.40, 6.59 and 7.25ppm, respectively. The most effective factor affecting diacetyl production under optimum condition was pH.
In order to establish in vitro infection model for research of plant pathogen based on tissue softening disease in napa cabbage, eighty independent bacterial strains were isolated from the softened napa cabbage tissues. Eight bacterial isolates were primarily screened with the generation of reproducible tissue softening disease to fresh napa cabbages within 24${\sim}$48 hours after inoculation. Through various microbiological biochemical and morphological examinations, three Gram (-) isolates which harbor independent biological properties were finally chosen, and named as RBI, RB2 and RB6. Collective results obtained from API 20E test and analyses of VITEK 2 COMPACT and nucleotide sequences of 165 rRNA of each isolate proposed that isolates RBI and RB2 are close to the Erwinia carotovora subsp. odorifera, and RB6 is close to the Erwinia carotovora subsp. carotovora. These isolates grew optimally at $30^{\circ}C$ with neutral pH culture condition. The isolates caused softening tissue disease with dose-dependent manner regardless of pre-surface damages of napa cabbage. Minimum dose to cause soft rot disease for RBI, RB2 or RB6 were $8.0{\times}10^8$ CFU/mt $10^9$ CFU/ml or $4.7{\times}10^6$ CFU/ml respectively. These isolates caused tissue softening disease to eggplant, paprika and napa cabbage out of 14 different tested vegetables, indicating that these isolates damages specific plant tissues. The bacterial isolates obtained in this research and in vitro plant infection model will be adapted in the understanding of the mechanism of pathogenesis by plant pathogen.
Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) have gained worldwide importance and acceptance due to their agricultural benefits. These microorganisms are potential tools for sustainable agriculture, with effects on plant growth, biofertilization, induced systemic resistance, and biocontrol of plant pathogens. In this study, four different Pantoea species were isolated from field soil, and their plant growth-promoting characteristics were studied. Based on 16S rDNA gene sequencing analyses, the se were grouped into Pantoea ananatis, Pantoea citrea, Pantoea dispersa, Pantoea vagans and named as Pa1, Pc1, Pd1, Pv1, respectively. All of these strains have their ability for solubilization of insoluble phosphate depending on pH decrease at the range around pH 5 at 1days after inoculation and production of plant hormone indole acetic acid (IAA) with 85.3±16.3 μg/ml of Pa1, 183.9±16.8 μg/ml of Pc1, 28.8±17.3 μg/ml of Pd1 and 114.1±16.5 μg/ml of Pv1, respectively. Pa1, Pc1 and Pd1 also have high activity for production of gibberellin (GA3) hormone with 331.1±19.2 μg/ml of Pa1, 288.5±16.8 μg/ml of Pc1, 309.2±18.2 μg/ml of Pd1, but Pv1 does not. Furthermore, all these species have significantly promoted the growth of the lettuce seedling plants at the range around 32~37% for fresh weight and 10~15% for shoot length enhancement, so that these microbe could be used as a potential bio-fertilizer agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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