• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제31권5호
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• pp.1215-1218
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• 2010

We demonstrate the possible application of the sandwich type surface-enhanced Raman scattering (SERS) immunoassay using antigen-antibody binding for detection of prostate-specific antigen (PSA) in cancer cells. In this sandwich type of SERS immunoassay, to capture antigens onto the immobilized layer of antibodies on the gold substrate we prepared the monolayer of gold nanoparticles on the APTMS-derivatized surface of a glass slide by using the SAM technique. This sandwich type of SERS immunoassay in which antigens on the substrate specifically capture antibodies on a Raman reporter (DSNB coated gold nanoparticles with R6G) could successfully detect PSA at low levels. A strong SERS spectrum of Raman reporter was observed only with a substrate in which PSA is present.

• 한국식품영양과학회지
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• 제30권4호
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• pp.600-604
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• 2001

감마선 조사된 새우의 신속한 판별을 위한 방법으로 갈색새우의 TPM을 항원으로 하여 개별적으로 생산된 M-IgG와 P-IgG를 이용한 Sandwich ELISA를 분석법으로 확립하였다. M-IgG를 항원 포획을 이한 coating 항체로 사용하고, P-IgG를 포획된 TPM에 대한 반응항체로 사용하였을 때, 12.5에서 50$\mu\textrm{g}$/mL의 농도 범위에서 TPM을 정량할 수 있었다. 감마선 조사된 새우의 TPM 농도는 선량에 의존하며 감소하였고, 감마선 조사와 가열 또는 냉동 등의 병용 처리에서도 선량에 의존하며 감소하였다. 이 결과는 면역분석기법의 하나인 Sandwich ELISA가 감마선 조사된 새우의 검지법으로 이용될 수 있다는 가능성을 나타내었다.

• KSBB Journal
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• 제22권6호
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• pp.426-432
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• 2007

QDs을 기반으로 하는 OsFIA는 매우 빠르고 간단히 수행될 수 있다. 또한 이 분석법은 고체상의 담체나 결합/잔류시약의 분리 등과 같은 여러 과정을 필요로 하지 않으며, 적은 양의 시약으로도 분석이 가능하다. 본 분석법은 높은 감도로 항원을 측정할 수 있으며, 일상적인 분석에도 쉽게 도입될 수 있을 것이다. 선형 범위 내에서 측정 가능한 receptor의 최소농도는 0.05 nM (2.65 ng/mL) 정도이다. 또한, 일반적으로 상용화된 항체를 가치고 수행이 가능하다. 이 OsFIA 분석법은 기존의 실험적 sandwich immunoassay의 효과적인 대안으로 제시된다.

• BMB Reports
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• 제34권1호
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• pp.47-50
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• 2001

A one-step, two-site enzyme immunoassay was developed for measuring human alpha-fetoprotein (AFP) in serum and amniotic fluid using monoclonal antibodies (McAb) by eliminating the high-dose hook effect. Three McAbs that recognize different epitopes were selected among 16 different clones on the basis of epitope mapping, two for immobilization and one for horseradish peroxidase conjugation. This one-step immunoassay system is more convenient and rapid compared to a conventional two-step sandwich immunoassay system. It did not exhibit the hook effect to around 2.7 mg/ml of AFP, which is probably one of the highest concentrations of AFP in the serum. The dose-response curve of the system was linear to 500 mg/ml of AFP and the system could differentiate as low as 1 mg/ml of AFP The intra- and inter-assay variations were in an acceptable range; 95~104% and 97~105% respectively Its correlation with other commercial systems was around 95%.

• BMB Reports
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• 제31권1호
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• pp.101-105
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• 1998

Immunoassay of botulinum toxin (BTX) B type was investigated using two typed of biosensors: light addressable potentiometric sensor (LAPS) and surface plasmon resonance (SPR) sensor. Urease-tagged and immuno-filtration capture method have been used for LAPS. Tag-free and direct binding real-time detection method have been used for SPR sensor. The detection limit of sandwich assay format with LAPS was 10 ng/ml, which was the lowest among methods tested. SPR has the advantage of being more convenient because tag-free direct binding assay can be used and reaction time was reduced, regardless of low sensitivity. This result shows that sandwich assay format with LAPS can be used as an alternative method of BTX mouse bioassay which is known as the most sensitive method for the detection of BTX.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제29권7호
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• pp.1297-1298
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• 2008

• 한국식품과학회지
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• 제41권1호
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• pp.111-115
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• 2009

Enzyme-linked fluorescent immunoassay(ELFA)를 이용하여 가공식품 중 땅콩을 분석하고, 그 결과가 표시내용과 일치하는지를 조사하였다. 땅콩으로부터 분리한 조단백질(CPP)을 토끼에게 면역하여 생산한 특이항체 및 horseradish peroxidase-항체 복합물을 이용하여 sandwich ELFA를 확립하였다. 특이항체의 교차반응은, CPP, 땅콩, 아몬드, 콩, 호도에 대하여 각각 100, 9.8, $1.1{\times}10^{-2},\;4.4{\times}10^{-3}$, 0%로 나타났다. 시료로는 비스킷, 스낵, 초콜릿 등 19점을 사용하였다. 이들의 분석결과, 7점의 시료에서 땅콩이 검출 되었으며, 이 중 땅콩의 함유가 표시된 제품은 5점이었고 그렇지 않은 제품은 2점이었다. 이들 2점 중 하나는 아몬드를 함유하고 있다고 표시된 비스킷으로 분석 상 미량($2.1{\times}10^{-3}%$)의 땅콩이 검출되었는데, 이는 교차반응 때문으로 추측된다. 나머지 1점은 대두의 함유가 표시된 스낵으로 분석 상 $9.8{\times}10^{-2}%$의 땅콩이 검출되었다. 이는 대두의 매우 낮은 교차반응율을 감안하면 제조공정상 땅콩의 교차오염 때문으로 추측된다. 이와 같이 ELFA에 의하여 가공식품 중 땅콩의 검출이 가능하였고, 현재 유통 되는 일부 가공식품 중 알레르겐의 표시를 정확히 할 필요가 있다고 생각한다.

• 한국가시화정보학회지
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• 제20권3호
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• pp.136-145
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• 2022

Later flow immunoassay (LFIA) is a protein analytical method based on immunoreaction. On the LFIA based protein analytical method, bioreceptor molecule plays a key role, and so a system that evaluates and manages the binding affinity of bioreceptor is needed to secure detection reliability. In this study, Lateral Flow Immunoassay based rapid Bioreceptor Screening Method (rBSM) is presented that provide a simple and quick evaluating method for the binding affinity to the target protein of the antibody as model bioreceptor. To verify this evaluation method, Virus-like particles (VLP) and anti-VLP antibodies are selected as a model norovirus, which is target protein, and the candidate bioreceptors respectively. Among the 5 different candidate antibodies, appropriate antibody could be sorted out within 30 minutes through rBSM. In addition, selected antibodies were applied to two representative LFIA based techniques, sandwich assay and competitive assay. Among these methods, sandwich assay showed more effective VLP detection method. Through applying selected antibodies and techniques to the commercialized mass production lines, an VLP detecting LFIA kit was developed with a detection limit of 10¹² copies/g of VLPs in real samples. Since this proposed method in this study could be easily transformable into other combinations with bioreceptors, it is expected that this technique would be applied to LFIA kit development system and bioreceptor quality management.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권8호
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• pp.1216-1221
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• 2006

A protein array was fabricated for a miniaturized immunoassay using microcontact printing ($\mu$CP). A polydimethylsiloxane (PDMS) stamp with a 5 $\mu$m$\times$5 /$\mu$m dimension was molded from a silicon master developed by photolithography. Under optimal fabrication conditions, including the baking, incubation, and exposure time, a silicon master was successfully fabricated with a definite aspect ratio. An antibody fragment was utilized as the ink for the $\mu$CP, and transferred to an Au substrate because of the Au-thiol (-SH) interaction. The immobilization and antibody-antigen interaction were investigated with fluorescence microscopy. When human serum albumin (HSA) was applied to the protein array fabricated with an antibody against HSA, the detection limit was 100 pg/ml of HSA when using a secondary antibody labeled with a fluorescence tag. The fabricated protein array maintained its activity for 14 days.

• 한국수산과학회지
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• 제33권1호
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• pp.55-59
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• 2000

무지개 송어의 뇌하수체 및 배양액에 존재하는 GTH II 농도를 측정하기 위해 Avidin- Biotin complex를 이용한 sandwich EIA 계을 개발했다. Protein A sepharose affinity chromatography을 통해서 얻어진 연어 GTH II의 rabbit IgG에 biotinylation시킨 것 (Biotin-salmon GTH II rabbit IgG)을 제2 항체로 사용하였고, Non-Biotin salmon GTH II rabbit IgG는 단지 protein A sepharose affinity chromatography에서 얻어진 IgG를 제 1 항체로 사용하였다. EIA는 sandwich법에 의해서 이루어졌으며, 효소반응 기질로는 TMB(3,3'5,5-tetramethylbenzidine)를 이용했으며, 반응후 450 nm의 흡광도에서 automatic microplate reader로 측정하였다. 그 결과, $0.12\;{\~}\;125\;ng/ml$의 범위에서 용량반응곡선을 얻었으며, 측정감도 (최소 검출량)는 거의 0.58 ng/ml 정도 였다. 그리고 뇌하수체 추출물 및 배양액 각각의 희석곡선은 GTH II 표존곡선과 일치 하였다. 또한 이러한 GTH II의 표준곡선는 뇌하수체내 다른 peptide hormone와는 교차반응을 거의 나타내지 않았다. Testosterone을 처리한 미성숙 무지개 송어의 뇌하수체 세포배양계를 이용하여 sGnRH에 의한 GTH II 분비량을 본 sandwich EIA계와 RIA계를 비교 조사한 결과, 거의 같은 분비량을 나타냈을 뿐만아니라 같은 분비 pattern을 나타냈다. 이러한 결과로부터 본 sandwich법 EIA계에 의해서 연어과 어류의 뇌하수체 추출물 및 뇌하수체 배양액 중의 GTH II 함량 및 분비량을 측정하는데 있어서 안정된 assay계라고 생각되어진다.