This study examined the effects of nicotinamide on proliferation, differentiation, and energy metabolism in a primary culture of bovine adipocytes. After treatment of cells with 100-500 $\mu{M}$ nicotinamide, cell growth was measured using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), and cellular lipid content was assessed by Oil Red O staining and a triglyceride (TG) assay. Several factors related to energy metabolism, namely adenosine triphosphatase (ATPase) activity, nitric oxide (NO) content, nitric oxide synthase (NOS) activity, the number of mitochondria and the relative expression of glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH), peroxisome proliferator-activated receptor-$\gamma$ ($PPAR_{\gamma}$) and inducible NOS (iNOS), were also investigated. Results showed that nicotinamide induced both proliferation and differentiation in bovine preadipocytes. Nicotinamide decreased NO production by inhibiting NOS activity and iNOS mRNA expression, and controlled lipolytic activity by increasing ATPase activity and the number of mitochondria. The present study provides further evidence of the effects of nicotinamide on lipid and energy metabolism, and suggests that nicotinamide may play an important role in the development of bovine adipose tissue in vivo. This emphasizes the importance of investigating bovine adipose tissue to improve our understanding of dairy cow physiology.
Objectives : The aim of the present study is to evaluate the effects Rehmannia glutinosa, Radix puerariae, Semen coicis, Fructus hordei, Cortex acanthopanacis, Fructus chaenomelis, or Radix glycyrrhizae extracton 3T3-L1 preadipocytes differentiation. Methods : We adopted Oil Red O staining methods to observe the formed lipid droplets. And the amount of lipids in adipocytes was measured using absorptiometric analysis. Results : The extracts of Rehmannia glutinosa, Radix puerariae, Semen coicis, Fructus hordei, Cortex acanthopanacis, Fructus chaenomelis, or Radix glycyrrhizae stimulated the preadipocytes differentiation and lipid droplet formation. And the complex extract of the traditional herbal medicines stimulated there actions more than single extracts. Conclusions : The extract of Rehmannia glutinosa, Radix puerariae, Semen coicis, Fructus hordei, Cortex acanthopanacis, Fructus chaenomelis, or Radix glycyrrhizae has stimulatory effects. on adipogenesis. Moreover, the complex extract of the traditional herbal medicines has more effect than single extracts.
Han, Min Ho;Kim, Hong Jae;Jeong, Jin-Woo;Park, Cheol;Kim, Byung Woo;Choi, Yung Hyun
Toxicological Research
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제34권1호
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pp.13-21
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2018
Anthocyanins are naturally occurring water-soluble polyphenolic pigments in plants that have been shown to protect against cardiovascular diseases, and certain cancers, as well as other chronic human disorders. However, the anti-obesity effects of anthocyanins are not fully understood. In this study, we investigated the effects of anthocyanins isolated from the fruit of Vitis coignetiae Pulliat on the adipogenesis of 3T3-L1 preadipocytes. Our data indicated that anthocyanins attenuated the terminal differentiation of 3T3-L1 preadipocytes, as confirmed by a decrease in the number of lipid droplets, lipid content, and triglyceride production. During this process, anthocyanins effectively enhanced the activation of the AMP-activated protein kinase (AMPK); however, this phenomenon was inhibited by the co-treatment of compound C, an inhibitor of AMPK. Anthocyanins also inhibited the expression of adipogenic transcription factors, including peroxisome proliferator-activated receptor-${\gamma}$, CCAAT/enhancer-binding protein a and b, and sterol regulatory element-binding protein-1c. In addition, anthocyanins were found to potently inhibit the expression of adipocyte-specific genes, including adipocyte fatty acid-binding protein, leptin, and fatty acid synthase. These results indicate that anthocyanins have potent anti-obesity effects due to the inhibition of adipocyte differentiation and adipogenesis, and thus may have applications as a potential source for an anti-obesity functional food agent.
Bojungchiseub-tang (BJCST) has been used in symptoms and signs of edema, dampness-phlegm, kidney failure, and so on. BJCST is also expected to have strong anti-obesity activities. However, little is known about the mechanisms of its inhibitory effects on adipocyte differentiation and adipogenesis. In the present study, we examined the effects and mechanism of BJCST on transcription factors and adipogenic genes of 3T3-L1 preadipocytes to understand its inhibitory effects on adipocyte differentiation and adipogenesis. Our results showed that BJCST significantly inhibited differentiation and adipogenesis of 3T3-L1 preadipocytes in a dose-dependent manner. To elucidate the mechanism of the effects of BJCST on lowering lipid content in 3T3-L1 adipocytes, we examined whether BJCST modulate the expressions of transcription factors to induce adipogenesis and adipogenic genes related to regulate accumulation of lipids. As a result, the expression of steroid regulatory element-binding protein (SREBP)1, cytidine-cytidine-adenosine-adenosine-thymidine (CCAAT)/enhancer binding proteins ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$), $C/EBP{\beta}$, $C/EBP{\delta}$, and peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) genes, which induce the adipose differentiation, liver X receptor $(LXR){\alpha}$ and fatty acid synthase (FAS) genes, which induce lipogenesis and adipose-specific aP2, Adipsin, lipoprotein lipase (LPL), CD36, TGF-${\beta}$, leptin and adiponectin genes, which compose fat formation were decreased. BJCST also reduced the expression of acyl CoA oxidase (ACO) and uncoupling protein (UCP) genes related to lipid oxidation. In conclusion, BJCST could regulate transcript factor related to induction of adipose differentiation and inhibited the accumulation of lipids and expression of adipogenic genes.
The purpose of this study was to investigate the quality of two different commercial Bangpungtongseong-san (BTS) extract granules (BTS-2 and BTS-3) by comparing with BTS decoction (BTS-1). The contents of characterizing components and biological activities of two different commercial BTS extract granules were compared with those of the BTS decoction. The contents of characterizing components were analyzed with HPLC. The antioxidative effects were determined by measuring 2,2-diphenyl-1-picrylhygrazyl (DPPH) radical scavenging and superoxide dismutase (SOD)-like activity. Also, we compared the effects on lipid accumulation and reactive oxygen species (ROS) production during differentiation of 3T3-L1 preadipocytes. The contents of five components except liquiritin and sennoside A were higher in BTS-1. The DPPH radical scavenging and SOD-like activity were higher in BTS-1. BTS-1 significantly inhibited lipid accumulation during differentiation of 3T3-L1 preadipocytes and showed stronger effects than BTS-2, BTS-3. In addition BTS-1 showed stronger inhibition effects on ROS production during differentiation of 3T3-L1 preadipocytes than BTS-2, BTS-3. These results indicate that BTS decoction has strong biological activities than commercial BTS extract granules. It is also consistent with the contents of characterizing components.
Background: Adipose tissues were initially introduced as energy storages, but recently they have become famous as an endocrine organ which produces and secretes various kinds of molecules to make physiologic and metabolic changes in human body. It has been studied that these molecules are secreted in abundance as the adipose tissue becomes bigger along with obesity. Furthermore, it has been found that they are mediating systemic inflammation and generation of metabolic diseases such as type 2 diabetes and atherosclerosis. On the basis of these, we studied previous papers which have been researched about the interaction between preadipocytes and macrophages, adipose tissues and lymph nodes, and adipose tissue secreting molecules. Results: Firstly, preadipocytes and macrophages are expressing similar transcriptomes and proteins, and preadipocytes can be converted to mature macrophages which have phagocytic activity. Moreover, the monocytes, which initially located in the bone marrow, are filtrated to the adipose tissue by monocyte chemotatic protein-1 and are matured to macrophages by colony stimulating factor-1. Secondly, adipose tissues and their associated lymph nodes are interacting each other in terms of energy efficiency. Lymph nodes promote lipolysis in adipose tissues, and polyunsaturated fatty acids in adipocytes become energy sources for dendritic cells. Lastly, adipose tissues produce and secrete proinflammatory molecules such as leptin, adiponectin, TNF-${\alpha}$, IL-6, and acute phase proteins, which induce the inflammation and potentially generate metabolic diseases. Conclusion: According to these, we can link adipose tissues to inflammation, but we need to affirm the actual levels and roles of adipose tissue-derived proinflammatory molecules in human body.
Kim, Eun-Joo;Kang, Min-jae;Seo, Yong Bae;Nam, Soo-Wan;Kim, Gun-Do
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권10호
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pp.1645-1653
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2018
The genus Acer contains several species with various bioactivities including antioxidant, antitumor and anti-inflammatory properties. However, Acer okamotoanum Nakai, one species within this genus has not been fully studied yet. Therefore, in this study, we investigated the anti-adipogenic activities of leaf extract from A. okamotoanum Nakai (LEAO) on 3T3-L1 preadipocytes. Adipogenesis is one of the cell differentiation processes, which converts preadipocytes into mature adipocytes. Nowadays, inhibition of adipogenesis is considered as an effective strategy in the field of anti-obesity research. In this study, we observed that LEAO decreased the accumulation of lipid droplets during adipogenesis and down-regulated the expression of key adipogenic transcription factors such as peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ (PPAR ${\gamma}$) and CCAAT/enhancer binding protein ${\alpha}$ (C/EBP ${\alpha}$). In addition, LEAO inactivated PI3K/Akt signaling and its downstream factors that promote adipogenesis by inducing the expression of PPAR ${\gamma}$. LEAO also activated ${\beta}$-catenin signaling, which prevents the adipogenic program by suppressing the expression of PPAR ${\gamma}$. Therefore, we found that treatment with LEAO is effective for attenuating adipogenesis in 3T3-L1 cells. Consequently, these findings suggest that LEAO has the potential to be used as a therapeutic agent for preventing obesity.
Adipocytes are the main constituent of adipose tissue. Understanding the molecular basis of adipogenesis is pivotal to finding the therapeutic targets for treatment of obesity. Melatonin is associated with obesity and its mechanism is currently under intensive investigation. The objective of this study was to investigate the effect of melatonin on adipogenesis in differentiating preadipocytes. 3T3-L1 preadipocytes were cultured in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) containing 5% calf serum at 37℃ with 5% CO2 in a humidified incubator. Differentiation was induced using DMEM with 10% fetal bovine serum supplemented with MDI two days after cell confluence (day 0). Cells were treated with 0, 10 and 100 μM melatonin on either day 0 or day 5. 72 hours after each treatment, lipid accumulation was measured by oil red O staining. Proteins were resolved by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and transferred to membranes. As a result, lipid accumulation decreased with melatonin treatment. ERK pathway, activated when differentiation is induced, also decreased with an increase in melatonin concentration. Furthermore, the expression of key adipogenic factors, C/EBPα, C/EBPβ, and PPARγ, were reduced by melatonin treatment. These results imply that melatonin may inhibit the process of adipogenesis and may have a role as a new anti-obesity agent.
Adipocytes are differentiated from preadipocytes and have large capacity for storing fats inside cells. In cattle, intramuscular fat (IMF) content is one of the major determinants for meat quality and also highly affects market prices, especially in Japan and Korea. In order to profiling differentially expressed genes between intramuscular fibroblast-like cells (preadipocytes) and their differentiated adipocytes, we have established intramuscular fibroblast-like cells from M. longissimus thoracis in Korean cattle (Hanwoo). The differentially expressed genes were selected by comparing these two types of cells ug thecommercially available 23kese two types of cells ug theco. The results indan ced that 206 arecomelements were differentially expressed. Of these, 67 and 94 ks wn genes were up and d wn regulaced, respectively, in adipocytes ug ng both 2-fold difference and Welch's t-test as the cut-off points. The differentially expressed genes identified in this study can be used as good markers for improving meat quality traits with further verification of their biological functions, especially IMF contents in cattle.
Adipocytes affect obesity through the regulation of lipid metabolism. Physical loading is an important regulator of fat tissue. There are ongoing in vitro studies inducing mechanotransduction on 3T3-L1 preadipocytes with mechanical stimulus in order to treat obesity by inhibiting adipogenesis and provoking cell death. In this study, our goal was to suggest a new therapy for obesity by investigating whether fluid shear stress (FSS) changes transcription factors on 3T3-L1 related with adipogenesis and cell death. FSS loading was applied to 3T3-L1 preadipocytes at 1Pa and 1Hz. After loading, bright field images were taken and an immunofluorescence assay was conducted to observe actin stress fiber formation. Western blot analysis was conducted to identify the activation of the ERK pathway as well as the adipogenic factors, which including C/EBPs and $PPAR{\gamma}$. The expression of osteopontin, a protein related to inflammation in adipose tissue, and cell death related factors, Bax, Bcl-2, and Beclin, were also measured. Results showed that FSS stimulated the formation of actin stress fibers in 3T3-L1 and also that the activation of C/EBPs decreased significantly when compared with the control group. $PPAR{\gamma}$ activation in the 2 hour FSS group was lower than the 1 hour FSS group, which implied that the results were time dependent. Additionally, there were no differences in the expression of cell death factors after FSS loading. In summary, similar to other fibroblasts, the formation of actin stress fibers induced by mechanotransduction may affect the differentiation of 3T3-L1, leading to inhibition of adipogenesis and inflammation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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