The current study was undertaken to determine the effect of various conjugated linoleic acid (CLA) isomers on differentiation of pig preadipocyte during culture. Preadipocyte(stroma-vascular cell) was isolated from the backfat of newborn pigs and cultured to differentiate into mature fat cell. Different doses of CLA isomers were treated to the culture media at different times. Cell differentiation was determined by measuring the glycerol3-phosphate dehydrogenase activity of the cultured preadipocytes. Twenty and fifty $\mu$M of trans110_cis 12 isomer of CLA inhibited differentiation of pig preadipocyte whereas cis9-cis II isomer stimulated the differentiation. Both cis9-transII and trans9-trans11 isomers showed no effect. Effect of CLA isomer was more evident at the early stage of culture(day 0-8), than the late stage(day 8-14). These results suggest that each CLA isomer has different effect on pig preadipocyte differentiation.
Adipocyte differentiation is strongly associated with obesity, which causes metabolic disorders. In this study, we investigated the inhibitory effects of widdrol on 3T3-L1 preadipocyte growth and differentiation. Widdrol decreased lipid droplet accumulation and down-regulated adipogenic transcription factors such as C/$EBP{\alpha}$, C/$EBP{\beta}$, and $PPAR{\gamma}$. Widdrol blocked preadipocyte proliferation and differentiation through the inhibition of mitotic clonal expansion, which was accompanied by the failure of degradation of p21, a cyclin-dependent kinase inhibitor. Cell-cycle analysis clearly indicated that widdrol actively induces cell-cycle arrest at the G1-S phage transition, causing cells to remain in the preadipocyte state. Moreover, widdrol increased p21 expression and inhibited Rb phosphorylation in preadipocyte incubated in a hormone medium. Therefore, these findings clearly suggest that widdrol blocks preadipocyte growth and differentiation through the inhibition of mitotic clonal expansion by p21-and Rb-dependent G1 arrest and can be developed as a potent anti-adipogenic agent for reducing obesity.
Objective: This study was proceeded to determine to what extent the decoction recipes and distillation recipes extracted from the infusion of the apricot seed and other herbs respectively would produce an effect on the proliferation and the differentiation of Preadipocyte 3T3-L1 Model separated from C57BL/6 mouse. Method: Preadipocyte 3T3-L1 Model was formed from the fat tissue of the epididymis organ, which was removed from 4-week-old C57BL/6 mouse and then was treated with collagenase. Results: 1. Concerning the restraint effect of proliferation on Preadipocyte 3T3-L1 Model, the decoction recipes, in the state of low consistency, were proved to be more effective than the distillation recipes. 2. Concerning the restraint effect of differentiation on Preadipocyte 3T3-L1 Model, the decoction recipes were shown to be more effective.
The development of marbling in cattle is closely associated with an increase in adipocyte size and number within muscle. The adipose precursor cells have the capacity to differentiate into adipocytes within the muscle during the formation of marbling. In this studies, we established the cell culture system for differentiation of intramuscular preadipocyte isolated from the sirloin of Hanwoo aged 12 months. The intramuscular preadipocyte cells exhibited a fibroblastic appearance and differentiated into adipocytes by treating confluent cells with differentiation medium containing insulin, dexamethasone, and troglitazone. When intramuscular preadipocyte cells were differentiated at 18 day, the triglyceride concentration was higher than control cells. Moreover, the thiazolidinedione treatment increased adipogenesis. RT-PCR analysis confirmed the significant expression of PPARγ mRNA during adipocyte differentiation. In conclution, our culture system used in this study allowed intramuscular preadipocyte cells to differentiated into adipocytes and intramuscular preadipocyte cells may be useful in the further study of differentiation mechanism of adipocytes in Hanwoo.
Seok-Yeong Yu;Youngmin Choi;Young-In Kwon;Ok-Hwan Lee;Young-Cheul Kim
Journal of Food and Nutrition Research
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v.9
no.3
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pp.163-169
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2021
Decreased adipocyte fatty acid oxidation (FAO) and impaired preadipocyte differentiation characterize hypertrophic expansion of adipose tissue (AT) from obese and insulin resistant humans and are recognized as potential mechanisms for obesity-mediated dyslipidemia. Supplementation of formononetin (FMN), one of the principal isoflavones extracted from red clover or Huangqi (Astragalus roots), has been shown to have beneficial effects on obesity-related hyperlipidemia, a well-established cardiovascular risk factor. However, a target tissue and underlying mechanism(s) through which FMN acts have been under-investigated. Thus, we investigated whether FMN promotes adipocyte FAO and preadipocyte differentiation using 3T3-L1 preadipocytes to provide potential mechanisms of FMN action. We further extended this to the culture of 10T1/2 mesenchymal stem cells (MSCs) as well as mouse AT explants to reflect in vivo effects of FMN. In fully differentiated 3T3-L1 adipocytes, FMN-treatment significantly increased the expression levels of FAO-related proteins such as pAMPK, pACC, and CPT1, all of which were consistently upregulated in AT explant cultures treated with 10 μM FMN. In addition, FMN significantly enhanced the degree of differentiation of both 3T3-L1 preadipocytes and 10T1/2 MSCs into adipocytes as evidenced by Oil Red O staining of cellular lipids. This observation correlated with increased expression levels of key adipogenic transcription factors (PPARγ and C/EBPα) and their down-stream target proteins (FABP4, Glut4 and adiponectin). Moreover, FMN failed to exert its stimulatory effects on preadipocyte differentiation in both cell types in the presence of a PPARγ antagonist, suggesting a PPARγ-dependent effect of FMN. Collectively, these data provide possible mechanisms of action of FMN on lipid metabolism and further support the favorable in vivo effects of FMN in diet and obesity-induced dyslipidemia.
Joseph F., dela Cruz;Kevin Wayne Martinez, Pacunla;Seong Gu, Hwang
Journal of Animal Science and Technology
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v.64
no.6
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pp.1173-1183
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2022
Adipogenesis is a complex process comprising commitment and a differentiation stages. Through research, many different transcriptional factors were found to mediate preadipocyte commitment and differentiation. Lysine has a potential of regulating the commitment and differentiation of preadipocytes. In the present study, intramuscular stromal vascular cells (SVC) isolated from Hanwoo beef cattle were used to elucidate the effects of low lysine level on adipogenesis. SVC were isolated and incubated with various concentrations of lysine (0, 37.5, 75, 150 and 300 µg/mL). No significant difference were observed in the proliferation of SVC after 24 and 48 h of incubation with different concentration of lysine. On preadipocyte determination, reducing the level of lysine significantly increased the expression of preadipocyte commitment gene Zinc finger protein 423 and Preadipocyte factor-1. Upon differentiation, Oil Red O staining revealed that lipid accumulation and triglyceride content significantly increased with the decreasing lysine levels in the media. Expression levels of peroxisome proliferator-activated receptor-γ, CCAAT enhancer binding protein-α, sterol regulatory element binding protein-1c, Fatty Acid Binding Protein 4 and stearoyl CoA desaturase were upregulated by the decreased level of lysine. These data suggest the potential mechanism of action for the improved preadipocyte commitment and adipocyte differentiation in bovine intramuscular SVC upon treatment with low levels of lysine. These findings may be valuable in developing feed rations that promote deposition of intramuscular fat in beef cattle through lysine level modification.
Park, Jeongho;Park, Jihyun;Nahm, Sang-Soep;Choi, Inho;Kim, Jihoe
BMB Reports
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v.46
no.12
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pp.582-587
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2013
Adipocyte differentiation is a complex developmental process forming adipocytes from various precursor cells. The murine 3T3-L1 preadipocyte cell line has been most frequently used in the studies of adipocyte differentiation. Differentiation of 3T3-L1 preadipocytes includes a medium containing fetal bovine serum (FBS) with hormonal induction. In this study, we observed that differentiation medium containing adult bovine serum (ABS) instead of FBS did not support differentiation of preadipocytes. Impaired adipocyte differentiation was due to the presence of a serum protein factor in ABS that suppresses differentiation of preadipocytes. Using a proteomic analysis, alpha-2-macroglobulin and paraoxonase/arylesterase 1, which were previously shown to suppress differentiation of preadipocytes, were identified as anti-adipogenic proteins. Although their functional mechanisms have not yet been elucidated, the anti-adipogenic effects of these proteins are discussed.
Objective: The purpose of this study is to investigate the effects of Ganoderma lucidum herba pharmacopuncture(GHP) on the adipogenesis in 3T3-L1 preadipocytes. Methods: 3T3- L1 preadipocytes were differentiated with adipogenic reagents by incubating for 2 days in the absence or presence of GHP ranging from 1 and 2%. The effect of GHP on cell proliferation of 3T3-L1 preadipocytes was investigated using MTT assay. The effect of GHP on adipogenesis was examined by Oil red O staining and measuring glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH) and intracellular triglyceride (TG) content. Results: Following results were obtained from the preadipocyte proliferation and adipocyte differentiation of 3T3-L1. We observed no effect of GHP on preadipocyte proliferation. GHP inhibited adipogenesis, the activity of GPDH and accumulation of intracellular TG content. Conclusions: These results suggest that GHP inhibit differentiation of preadipocyte.
The biological activity of tissue specific stem cell is under the control of their specific microenvironment and the exogenous chemicals derived from digestive tract can be one of the constructing factors of that. It is suggested that the extract of brown algae Ishige okamurae has antioxidant-, apoptosis induction-, and antiinflammatory-effects. On the other hand, a few studies have shown that antioxidant assist inhibition of accumulation of fat. So we studied the effect of the extract of I. okamura on the cellular activity and differentiation of 3T3-L1 preadipocyte to adipose cell. The viability of cell was analyzed using 3-[4,5-dimethylthiazo-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay. Adipogenesis of 3T3-L1 cell was analyzed after induction in the induction medium containing the I. okamurae extract. The cellular activity was high compared with the vehicle and 0.05 mM caffeine in all groups of I. okamurae extract treated cells. The extract of I. okamura inhibited accumulation of lipids in 10 and $50{\mu}g/ml$. The expression of the marker genes for adipocyte differentiation coincided with cytochemical results. These results suggest that the extract of I. okamurae increases the cellular viability of adipose precursor cells. On the other hand, it suppresses the differentiation of preadipocyte to adipocyte and accumulation of lipids in concentration-dependent manners. It may be possible that the major component of the extract can be applied in the control of adipose tissuegenesis.
The experiment was conducted to study the effects of water soluble vitamins and retinoic acid on the differentiation of preadipocyte from omental, subcutaneous, intermuscular and intramuscular adipose tissue of Hanwoo. Differentiation was assessed by the change in enzyme activity, glycerol-3 phosphate dehydrogenase in serum free cell culture system. Preadipocytes treated with biotin ($10{\mu}M$) and pantothenic acid ($100{\mu}M$) were significantly (p<0.05) less differentiated than those from the control in all adipose tissue depots except intramuscular tissue. Although there was no significance, vitamin C was shown to stimulate the adipocyte conversion in omental and subcutaneous, but not in intermuscular and intramuscular adipose tissues. Lower values of GPDH activity in intermuscular preadipocyte were interpreted to be caused by relatively higher amounts of protein. In this experiment vitamin C did not stimulate fat deposition in intramuscular adipose tissue but further experiments are needed on the role of vitamin C in preadipocyte differentiation. When treated with different levels of retinoic acids, differentiation of preadipocytes was significantly (p<0.05) reduced from the level of $0.5{\mu}g/ml$ in omental and intermuscular, from $50{\mu}g/ml$ in subcutaneous, and in intramuscular at $500{\mu}g/ml$, thus showing that intramuscular preadipocytes were least responsive to retinoic acid in differentiation. All-trans retinoic acid appeared to inhibit the differentiation in a dose dependent manner, regardless of adipose tissues type.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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