Pseudomonas syringae pv. tabaci(Pa45) Tox$^{-}$ cells were infected with phage Ps90 strain isolated form the natural source, and the Ps90 lysogenized bacterial cells were then obtained. The lyxohenized cells produced tabtoxin and the phage induction occured when the cells treated with mitomycin C. The Southren hybridization alnalysis of the four EcoRI-treated plasmid fragments and the EcoRI-digested genomic DNA of Tox$^{+}$ and Tox$^{-}$ strains using phage DNA as a probe showed that only those DNA fragment of Tox$^{+}$ strain were related to the Ps90 phage DNA. Based on these results, the tabtoxin producing DNA fragments of the bacteris are presumed to have originated from the same phage DNA, and to be responsible for the pathogenecity of the bactrial strains.
A temperate phage was isolated from emetic Bacillus cereus NCTC 11143 by mitomycin C and characterized by transmission electron microscopy and DNA and protein analyses. Whole genome sequencing of Bacillus phage 11143 was performed by GS-FLX. The phage has a dsDNA genome of 39,077 bp and a 35% G+C content. Bioinformatic analysis of the phage genome revealed 49 putative ORFs involved in replication, morphogenesis, DNA packaging, lysogeny, and host lysis. Bacillus phage 11143 could be classified as a member of the Siphoviridae family by morphology and genome structure. Genomic comparisons at the DNA and protein levels revealed homologous genetic modules with patterns and morphogenesis proteins similar to those of other Bacillus phages. Thus, Bacillus phages might have a mosaic genetic relationship.
Bacteriophages (phages) are known determinants of kimchi microbial ecology. Lactobacillus plantarum is related to kimchi over-acidification during the late stages of kimchi fermentation. A phage infecting Lac. plantarum was isolated from kimchi and characterized. The phage population for kimchi in a market was 2.3 log particles/mL, which corresponded to 32% of the bacterial population on a log scale. The isolated phage was designated as ΦLP12116. ΦLP12116 which belonged to the Siphoviridae family and has a very narrow host range, infecting only Lac. plantarum. The phage was stable at a lactic acid concentration of 1.0% and pH 4.0 at 4℃, indicating that it could survive in kimchi. In the kimchi extract broth treated by the phage, the growth of Lac. plantarum KCCM 12116 was inhibited by 2.2 log CFU/mL compared to the growth in non-phage-treated broth. Therefore, this study suggests that the growth of Lac. plantarum, which is known as an acid-producing strain during late fermentation in kimchi, may be controlled using the phage.
본 실험의 결과를 요약해 보면 인산염의 종류와 농도에 따라서 유산균의 증식과 phage 감염후의 유산균 증식에 미치는 영향을 검토하였다. 특히, phage 증식억제를 나타내는 물질은 sodium metaphosphate, sodium pyrophosphate, sodium phosphate (dibasic), potassium phosphate(dibasic)으로써 각각 0.2∼0.4%, 0.1∼0.2%, 0.2∼0.3%, 0.2∼0.35%에서 phage 감염 후 유산균의 증식을 가능하게 하였다. 그리고 phage 감염 후에도 증식한 유산균 배양액을 새로운 배지에 1,2차 계대 하였을 때, 역시 인산염의 종류와 농도에 따라 배양액에 존재하는 phage에 의해 유산균의 증식에 큰 영향을 미쳤다. 특히 sodium pyrophosphate의 경우, 0.17%이상에서는 1차 계대 후에도 phage의 증식이 억제되어 유산균이 증식하기 때문에 starter 배양액용 P.R.M제조에 이용이 가능한 것으로 보여 진다.
발효유 starter로서 사용하고 있는 유산간균 L. casei YIT 9018을 NTG로 처리하여 4종류의 phage(J$_1$, Tk93, PD5, $K_1$)에 대하여 저항성을 나타내는 8 개의 돌연변이균주(PR5, PR6, PR35, PR38, PR46, PR47, PR48)를 분리하여, 산생성력, 생육, 당발효성, 내균성을 시험하였다. Phage저항균주 8개중에서 특히 PR38은 4 종류의 phage에 대하여 4 개월동안 저항성을 유지하였고, 생육속도, 산생성력 등에 있어서 parent strain과 비교할때, 유의적인 차이가 없었고 (P>0.01), 인공위액에서의 내균성은 parent strain보다 약한 것으로 나타났다. 당발효성에 있어서는 양자 사이에 차이가 없었다. 본 실험에서 분리한 PR38은 발효유제조시에 phage가 감염되면, Parent strain 대용으로 사용할 수 있는 가능성이 제시되었다.
Forty-five Salmonella typhimurium isolates were encountered 8 phage types in which DT197 and U302 were the predominant types. The DT104 type which was first found from pig in Korea, and was resistant to chloramphenicol, streptomycin, sulfamethoxazole/trimethoprim, tetracycline, gentamicin and nalidixic acid. Twenty-two S enteritidis isolates were encountered 5 phage types in which PT4 were the representative (predominant). S enteritidis isolates were susceptible to all antimicrobial agents. As a result of PFGE analysis for S typhimurium and S enteritidis, PFGE patterns was better than phage typing in discriminating of strains. PFGE patterns were not in accord with phage type even though some strain had the same phage types.
Chlorine was used for inactivation of bacteriophage f2 at pH 5.5, 7.5, and 10.0 at $10^{\circ}C$. The inactivation rate phage with chlorine varied depending on the pH value and reaction time. Hypochlorous acid appeared to be the major species of free chlorine for the inactivation. Suevival of the phage treated with chlorine and infectivity of the RNA extracted from the chlorinated phage were examined. The RNA extracted from untreatd phage was chlorinated and its infectivity was assayed. All three samples showed similar rates of inactivation at pH 5.5 and 7.5, but the naked RNA was more susceptible to chlorine at pH 10.0. The rate of inactivation was compared naked RNA was more susceptible to chlorine at pH 10.0. The rate of inactivation was compared with specific and non-specific attachment of the phasge f2. The specific attachment of the phage increased after the phage had been inactivated by extended chlorination. Chlorine may penetrate to the becteriophage f2 by altering the structural integrity of the protein coat, but the main target of free chlorine for inactivation of the phage appeared to be the phage RNA.
Temperate phages have been suggested to carry virulence factors and other lysogenic conversion genes that play important roles in pathogenicity. In this study, phage TEM123 in wild-type Staphylococcus aureus from food sources was analyzed with respect to its morphology, genome sequence, and antibiotic resistance conversion ability. Phage TEM123 from a mitomycin C-induced lysate of S. aureus was isolated from foods. Morphological analysis under a transmission electron microscope revealed that it belonged to the family Siphoviridae. The genome of phage TEM123 consisted of a double-stranded DNA of 43,786 bp with a G+C content of 34.06%. A bioinformatics analysis of the phage genome identified 43 putative open reading frames (ORFs). ORF1 encoded a protein that was nearly identical to the metallo-β-lactamase enzymes that degrade β-lactam antibiotics. After transduction to S. aureus with phage TEM123, the metallo-β-lactamase gene was confirmed in the transductant by PCR and sequencing analyses. In a β-lactam antibiotic susceptibility test, the transductant was more highly resistant to β-lactam antibiotics than S. aureus S133. Phage TEM123 might play a role in the transfer of β-lactam antibiotic resistance determinants in S. aureus. Therefore, we suggest that the prophage of S. aureus with its exotoxin is a risk factor for food safety in the food chain through lateral gene transfer.
In order to study effect of the phage ${\phi}$ FSV on the growth of lactic acid bacteria, Lactobacillus casei YIT 9018(wild type strain with prophage) or L. casei HYM 1213 (prophage cured strain) was infected with various concentrations of phage ${\phi}$ FSV (called Lac S21) or wild type virulent phage (called Lac J-1). When L. casei YIT 9018 was infected with Lac S21 under the concentration of $6.0{\times}10^6$ pfu/ml, the growth and lactic acid production of the strain were normal and the number of phages decreased. But L. casei HYM 1213 was susceptible to Lac S21. Regardless of the concentration of the phage infection, the number of phages increased rapidly into $10^9$ to $10^{10}$ pfu/ml at 2 day cultures and was maintained $10^7$ to $10^9$pfu/ml phage until 6 day cultures. The lactic acid production of L. casei HYM 1213 infected with Lac S21 was abnormal. Therefore, phage ${\phi}$ FSV had an evil effect on growth of L. casei HYM 1213, but not L. casei YIT 9018. On the other hand Lac J-1 caused abnormal fermentation to either L. casei YIT 9018 or L. casei HYM 1213.
Kim, Gyeong-Hwuii;Kim, Jae-Won;Kim, Jaegon;Chae, Jong Pyo;Lee, Jin-Sun;Yoon, Sung-Sik
한국축산식품학회지
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제40권5호
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pp.746-757
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2020
Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) is the major pathogenic E. coli that causes diarrhea and edema in post-weaning piglets. In this study, we describe the morphology and characteristics of ØCJ19, a bacteriophage that infects ETEC, and performed genetic analysis. Phage ØCJ19 belongs to the family Myoviridae. One-step growth curve showed a latent phase of 5 min and burst size of approximately 20 phage particles/infected cell. Phage infectivity was stable for 2 h between 4℃ and 55℃, and the phage was stable between pH 3 and 11. Genetic analysis revealed that phage ØCJ19 has a total of 49,567 bases and 79 open reading frames (ORFs). The full genomic sequence of phage ØCJ19 showed the most similarity to an Escherichia phage, vB_EcoS_ESCO41. There were no genes encoding lysogeny, toxins, virulence factors, or antibiotic resistance in this phage, suggesting that this phage can be used safely as a biological agent to control ETEC. Comparative genomic analysis in terms of the tail fiber proteins could provide genetic insight into host recognition and the relationship with other coliphages. These results showed the possibility to improve food safety by applying phage ØCJ19 to foods of animal origin contaminated with ETEC and suggests that it could be the basis for establishing a safety management system in the animal husbandry.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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