• Reproductive and Developmental Biology
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• 제42권1호
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• pp.1-6
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• 2018

In this study, we analyzed signal transduction by equine follicle-stimulating hormone receptor (eFSHR) on sti- mulation with recombinant $eelFSH{\beta}/{\alpha}$ ($rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$), natural porcine FSH (pFSH), and natural human FSH (hFSH). cAMP stimulation in CHO-K1 cells expressing eFSHR was determined upon exposure to different doses (0-1450 ng/mL) of these hormones. The $EC_{50}$ value of $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ was 53.35 ng/mL. The Rmax values of $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ and pFSH were 28.12 and 2.88 ng/mL, respectively. The activity of $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ was much higher than that of natural pFSH. However, signal transduction in CHO PathHunter Parental cells expressing eFSHR was not enhanced by stimulation with natural hFSH. Thus, $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ was completely active in cells expressing eFSHR. However, natural hFSH did not invoke a signal response in cells expressing eFSHR. Particularly, natural pFSH was weakly active in the same cells. These results showed that $eelFSH{\beta}/{\alpha}$ has potent activity in cells expressing eFSHR. Thus, $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ may efficiently bind to eFSHR, where as natural hFSH does not bind to eFSHR.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제16권2호
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• pp.119-130
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• 1989

본 연구는 생식주기중 폐쇄여포액내에서 생물학적， 면역학적 특성을 나타내는 GTH 의 변화를 조사하고 steroid hormone과의 상관관계를 조사하며 국부조절인자로서 의 GTH의 역 활을 조사하고자 하였다. 가임기간중 215개의 여포와 IVF과정에서 185개의 여포를 얻어 여포액내 GTH의 생물학적 또는 면역학적 활성을 측정하였다. Bioactive LH(bLH)는 생쥐의 Leydig cell-testosterone production assay, bFSH는 흰쥐의 Sertoli cell aromatase assay로 측정 하였 다. Immunological GTH(iLH , iFSH) 는 MaiaClone RIA , Delfia kits를 사용하였다. 여포액내 iLH, iFSH , ihCG 는 hyperstimulation에 의해 형성된 여포의 크기와는 무관하였다. 또 hMG, huFSH 의 처리와도 상관성이 없었다. T의 농도가 높은 여포액내의 iFSH는 현저히 낮았으며 E, P 가 고농도인 여포의 ihCG 양은 현저히 낮았다. 과배란이 유도된 난소의 여포액내 iLH는 LH specific RIA로 측정시 3mIU/ml 이하이었다. 생식주기중 여포액내 bLH, bFSH는 배란기에 현저히 증가 하였다. 혈청내 GTH B/I ratio는 엘정한 반면 여포액내 LH，FSH의 생물학적， 면역학적 활성은 미수정란을 가지거나 폐쇄된 여포내의 활성보다 현저하게 높았다. 위의 결과로 보아 여포액내 생식소자극호르온은 면역학적활성보다 높은 생물학적 활성을 가지며， 생리적 현상의 지표가 된다고 추론된다. 또한 steroid, bGTH는 여포의 선택， 폐쇄를 구분하는 지표로 사용가능하며， 여포가 폐쇄될때 여포액내 B/I ratio가 현저히 낮아지는 것으로 보아 GTH의 활성이 감소되는 것으로 판단된다.

• 한국수정란이식학회:학술대회논문집
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• 한국수정란이식학회 2006년도 The 6th Intermational Symposium on Developmental Biotechnology
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• pp.110-110
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• 2006

• 한국수정란이식학회지
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• 제19권2호
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• pp.81-87
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• 2004

본 연구는 재래산양에 있어서 과배란 처리시 공란 산양의 반복사용에 따른 oocyte의 회수방법과 회수란의 질적 개선방법을 확립하기 위하여 실시하였으며, 성선자극호르몬의 1회 처리와 반복처리, 호르몬제의 종류에 따른 oocyte의 회수율과 등급을 조사하였다. 공시동물은 체중 15~25kg 전${\cdot}$후의 성숙한 미경산 재래산양으로서 발정 동기화를 위하여 CIDR를 10일간 질내에 삽입하고 과배란 처리는 70 mg의 FSH 와 1,000 IU의 PMSG를 투여하여 과배란을 유기하였다. ${PGF_{2\alpha}$ 는 8일째에 투여하여 과배란을 유기하였으며, CIDR는 10일째 제거와 동시에 hCG 400 IU를 투여하였다. 난자의 회수는 hCG 투여 후 35~40시간째에 외과적인 방법으로 실시하였으며, 회수한 난자는 난구세포와 세포질의 부착정도에 따라 4등급으로 분류하여 회수율을 조사하였다. FSH와 PMSG를 투여하여 공란 산양으로 처음 사용하였을 때 49두에서 324(6.63${\pm}$0.63) 개와 27두에서 305(11.30${\pm}$1.29)개의 배란점을 확인하였으며, 이 중 43.8%(142/324)와 69.2%(211/305)가 회수되어 두당 회수율은 2.92${\pm}$0.52 개와 7.81${\pm}$1.14개로서 FSH와 PMSG간에 전체 회수율과 두당 회수율은 PMSG 처리구가 유의적(P<0.05)으로 높았다. 반복 사용하였을 때 FSH와 PMSG 처리구의 두당 배란수는 2.88${\pm}$0.69 개와 7.56${\pm}$1.11 개였으며, 회수율은 각각 17.4%(4/23) 및 44.9%(61/136) 로 PMSG 처리구가 유의적(P<0.05)으로 높았다. 두당 회수율은 0.50${\pm}$0.27개 및 3.39${\pm}$0.86개로서 PMSG 처리구가 유의적으로 높았다. 회수한 난포란의 1 및 2등급에 있어서 공란 산양으로 처음 사용하였을 때 FSH 투여구는 각각 20.6%(GI) 및 14.9%(GII)였으며, PMSG 투여구는 12.9%(GI) 및 14.1%(GII)로 나타났다. 반복 사용하였을 때, 회수한 난포란의 등급은 FSH 투여구는 각각 31.3%(GI) 및 28.1%(GII)였으며, PMSG 투여구는 36.4%(GI), 5.1%(GII)로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 배란된 난자의 회수율은 PMSG 가 FSH보다 높았으며, 난포내 난자의 회수율은 투여 호르몬 및 반복사용 여부에 따른 차이는 없었다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제19권1호
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• pp.11-17
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• 2015

This study investigated possible involvement of photoperiodic regulation in reproductive endocrine system of female olive flounder. To investigate the influence on brain-pituitary axis in endocrine system by regulating photoperiod, compared expression level of Kisspeptin and sbGnRH mRNA in brain and FSH-${\beta}$, LH-${\beta}$ and GH mRNA in pituitary before and after spawning. Photoperiod was treated natural photoperiod and long photoperiod (15L:9D) conditions from Aug. 2013 to Jun. 2014. Continuous long photoperiod treatment from Aug. (post-spawning phase) was inhibited gonadal development of female olive flounder. In natural photoperiod group, the Kiss2 expression level a significant declined in Mar. (spawning period). And also, FSH-${\beta}$, LH-${\beta}$ and GH mRNA expression levels were increasing at this period. However, in long photoperiod group, hypothalamic Kiss2, FSH-${\beta}$, LH-${\beta}$ and GH mRNA expression levels did not show any significant fluctuation. These results suggest that expression of hypothalamic Kiss2, GtH and GH in the pituitary would change in response to photoperiod and their possible involvement of photoperiodic regulation in reproductive endocrine system of the BPG axis.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제33권3호
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• pp.149-157
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• 2006

목 적: 본 연구는 인공 수정 시술에 있어서 정상 배란주기의 여성에서 clomiphene citrate와 GnRH antagonist를 병합하여 임선을 시도한 방법을 기존의 clomiphene citrate 단독으로 사용한 방법과 비교하여 그 임상적 유용성을 알아보고자 하였다. 연구방법: 116명의 환자들 중 43명에게는 자연 배란주기를 이용하여 인공 수정 시술을 시행하였고, 38명과 35명에게 각각 clomiphene citrate 단독 요법과 clomiphene citrate와 GnRH antagonist 병합 요법으로 인공 수정 시술을 시행하여 그 임상 결과를 비교 분석하였다. 결 과: 각각의 군에서 기저 LH, FSH, $E_2$와 배란 유도를 위해 hCG를 투여하는 날의 FSH, $E_2$는 차이를 보이지 않았으나 clomiphene citrate/GnRH antagonist 병합 요법군에서 hCG를 투여한 날의 LH와 자궁 내막 두께는 의미 있게 감소하였으며 유의한 임신율의 증가가 관찰되었다. 결 론: 자연 배란주기법군, clomiphene citrate 단독 요법 사용군에 비해 clomiphene citrate/GnRH antagonist 병합 요법 사용군에서 유의하게 임신율의 향상을 나타냈다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제31권2호
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• pp.111-117
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• 2004

Objectives: To investigate the effect of LH receptor in folliculogenesis, we confirm the expression level of LH receptor (LH-R) mRNA in human granulosa cells (GCs) and its expression levels were analyzed by comparison to embryo developmental rate and pregnancy rate. Materials and Methods: GCs were obtained at the time of oocyte retrieval from the patients undergoing IVF-ET program. The patients were divided into two groups: Group I (n=20) is poor responder (retrieved oocyte(s)$\leq$3ea), Group II (n=80) is normal responder (retrieved oocytes>3ea). After the extraction of total RNA, semiquantitative RT-PCR was performed and the expression level of LH-R mRNA was normalized by $\beta$-actin. Statistical analysis was performed by using $X^2$ test, Student's t-test and Pearson correlation. Results: In Group II, the relative values of LH-R mRNA (0.680 vs. 0.463, p<0.005) and pregnancy rate (54.7% vs. 23.1%, p<0.05) were significantly higher than in Group I. Number of retrieved oocyte(s) was gradually increased when the expression of LH-R mRNA was increased (p<0.05). But the quality of retrieved oocyte and transferred embryo were not related with the expression of LH-R mRNA. When the pregnancy rate was compared with FSH only group and FSH combined with hMG group in the ovarian stimulation protocol, FSH combined with hMG group was significantly higher than FSH only group in Group I (37.5% vs. 0%), and the expression of LH-R mRNA was significantly higher in hMG combined group than FSH only group (p<0.05). Conclusion: Expression level of LH-R mRNA has important role in ovarian function related with the response to gonadotrophin in human folliculogenesis. Furthermore these data might provide the evidence that additional use of hMG is helpful to poor responders.

• 한국수정란이식학회지
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• 제24권3호
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• pp.169-176
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• 2009

Domestic bitches are non-seasonally monoestrus; spontaneously ovulate only once or twice occurs at anytime of the year. Estrus induction has been applied infrequent estrus, misleading ovulation, mating difficulties, failure to conceive after normal mating, pregnancy failure and biological research. Protocol of estrus induction which included variable hormones such as FSH, GnRH, and PMSG have been applied for the last decades. Recently, Bromocriptine, one of anti-prolatin/dopamine agonist has been occasionally applied for estrus induction. The study was carried out to investigate the effective method for the induction of estrus in bitches using different hormone treatments, and the initiation time of estrus from hormone treatment by assessments of cytological observation and blood plasma progesterone concentration. A total of 54 bitches on anestrus were selected for the study and divided randomly into 8 treatment groups as follow. Control, natural estrus; FSH (L), FSH (1.5 mg/kg, twice a day, $Falltrophin^{(R)}$, Vetrepharm); FSH (H), FSH (3.0 mg/kg, twice a day); GnRH+FSH, GnRH (5 ug/kg, once first day, $GNADON^{(R)}$, Dongbang)+FSH (3 mg/kg, SID); PMSG, PMSG (50 IU/kg, every third day $FOLLIGON^{(R)}$, Intevet); GnRH+PMSG, GnRH (5 ug/kg, only first day)+PMSG (50 IU/kg, every third day); GnRH, GnRH (5 ug/kg, only first day); Bromocriptine, bromocriptine (0.3 mg/kg, SID, $Parlodel^{(R)}$, Novartis). The bitches were evaluated clinical sign, cytological exam and $OVUCHECK^{(R)}$ Premate for assessment of estrus induction. Estrus induction rates were significantly (P<0.05) higher in GnRH+PMSG (100%) compared to others. PMSG and GnRH+PMGS (87.5 and 100%) and Bromocriptine (77.8%) were higher than others except GnRH+PMSG. Analysis of vaginal smear has proved to be effective a correct assessment of estrus induction with assay of progesterone concentration by $OVUCHECK^{(R)}$ Premate. Proestrus initiated by the $6^{th}$ after induction in most case. In conclusion, bromocriptine is an effective drug for estrus induction in bitches and assay of progesterone concentration by $OVUCHECK^{(R)}$ Premate with examination of vaginal smear that should be useful to detection of estrus induction of estrus induced bitches.

• 한국수정란이식학회지
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• 제20권3호
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• pp.311-315
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• 2005

본 연구는 한우를 공란우로 이용시 효율을 최대화하고, 과도한 호르몬의 투여를 억제하며, 그로 인하여 공란우의 경제수명을 연장하고자 과배란 처리시 차기 발정을 고려하지 않고 과배란을 유도하였을때 공란우의 반응과 수정란의 생산율을 조사하였으며, 그 결과는 다음과 같다. 1. 한우 경산우 및 미경산우를 자연발정을 확인하고 차기발정 5일전에 FSH를 1일 2회 4일 간 투여한 것과 발정을 확인하지 않고 CIDR를 이용하여 동일한 호르몬을 방법으로 과배란을 처리하였을 때, 반응율은 각각 $82.2\%,\;89.7\%$였으며, 유의적인 차이는 인정되지 않았다. 2. 한우 경산우 및 미경산우를 자연발정을 확인하고 차기 발정 5일전에 FSH를 1일 2회 4일간 투여한 것과 발정을 확인하지 않고 CIDR를 이용하여 동일한 호르몬을 같은 방법으로 과배란을 처리하였을 때, 수정란의 회수율은 각각 7.7개, 10.5개를 회수하였고, 그 중 이식가능 수정란은 각각 3.4개, 3.8개를 나타냈으며, 두 처리간에 유의적인 차이를 나타냈다(p<0.05). 이상의 결과로 한우 공란우는 경산우 및 미경산우를 발정주기를 확인하지 않고도 과배란처리시 반응을 확인할 수 있었으며, 수정란의 회수에 있어서도 적절하게 채취할 수 있으므로 한우를 공란우로서 과도한 호르몬으로부터 보호할 수 있으며, 그에 따라 경제수명을 연장할 수 있을 것으로 사료된다. 또한 고능력 한우를 이용한 수정란 이식의 활성화에 유용한 방법이며, 농가에도 확산하여 소득향상에 기여할 수 있을 것으로 기대된다.

• 대한수의학회지
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• 제36권3호
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• pp.719-729
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• 1996

To investigate changes of estrus signs and genital organs in the bitch by hormonal induction of estrus, fourteen bitches of nulliparous and multiparous(2nd-5th) were grouped into diestrus and anestrus according to their estrus cycle. The hormonal treatments were divided into four groups: group A($PGF_2{\alpha}+PMSG+hCG$) and group B(PMSG+hCG) in diestrus bitches and group C(GnRH+FSH+hCG) and group D(PMSG+hCG) in anestrus bitches. The external signs of proestrus and estrus as well as the vaginal smear findings and natural breeding as estrus detection were investigated in all the experimental groups. Also, genital organs were examined at two months after the hormone treatment. The bitches in anestrus showed 100% of male attraction, vaginal bleeding and vulvar swelling as proestrus signs after the hormonal treatment for estrus induction and they showed higher numerical value of signs than the bitches in diestrus. The group A showed the lowest value in proestrous signs of all the groups. The bitches in anestrus treated with GnRH+FSH showed 100% of positive estrus by vaginal smear findings and 75% of natural breeding as estrus detection index and these values were the highest of all the groups. Pregnancy was recognized in only group C and the conception rate was 7.14% in al the experimental animals. Of the side effects after the hormone treatment, external findings of continous male attraction, continous external swelling and purulent exudate were recognized in all the experimental groups and the bitches in diestrus showed higher value of the findings than the bitches in anestrus. Of the changes of genital organs after the hormone treatment, hypertrophy of uterine horn, sanguineous exudate and purulent exudate as uterine findings were recognized in all the groups and these findings were shown more in the bitches in diestrus than in those in anestrus. These results indicated that group C showed the highest value of all the experimental groups in external signs of estrus and estrus detection and also pregnancy was recognized only in that group, consequently, that the hormonal treatment of group C would be the most effective for estrus induction, and also indicated that bitches in anestrus were more suitable than bitches in diestrus for the induction of estrus. In addition, side effects in external genital organs and uteri after hormone treatment were shown more in the bitches in diestrus than in those in anestrus, indicating that bitches in anestrus would be of choice for estrus induction.