The present study observed the effects of a green tea (Camellia sinensis) flower extract (GTFE) on melanin synthesis in B16-F10 melanoma cells. GTFE exhibited antioxidant activity on 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl and inhibited mushroom tyrosinase activity in a dose-dependent manner. Furthermore, GTFE significantly diminished ${\alpha}-melanocyte$ stimulating hormone (${\alpha}-MSH$) stimulated cellular melanin content and tyrosinase activity throughout the concentration range evaluated. Based on RNA sequencing analysis, differential gene expression patterns observed in ${\alpha}-MSH$ stimulated B16-F10 melanoma cells were normalized by the addition of GTFE. In particular, the expression levels of melanoregulin and tyrosinase genes which are key regulating genes in melanin synthesis were up-regulated by 3.5 and 3 fold respectively by ${\alpha}-MSH$, and were normalized to control levels by the addition of GTFE. The results suggest that GTFE inhibits melanin synthesis in ${\alpha}-MSH$ stimulated B16-F10 melanoma cells by normalizing expression of genes that are essential for melanin synthesis. Overall, the results suggest that GTFE could be applied in the development of a whitening agent for the treatment of dermal hyperpigmentation.
타이로신은 멜라닌 합성을 조절하는 효소이다. 본 연구에서는 현재까지 미백 효능에 대하여 연구가 진행되지 않은 대나무 중 왕대의 잎 및 대 속 내피 추출물이 유발하는 타이로시나제 활성 및 멜라닌 생성 억제 정도를 조사하였다. 대 잎과 대 속 추출물을 5 mg/ml 농도로 멜라닌 세포에 처리하면 세포의 생존율이 감소하는 것으로 나타났다. 또한 세포독성이 없는 조건의 대 잎과 대 속 추출물을 처리하였을 경우 타이로시나제 활성이 억제되었으며, 멜라닌 생성도 억제되는 것으로 나타났다. 본 연구의 결과를 살펴볼 때 대나무 추출물이 타이로시나제 활성과 발현을 저해함으로써 멜라닌 생성을 억제할 수 있는 후보군으로 가능성이 있는 것으로 생각된다.
Cornis fructus has been traditionally used for treating allergy, asthma, hepatitis, and chronic nephritis. It major chemical constituents have been saponins, phenolic acids and loganin. The main aim of the present study was to examine the effect of methanol extract from Cornis fructus on melanogenesis. Cell were cultured in the presence of methanol extracts from Cornis fructus for 48 h, and there were estimated total melanin content as a final product and activity of tyrosinase, a key enzyme, in melanogenesis. Methanol extract from Cornis fructus increased the melanin content and tyrosinase activity in a dose-dependent manner. Particularly, it was observed that only methanol extract $200\;{\mu}g/ml$ stimulated the melanin secretion in B16/F10 melanoma cells by 152% at 48 h treatment and the activity of tyrosinase was increased by 261% in the presence of same concentration.
Fruits of Cornus Officinalis have been used as an astrinent, tonic and haemostatic in chinese medicine, contain a large amount of hydrolyzable tannins. The main aim of the present study was to examine the effect of Corni Fructus on melanogenesis. Cells were cultured in the presence of water extracts from Corni Fructus for 48 h, and there were estimated total melanin content as a final product and activity of tyrosinase, a key enzyme, in melanogenesis. Water extract from Corni Fructus increased the melanin content and tyrosinase activity in a dose-dependent mammer. Especially, It was observed that 100 μg/ml only water extract stimulated melanin secretion in B16/F10 melanoma cells by 130% at 48 h treatment and activity of tyrosinase increased by 160% in presence of same concentration.
Bioconversion, the enzymatic process by microorganism on organic precursor to desired products. The natural extract is converted into a form that can be easily absorbed into the skin, while scaling up of to higher quantity is possible. Selection of naturally processed raw material rather than chemically processed is preferred. Therefore, fermentation was carried out by mixing Rubus coreanus Miquel, soybean, Zanthoxylum schinifolium as bioconverting materials, the possibility of inflammation, whitening material were checked. In this study, useful microorganisms were isolated from various salted fish, and 16S rDNA sequence was analyzed to confirm their genetic characteristics. Combining the three natural materials using bioconversion technology to study their activity before and after fermentation. To evaluate the antioxidant activity and the active ingredient content the DPPH radical scavenging activity and the total polyphenol content were examined. Raw 264.7 cells were used to evaluate MTT assay, NO and $TNF-{\alpha}$ production inhibitory activity. Also, to evaluate the whitening activity, tyrosinase inhibitory activity and melanin formation inhibitory activity were measured using B16F10 cells. In total 34 strains were obtained from various salted fish. The effective strains useful for the bioconversion process, showed that DPPH radical scavenging ability and polyphenol content were increased in the two kinds of microbial treatment groups compared to the untreated group. 16S rDNA sequencing analysis of the strains showed excellent in Pediococcus pentosaceus B1 in comparison. An increase of up-to 156% in anti-oxidative activity and 141% in polyphenol content was observed after bioconversion. In addition, after mixed fermentation the toxidty of Raw 264.7 and B16F10 cells tended to decrease and a significant increase was observed in anti-inflammatory activity as well. Also, tyrosinase activity and melanin significantly. synthesis decreased significantly.
Sarsasapogenin (SAR) is a steroidal sapogenin that is used as starting material for the industrial synthesis of steroids. It has various pharmacological benefits, such as antitumor and antidepressant activities. Since its effect on melanin biosynthesis has not been reported, we used murine melanocyte melan-a cells to investigate whether SAR influences melanogenesis. In this study, SAR significantly increased the melanin content of the melan-a cells from 1 to 10 ${\mu}M$. Based on an enzymatic activity assay using melan-a cell lysate, SAR had no effect on tyrosinase and DOPAchrome tautomerase activities. It also did not affect the protein expression of tyrosinase-related protein 1 and DOPAchrome tautomerase. However, protein levels of tyrosinase and microphthalmia-associated transcription factor were strongly stimulated by treatment with SAR. Therefore, our reports suggest that SAR treatment may induce melanogenesis through the stimulation of tyrosinase and microphthalmia-associated transcription factor expression in melan-a cells.
Sanjeewa, K. K. Asanka;Park, Young-jin;Fernando, I. P. Shanura;Ann, Yong-Seok;Ko, Chang-Ik;Wang, Lei;Jeon, You-Jin;Lee, WonWoo
Fisheries and Aquatic Sciences
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제21권9호
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pp.21.1-21.8
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2018
In the present study, we first evaluated the melanin inhibitory effect of four crude 70% ethanol extracts separated from soft corals abundantly growing along the seawaters of Jeju Island, South Korea, including Dendronephthya castanea (DC), Dendronephthya gigantea (DG), Dendronephthya puetteri (DP), and Dendronephthya spinulosa (DS). Among the four ethanol extracts, the ethanol extract of DP (DPE) did not possess any cytotoxic effect on B16F10 cells. However, all other three extracts showed a cytotoxic effect. Also, DPE reduced the melanin content and the cellular tyrosinase activity without cytotoxicity, compared to the ${\alpha}-MSH$-stimulated B16F10 cells. Specifically, DPE downregulated the expression levels of tyrosinase and microphthalmia-associated transcription factor by activating the ERK signaling cascade in ${\alpha}-MSH$-stimulated B16F10 cells. Interestingly, the melanin inhibitory effect of DPE was abolished by the co-treatment of PD98059, an ERK inhibitor. According to these results, we suggest that DPE has whitening capacity with the melanin inhibitory effects by activating ERK signaling and could be used as a potential natural melanin inhibitor for cosmeceutical products.
The purpose of this study was to investigate the effects of Fructus Ligustri Lucidi (FLL) on the process of melanogenesis. Cell viability of B16F10 cells was measured by MTT assay and melanin content was assessed using the method of Hosoi with some modifications. Methanol extract of Fructus Ligustri Lucidi (MFLL) significantly inhibited melanin synthesis in a concentration-dependent manner, and it reduced the activity of tyrosinase, the rate-limiting melanogenic enzyme. Additionally, $\alpha$-melanocyte stimulation hormone ($\alpha$-MSH)-induced hyperpigmentation was down-regulated by MFLL. MFLL was fractionated by organic solvent. In the present study, Hexane extract of Fructus Ligustri Lucidi (HFLL) inhibited tyrosinase activity and melanin production of B16F10 cells in the absence or presence of $\alpha$-MSH. Ethyl acetate, butanol and water layers did not affect tyrosinase activity and melanin production. Meanwhile ethyl acetate, butanol and water layers showed DPPH free radical scavenging activity. These results suggest that extract of FLL could be used as functional biomaterial in developing a skin whitening agent having the antioxidant activity.
죽여 추출물의 미백 효과를 확인하기 위하여 용매와 추출방법을 달리한 6가지의 추출물을 얻어 tyrosinase 활성 억제시험을 하였다. 그 결과 메탄올로 추출한 죽여 추출물에서 tyrosinase 활성 억제 효과가 가장 우수한 것을 확인 하였다. 세포 수준에서 죽여 추출물의 melanin 생성 억제 효과를 알아보기 위해서 B16 melanoma 세포를 이용하여 MTT assay를 실시하였고, 50 ppm의 농도 까지는 세포 독성이 나타나지 않은 것을 확인하였다. 죽여 추출물에 의한 세포 내 melanin 합성 저해 효과를 측정하기 위해 melanin contents assay를 하였고, 10 ppm 추출물을 처리한 extra cellular에서는 control 대비 68%, intra cellular에서는 74% 수준으로 melanin 합성이 저해됨을 확인하였다. 이차원전기영동을 이용하여 B16 melanoma 세포의 proteome을 분석 해 본 결과, 죽여 추출물 을 투여하지 않은 대조군에서는 171개, 추출물을 투여한 것에서는 282개의 spot을 확인하였고, 120개의 spot matching 을 확인하였다. 이 중 미백에 관련된 12개의 단백질 동향분석을 통하여, 죽여 추출물이 melanin 합성 전이나 합성 중에 관련된 메커니즘에 관련하는 것을 알 수 있었다.
Recently many efforts were focused to understand the mechanical insights of melanogenesis to develop the agents for hyper-pigmentation and hypo-pigmentation. In the melanin biosynthetic pathway, tyrosinase is the rate limiting enzyme, and ${\alpha}$-melanocyte stimulating hormone(MSH) or cAMP-elevating agents stimulate melanogenesis and enhance the melanin synthesis and the tyrosinase activity. The author has analyzed the effects of Radix Trichosanthis on the basal melanogenic activities of B16/F10 mouse melanoma cells, and on the ${\alpha}$-MSH or forskolin-induced melanogenesis. Radix Trichosanthis alone markedly suppressed melanin content and tyrosinase activity in a dose-dependent manner. Pretreatment of the cells with Radix Trichosanthis also suppressed the increase of ${\alpha}$-MSH (10 nM) or forskolin (20${\mu}M$)-induced melanin content and tyrosinase activity. The decrease in the tyrosinase activity was paralled by a decrease in the abundance of tyrosinase protein and tyrosinase promoter activity. Pretreatment of the cells with Radix Trichosanthis also inhibited the increase of forskolin($20{\mu}M$) induced the amount of tyrosinase protein and tyrosinase promoter activity. The results of DOPA staining revealed that pretreatment of the cells with Radix Trichosanthis showed less intensity than B16 melanoma cells stimulated with ${\alpha}$- MSH or forskolin. These results suggest that Radix Trichosanthis inhibits melanogenesis and abrogates ${\alpha}-MSH and cAMP-induced melanogenesis in B16 melanoma cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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