We analyzed the nucleotide sequences of about 500 bp of the mitochondrial NADH dehydrogenase subunit 3 (ND3) gene to estimate the genetic variation of Korean masu salmon (Oncorhynchus masou) populations. DNA samples were collected from 104 river-only specimens and 52 anadromous specimens from three hatcheries and one river. There are no records of artificial release into the river. We amplified the ND3 gene by polymerase chain reaction, targeting areas that included parts of the cytochrome oxidase III gene and the NADH dehydrogenase subunit 4L gene, and defined 14 haplotypes based on 12 variable nucleotide sites in the examined region. Among the haplotypes, ten were specific to river-only specimens within hatchery populations. Haplotype diversity of river-only populations in hatcheries was higher than that of anadromous and wild populations. Pairwise population $F_{ST}$ estimates and neighbor-joining tree analyses inferred that anadromous and river-only populations were distinct. These results suggest that sequence polymorphism in the ND3 region may be a useful marker for analyzing the genetic variation and population structure of masu salmon.
Thirty-two germplasms of Korean adlay landraces were examined to analyse the genetic relationship through the amplified fragment length polymorphism (AFLP) approach. Total number of AFLP products generated by 12 selective primer combinations was 882. The number of polymorphic fragments by each primer combination greatly varied from 4 to 51 with a mean of 20.3, bands visible on the polyacrylamide gel. A genetic similarity coefficient was used for cluster analysis following UPGMA (unweighted pair grouping method of averages) method. The resulting clusters were represented in the form of a dendrogram. The clustering was not tight in the dendrogram. There was generally no clear grouping of the adlay according to the geographic regions in which germplasms were collected. The present AFLP analysis imply that although Korean adlay displayed a larger amount of AFLP variation within germplasms, the variation was shown independently without reflecting a clinal variation. This study demonstrated that AFLP method can be used to examine the genetic relationships among different germplasms of adlay.
Genome duplication(i.e. polyploidy) is a common phenomenon in the evolution of plants. The objective of this study was to achieve a comprehensive understanding of genome duplication for SNP discovery by Thymine/Adenine(TA) cloning for confirmation. Primer pairs were designed from 793 EST contigs expressed in the roots of a supernodulating soybean mutant and screened between 'Pureunkong' and 'Jinpumkong 2' by direct sequencing. Almost 27% of the primer sets were failed to obtain sequence data due to multiple bands on agarose gel or poor quality sequence data from a single band. TA cloning was able to identify duplicate genes and the paralogous sequences were coincident with the nonspecific peaks in direct sequencing. Our study confirmed that heterogeneous products by the co-amplification of a gene family member were the main cause of obtaining multiple bands or poor quality sequence data in direct sequencing. Counts of amplified bands on agarose gel and peaks of sequencing trace suggested that almost 27% of nonrepetitive soybean sequences were present in as many as four copies with an average of 2.33 duplications per segment. Copy numbers would be underestimated because of the presence of long intron between primer binding sites or mutation on priming site. Also, the copy numbers were not accurately estimated due to deletion or tandem duplication in the entire soybean genome.
Intraspecific genetic relationship of 19 variation types of the Yam (Dioscorea alata) classified by their external morphological characteristics such as leaf and tuber shape were assessed by DNA using random and specific primer. Twenty two out of 113 primers (100 random[10-mer] primers, two 15 mer [M13 core sequence, and (GGAT)$_4$ sequence]) had been used in PCR-amplification. Only 12 primers, however, were success in DNA amplification in all of the analyzed plants, resulting in 93 randomly and specifically amplified DNA fragments. The analyzed taxa showed very high polymorphisms(69 bands, 71.0 %), allowing individual taxon to be identified based on DNA fingerprinting. Monomorphic bands among total amplified DNA bands of each primer was low under the 50%. Similarity indices between accessions were computed from PCR(polymerase chain reaction) data, and genetic relationships among intraspecific variations were closely related at the levels ranging from 0.66 to 0.90. These DNA data were not matched well with those of morphological characters since they were divided into two major groups at the similarity coefficient value of 0.70. Therefore, Grouping of species into variation types by mainly morphological charactistics was suggested unreasonable.
The evolutionary course of the CsRn1 long-terminal-repeat (LTR) retrotransposon was predicted by conducting a phylogenetic analysis with its paralog LTR sequences. Based on the clustering patterns in the phylogenetic tree, multiple CsRn1 copies could be grouped into four subsets, which were shown to have different integration times. Their differential sequence divergences and heterogeneous integration patterns strongly suggested that these subsets appeared sequentially in the genome of C. sinensis. Members of recently expanding subset showed the lowest level of divergence in their L TR and reverse transcriptase gene sequences. They were also shown to be highly polymorphic among individual genomes of the trematode. The CsRn1 element exhibited a preference for repetitive, agenic chromosomal regions in terms of selecting integration targets. Our results suggested that CsRn1 might induce a considerable degree of intergenomic variation and, thereby, have influenced the evolution of the C. sinensis genome.
Kyaing, May Sandar;Soe, April Nwet Yee;Myint, Moe Moe;Htway, Honey Thet Paing;Yi, Khin Pyone;Phyo, Seinn Sandar May;Hlaing, Nwe Nwe Soe
Journal of Plant Biotechnology
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v.46
no.2
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pp.61-70
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2019
There is vast genetic diversity of Myanmar Mangoes. This study mainly focused on indigenous thirteen different mango landraces cultivated in central area of Myanmar, Kyauk-se District and their fruit characteristics by 18 descriptors together with genetic relationship among them by 12 SSR markers. Based on the morpho-physical characters, a wide variation among accessions was found. Genetic characterization of thirteen mango genotypes resulted in the detection of 302 scorable polymorphic bands with an average of 4.33 alleles per locus and an average polymorphism information content (PIC) of 0.7. All the genotypes were grouped into two major clusters by UPGMA cluster analysis and a genetic similarity was observed in a range of 61 ~ 85%. This study may somehow contribute insights into the identification of regional mango diversity in Myanmar and would be useful for future mango breeding program.
Purpose : We hypothesized that the persisting bronchial hyperresponsiveness (BHR) of adolescents with asthma remission may be controlled mainly by genetic factors, and the BHR of symptomatic asthma by airway inflammation. ${\beta}_2$-adrenoceptor gene is considered to be a candidate gene in the development of BHR. Thus, ${\beta}_2$-adrenoceptor gene polymorphism may be associated with the BHR of adolescents with asthma remission, but not with the BHR of symptomatic asthma. To evaluate this hypothesis, ${\beta}_2$-adrenoceptor gene polymorphism at 2 sites (Arg16-Gly, Gln27-Glu) were examined. Methods : Two hundred two adolescents with BHR ($PC_{20}<18\;mg/mL$) and long term remission (neither asthma-related symptoms nor medication during the previous 2 years) of their asthma (remission group), 182 adolescents with symptomatic asthma (symptomatic group), and 200 healthy adolescents (control group) were studied. Asthma phenotypes were determined using methacholine bronchial provocation test and skin prick test. Genotypes of ${\beta}_2$-adrenoceptor polymorphism were evaluated by PCR-based methods. Results : Gly/Gly allele and Gly16-Gln27 haplotype were more prevalent in the remission group than in the control group (P=0.01, P=0.02), although there was no difference between the symptomatic group and the control group. In the remission group, there was significant difference in geometric mean of $PC_{20}$ among the 3 groups subdivided by the number of Gly16-Gln27 haplotype, showing that the Gly16-Gln27 haplotype was positively associated with BHR. However, no association was found between Gly16-Gln27 haplotype and BHR in the symptomatic group. Conclusion : This study demonstrates that ${\beta}_2$-adrenoceptor polymorphism at amino acid 16 and 27 was associated with BHR persisting in adolescents with asthma remission.
Kim, Maeng Jin;Han, Song-Hun;Yang, Hye-Young;Jo, Mi-Ran;Chung, Sang-Chul;Song, Choon Bok
Korean Journal of Ichthyology
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v.18
no.4
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pp.329-338
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2006
Phylogenetic relationships and DNA polymorphism among local populations of the Korean native catfish species, Liobagrus mediadiposalis, have been investigated based on mitochondrial cytochrome b DNA sequences. As a result, three genetically distinct groups of local populations were recognized based on the phylogenetic tree constructed. The first group was called "Nakdong-river group" that included the local populations from Geumho-river, Gyeongho-river, and Deokcheon-river; the second one was "Geum-river group"; the third one was represented as "Seomjin-river group" that included the samples from Seomjin-river, Dongjin-river and Geokum-do. The phylogeny also implied that the ancestral group of L. mediadiposalis have first evolved to Nakdong-river group, and later two local populations (Geum-river and Seomjinriver group) were diverged from the other lineage. DNA polymorphisms we observed were 4.4~4.7% between Geum-river group and Seomjin-river group, 5.1~5.5% between Seomjinriver group and Nakdong-river group, and 5.5~5.7% between Nakdong-river group and Geumriver group. These results indicated the long period of geographic isolation due to the river system in Korea caused such high degrees of DNA polymorphisms between local populations of L. mediadiposalis.
RAPD markers were analyzed in order to detect the genetic variation and diversity of the fifty-two melon lines. SDS extraction method produced more and purer DNA than CTAB method. RAPD reaction conditions were optimized as follows ; 10ng template DNA, 270nM primer, $200{\mu}M$ each of dATP, dCTP, dGTP and dTTP, $0.3{\mu}unit$ dynazyme and 10x buffer brought to $15{\mu}l$ final volume with distilled water. The adequate annealing temperature was $39^{\circ}C$ and forty cycles of amplification produced the best RAPD band patterns. Among a total of 123 bands from 12 random primers, 25 polymorphic bands(20%) were selected as reliable markers. The average number of polymorphic bands per primer was 2.1 among the 52 lines. Intragroup genetic relationship based on the marker difference was closer than intergroup genetic relationship. The 52 lines could be grouped into two major group (Korean landraces and melon lines) and then melon group subdivided into two subgroups (net melon lines and no-net melon). This result corresponded to morphological grouping. Eight RAPD markers separated the Korean landraces and melon groups and four RAPD markers separated net melon and no-net melon groups.
In the field Of individual identification in forensic Science, if the body is charred, it is sometimes impossible to identify the morphologic changes and charred tissue such as blood, muscle and bone can not be identified by forensic microbiologic method such as DNA typing. So the author used the characteristics of teeth which is relatively firm compare to other organs and stable to external environment such as heat and also possess cells needed for the DNA typing. The author conducted the experiment on teeth to detect DNA related to individual identification regarding to temperature in which other charredorgans can not be detected. The experiment was done on 64 extracted third molars consisted of unheated ones, and heated teeth to $100^{\circ}C$, $150^{\circ}C$, $200^{\circ}C$ for 45 min, 90 min, and 120 min respectively and to $250^{\circ}C$ for 45 min. DNA was extracted from each tooth and amplified fragment length polymorphism procedure(AMP-FLPs) using polymerase chain reaction(PCR) was applied and observed for the matching DNA in HumTH01 and HumCD4 locus and the followings Are the results : 1. It was able to detect matching DNA in HumTH01 and HumCD4 locus in every teeth which no heating has been done. 2. It was able to detect matching DNA in HumTH01 and HumCD4 locus in every teeth heated to $100^{\circ}C$ for 45, 90 and 120 min. 3. It was able to detect matching DNA in HumTH01 and HumCD4 locus in teeth heated to $l00^{\circ}C$, $200^{\circ}C$ for 45, 90, 120 min. 4. It was impossible to detect matching DNA in HumTH01 and HumCD4 locus in teeth heated to $250^{\circ}C$. So, it is possible to extract DNA from teeth that otherwise can not be extracted from other organs in the charred body and it can be concluded that teeth are highly reliable and applicatable as forensic odontology for individual identification.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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