Effect of ginsenoside mixture, ginsenoside $Rb_1$,$Rb_2$,$Rg_1$ and the fat soluble fraction of the roots of Panax ginseng C.A. Meyer on the activity of glucokinase (GK) in vitro has been observed and found that GK activity was increased about 15c1c at the concentration of ginsenoside mixture and/or the fat soluble fraction being $10^{-7}$,$10^{-5}$%. It was also observed that glucose uptake by rat liver was increased in the presence of either ginsenoside mixture or the fat soluble fraction by perfusion technique. Ginsenoside mixture stimulated various enzymes related to glucose metabolism, however, both ginsenoside mixture and the fat soluble fraction did not stimulate GK activity as expected. Primary culture of liver cells showed that the ginsenoside mixture and the fat soluble fraction increased GK activity significantly and they stimulated the GK activity synergistically in the co-presence of insulin.
This study was undertaken to determine the effect of dietary fat to carbohydrate ratio on plasma glucose. free fatty acid level and hepatic glucokinase activity in normal or insulin treated diabetic rats. Sprague-Dawley male rats were fed with 3 different but isocaloric diets for 5 weeks. Diet 1 made to have low fat(4% corn oil and 65.8% corn starch wt/wt) : diet 2 medium fat (12% : 47.8%) : diet 3 high fat (20% : 29.8%) In the normal rats an apparent increase of GK activity was observed from the animal fed low fat diet when compared with other groups. GK activities were decreased in all the alloxan-diabetic rats than the normal rats. When insulin was injected the GK activities in all the livers of alloxan-diabetic rats restored to normal level and GK activity was highest in low fat group. In the entire group significant relationships were seen between the plasma glucose and GK activities(r=-0.6, p<0.001) FFA levels and GK activities(r=-0.63 p<0.001) Both in normal and insulin treated diabetic rats significantly depressed level of hepatic GK activity was observed in the livers of animals fed high fat diet for 5 weeks and depressed level of GK activity may be related to insulin resistance.
C. militaris 동충하초의 기능성을 규명하기 위하여 당대사 관련 효소인 GK, PDH 및 ACC 활성을 측정하였다. C. militaris에서 추출된 CM-A와 CM-B는 GK와 PDH 및 ACC 효소에 대하여 대조군에 비해 높은 활성을 나타냈으며, CM-B 보다는 CM-A에서 유의적으로 높은 활성 증가를 나타냈다(p < 0.05). 간세포내 당질 관련 호소의 활성은 CM-A와 CM-B 분획물의 혼합 비율에 영향을 받는 것으로 나타났는데 활성이 높은 CM-A의 비율이 커질수록유의적으로 높은 활성 증가를 나타냈다. GK와 ACC는 단일 상태의 CM-A 보다는 혼합된 상태일 때 활성이 증가하였지만, PDH는 혼합된 상태보다는 CM-A 단독일 때 가장 높은 활성을 나타냈다. 결론적으로 C. miliaris는 GK, PDH 및 ACC 등의 효소 활성을 증가시킴으로써 혈중 포도당의 상승을 억제하며 이로 인해 항당뇨 작용을 한다고 판단된다.
본 연구에서는 가시오갈피 물 추출물(ASW)를 이용하여 아직 시도된 바가 없는 HepG2 세포 내 포도당 유입과정 및 glucokinase(GK) 활성을 통한 포도당 이용대사 실험을 수행하였다. 포도당의 세포 내 유입은 GLUT2의 transcription factor들 중 하나인 $HNF-1{\alpha}$의 활성화로 GLUT2의 유전자 발현이 증가하여 이루어지는 것을 확인하였다. GK 활성 측정 결과 ASW가 GK를 활성화하여 포도당의 인산화에 영향을 주는 것을 확인하였고 AMP-activated protein kinase의 인산화 증가로 glycolysis에 관여하는 효소인 GK의 단백질 발현은 증가하고, gluconeogenesis에 관여하는 phosphoenolpyruvate carboxykinase의 단백질 발현은 감소하는 것을 확인하였다. 그리고 인산화된 포도당이 glycogen으로 전환 저장되는 메커니즘을 pPI3k-pAkt-pGSK-$3{\beta}$의 단계별 단백질 발현을 확인함으로써 검증하였으며, glycogen 함량 측정을 통해 확인하였다. 본 연구를 통해 ASW가 다양한 메커니즘에 작용하여 당뇨의 예방 및 개선에 활용할 수 있는 잠재적 소재임을 확인하였고, 이는 ASW가 천연 기능성 소재로서의 개발가치가 높음을 시사한다.
본 연구에서는 유전적으로 제2형 당뇨를 가진 Goto-Kakizaki 흰쥐의 간 세포액에 함유된 당대사 관련 주요 효소인 glucokinase(GK)와 acetyl-CoA carboxylase(ACC)의 활성 및 $\alpha$-glucosidase 저해 활성을 측정하였다. 사용된 소재로는 지골피(Lycium chinense), 동충하초(Cordyceps militaris), 가시오가피(Acanthopanax senticosus)를 선정하였고, 이를 단독으로 사용하기 보다는 유효성분의 항당뇨 효능에 대한 상승효과를 알아보기 위하여 일정비율로 혼합하였다. 각 소재들을 일정 비율로 혼합한 모든 추출물에서 GK와 ACC의 활성이 증가하였으며, 가시오가피와 동충하초의 혼합 비율이 높아질수록 효소의 활성 증가율도 높아진 것으로 나타났다. 이는 지골피와 가시오가피, 동충하초의 상승작용 때문으로 사료된다. $\alpha$-glucosidase의 저해 활성은 JDG 5(1:6:6) 처리군에서 acarbose 보다 높은 억제율을 나타내었다. 결론적으로 지골피, 가시오가피, 동충하초의 혼합 비율이 1:6:6 일 때 당대사 관련 효소인 GK와 ACC 효소를 활성화시키고, $\alpha$-glucosidase의 활성을 저해하여 흡수된 당의 이용에 유리하게 작용함으로써 항당뇨 효과를 나타낼 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구는 지골피, 동충하초, 가시오가피의 복합추출물을 고포도당 조건(4.5 g/L)에서 배양한 HepG2 세포를 이용하여 당대사 관련 주요 효소인 glucokinase, acetyl CoA carboxylase의 활성을 RT-PCR과 western blotting 방법을 이용하여 측정하였다. 복합추출물을 HepG2 세포에 24시간 처리한 후 GK mRNA와 protein의 발현 양을 측정한 결과 각각 $168{\pm}0.04%$, $182.4{\pm}0.03%$로 증가하였으며, ACC 효소의 활성은 고포도당으로 배양하였을 때 ACC mRNA 및 protein 발현 양은 각각 $127.3{\pm}0.02%$, $126.7{\pm}0.24%$로 증가 하였다. 결론적으로 지골피, 동충하초, 가시오가피의 복합추출물이 GK 및 ACC mRNA 발현을 증가시킴으로써 항당뇨 효과를 나타냄을 관찰하였다.
Streptozotocin(STZ)으로 유도된 당뇨 흰쥐에게 연교의 에탄올 추출물을 1일 1회 7일간 1,000mg/kg.b.w의 용량으로 투여 후 glucose함량과 이에 관여하는 효소(glucokinase(GK), glucose-6-phosphatase(G-6-Pase), glucose-6-phosphate dehydrogenase(G-6-PDH)활성과 glycogen 함량, triglyceride(T.G), total cholesterol등의 지질대사에 관여하는 물질들의 함량을 측정한 결과 연교 에탄올 추출물 투여군이 glucose, T.G, total cholesterol 등의 함량과 G-6-Pase 활성이 유의적인 감소를 나타내었으며 glycogen 함량과 GK의 활성이 유의적인 증가를 나타내었다. 이와 같이 연교 에탄올 추출물을 1,000mg/kg.b.w을 당뇨 흰쥐에게 투여한 결과 혈당저하, 지질대사의 개선 효과를 갖는 유효성분을 함유하고 있음을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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