Weizmannia coagulans (formerly Bacillus coagulans) is Gram-positive, and spore-forming bacteria causing food spoilage, especially in acidic canned food products. To control W. coagulans, we isolated a bacteriophage Youna2 from a sewage sludge sample. Morphological analysis revealed that phage Youna2 belongs to the Siphoviridae family with a non-contractile and flexible tail. Youna2 has 52,903 bp double-stranded DNA containing 61 open reading frames. There are no lysogeny-related genes, suggesting that Youna2 is a virulent phage. plyYouna2, a putative endolysin gene was identified in the genome of Youna2 and predicted to be composed of a N-acetylmuramoyl-L-alanine amidase domain (PF01520) at the N-terminus and unknown function DUF5776 domain (PF19087) at the C-terminus. While phage Youna2 has a narrow host range, infecting only certain strains of W. coagulans, PlyYouna2 exhibited a broad antimicrobial spectrum beyond the Bacillus genus. Interestingly, PlyYouna2 can lyse Gram-negative bacteria such as Escherichia coli, Yersinia enterocolitica, Pseudomonas putida and Cronobacter sakazakii without other additives to destabilize bacterial outer membrane. To the best of our knowledge, Youna2 is the first W. coagulans-infecting phage and we speculate its endolysin PlyYouna2 can provide the basis for the development of a novel biocontrol agent against various foodborne pathogens.
본 연구는 정량적 미생물 위해평가(Quantitative microbial risk assessment: QMRA)에 절대적으로 필요한 9종의 식중독 세균, 2종의 바이러스, 1종의 원생동물에 대한 최소 감염량(minimum infective dose)을 선정한 연구이다. 주요 식중독 미생물들의 최소 감염량을 선정하기 위하여, 1980년부터 2012년까지 PubMed, ScienceDirect database 등에서 주요 식중독 미생물들의 최소 감염량 및 위해평가 자료 82종을 수집하였다. 수집된 자료는 메타분석(mata-analysis)에서 사용되고 있는 relative frequency(fi, 상대빈도 값)를 계산하여 가장 적정한 최소 감염량을 추정 및 선정하였다. 주요 식중독 미생물들의 최소 감염량은, B. cereus $10^5cells/g$ (fi = 0.32), C. jejuni 500 cells/g (fi = 0.57), Cl. perfringens $10^7cells/g$ (fi = 0.56), Pathogenic E. coli 중 EHEC 10 cells/g (fi = 0.47), ETEC $10^8cells/g$ (fi = 0.71), EPEC $10^6cells/g$ (fi = 0.70), EIEC $10^6cells/g$ (fi = 0.60), L. monocytogenes $10^2{\sim}10^3cells/g$ (fi = 0.23), Salmonella spp. 10 cells/g (fi = 0.30), Shigella spp. 100 cells/g (fi = 0.32), S. aureus $10^5cells/g$ (fi = 0.45), V. parahaemolyticus $10^6cells/g$ (fi = 0.64), Hepatitis A virus $10{\sim}10^2particles/g$ (fi = 0.33), Noro virus 10 particles/g (fi = 0.71), C. pavum $10{\sim}10^2oocyst/g$ (fi = 0.33)으로 나타났다. 본 연구결과는 향후 국내 QMRA를 통한 위해수준 추정결과의 정확성을 향상시키는데 기여할 수 있을 것으로 기대된다.
Frequent outbreaks of foodborne illness demand the need for rapid and sensitive methods for detection of these pathogens. Recent development of biosensor technology has a great potential to meet the need for rapid and sensitive pathogens detection from foods. An antibody-based fiber-optic biosensor and an automated reagents supply system to detect Listeria monocytogenes were developed. The biosensor for detection of Listeria monocytogenes in PBS and bacteria spiked food samples was evaluated. The automated reagents supply system eliminated cumbersome sample and detection antibody injection procedures that had been done manually. The biosensor could detect $10^4$ cfu/ml of Listeria monocytogenes in PBS. By using the fiber-optic biosensor, $2x10^8$ cfu/ml of Listeria monocytogenes in the food samples were detectable.
This study was performed to determine the antibiotic susceptibility profiles of Salmonella spp., coliforms, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus and Vibrio spp. isolated from broiler carcasses, aquacultured flounders, hamburgers, and lettuce, which are foods consumed in large quantities in Korea. Salmonella spp. and L. monocytogenes were isolated only from broiler carcasses and Salmonella spp. had a high multidrug resistance rate of 61.1%. Meanwhile, coliforms and S. aureus were isolated from all four foods tested in this experiment. The multidrug resistance rate of coliforms from broiler carcasses was 50%, and that of Vibrio spp. from flounders was 71.4%. The resistance to tetracycline, streptomycin, ampicillin or carbenicillin was common regardless of the kind of food or isolate.
Listeria monocytogenes is a pathogen of major concern to the food industry and the potential cause of severe infections such as listeriosis. Early detection of this foodborne pathogen is important in order to eliminate its potential hazards. So, immunomagnetic separation (IMS) has been suggested as a means of reducing the total analysis time and for improving the sensitivity of detection. Atomic force microscopy (AFM) has been used for measuring the topographic properties of sample surfaces at nanometer scale. In this study, we used AFM to confirm both the sensitivity and the specificity of IMS. Regarding AFM analysis, the length and the width of the bacteria, which were in agreement with literature values, were found to be 2.993 $\mu\textrm{m}$ and 0.837 $\mu\textrm{m}$, respectively. As a result, AFM helped us both characterize and measure the bacterial and bead structures.
We developed a microfluidic immunoassay platform for the detection of various analytes such as bacterial pathogen by packing antibody-immobilized glass beads in spatially-isolated microchambers on a microfluidic device. Primary amines of antibody were covalently conjugated to carboxyl-terminated glass beads previously treated with aminosilane followed by glutaraldehyde. Through this covalent binding, up to 905 $\mu$g immunoglobulin G (IgG) per gram of glass beads was immobilized. For application, glass beads attaching antibody specific to Escherichia coli O157:H7, a foodborne pathogen, were packed into a microfluidic device and used for the detection of the serotype. This prototype immunoassay device can be used for the simultaneous detection of multiple analytes by sequentially packing different-sized glass beads attaching different antibody in discrete microchambers on a single microfluidic device.
Carrageenan-based functional films were prepared by adding two different types of sulfur nanoparticles (SNP) synthesized from sodium thiosulfate (SNPSTS) and elemental sulfur (SNPES). The films were characterized using Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR), X-ray diffraction spectroscopy (XRD), and thermal gravimetric analysis (TGA). Also, film properties such as UV-visible light transmittance, water contact angle (WCA), water vapor permeability (WVP), mechanical properties, and antibacterial activity were evaluated. SNPs were uniformly dispersed in the carrageenan matrix to form flexible films. The addition of SNP significantly increased the film properties such as water vapor barrier and surface hydrophobicity but did not affect the mechanical properties. The carrageenan/SNP composite film showed some antibacterial activity against foodborne pathogenic bacteria, L. monocytogenes and E. coli.
본 연구에서는 쇠비름을 메탄올로 추출하여 식품의 부패나 식중독성을 유발하는 세균과 곰팡이에 대한 추출물의 항균활성을 검토하고 그들의 최소생육저해농도를 결정하였으며 쇠비름 추출물의 구성성분과 함량을 분석하였다. 쇠비름은 특히 P. citreonigrum 균주에 대해 매우 높은 항균효과를 보였고 S aureus, K. pneumoniae에 대해서는 benzoic acid에 상응할 만한 항균효과를 나타내었다. 쇠비름 메탄올 추출물은 200mg/$m\ell$ 농도에서 S. aureus와 P. citreonigrum의 생육을 억제하였고, 250 mg/$m\ell$ 농도에서 K. pneumoniae의 생육을 억제하였으며, 300 mg/$m\ell$ 농도에서 P. aeruginosa와 E. coli의 생육을 억제하였다. 따라서 이들 균주에 의한 식품의 부패 및 식중독이 우려되는 식품의 항균제로서 쇠비름의 사용 가능성을 볼 수 있었다. 쇠비름 메탄올 추출물의 분석결과 전체 147가지 성분이 분석되었으며 acid 및 ester류가 41.06%로 추출물의 가장 많은 부분을 차지하고 있었다. 또한 세균, 곰팡이, 효모와 같은 미생물에 항균활성을 나타내는 것으로 보고되어 있는 2,3-dihydro-benzofuran, 4-hydroxy-3-methoxy- benzoic acid와 4-hydroxy benzeneethanol 등의 성분들이 검출되었다.
While searching for healthier diets, people became more attentive to agricultural organic products. However, organic foods may be more susceptible to microbiological contamination because of the use of livestock manure compost and liquid manure, potential sources of pathogenic bacteria. This study was undertaken to investigate the persistence of Salmonella enterica, Escherichia coli O157:H7, and Listeria monocytogenes in soil, liquid manure amended soil, and liquid manure. Loamy soil, liquid manure amended soil, and liquid manure were inoculated with S. enterica, E. coli O157:H7, and L. monocytogenes. Samples were incubated in consistent moisture content at $25^{\circ}C$. Samples had been periodically collected during 120 days depending on the given conditions. S. enterica and E. coli O157:H7 survived over 120 days in loamy soil and over 60 days in liquid manure amended soil, respectively. L. monocytogenes decreased faster than other pathogens in soil. S. enterica, E. coli O157:H7, and L. monocytogenes survived for up to 5 days in liquid manure. S. enterica and E. coli O157:H7 in soil decreased by 2 to $2.5log\;CFU\;g^{-1}$ for 120 days. S. enterica and E. coli O157:H7 in liquid manure amended soil decreased slowly for 21 days. However, S. enterica, E. coli O157:H7, and L. monocytogenes sharply decreased after 21 days. S. enterica, E. coli O157:H7, and L. monocytogenes in soil increased by 0.5 to $1.0log\;CFU\;g^{-1}$ for 7 days. Foodborne pathogens in soil and liquid manure amended soil gradually decreased over time.
Purpose: Essential oils are secondary metabolites of herbs and have antibacterial activities against foodborne pathogens. However, their applications for food protection are limited due to the hydrophobic and volatile natures of essential oils. Methods: In this study, essential oil nanoemulsions of rosemary and lavender were formulated with non-ionic surfactant Tween 80 and water using ultrasonic emulsification, and their antibacterial effects were determined. Results: The antibacterial activities of nanoemulsions were evaluated against 12 strains of 10 bacterial species, and significant antibacterial effects were observed against four Gram-positive and four Gram-negative bacteria but not against Streptococcus mutans and Shigella sonnei. In the disc diffusion test, the diameter of the inhibition zone proportionally increased with the concentration of nanoemulsions. Using cell turbidity measurement, minimum bactericidal concentration (MBC) of the nanoemulsions, which is the lowest concentration reducing viability of the initial bacterial inoculum by ${\geq}99.9%$, was significantly higher than the minimum inhibitory concentration (MIC) of the nanoemulsions. The largest bactericidal effects of lavender and rosemary essential oil nanoemulsions were observed against S. enterica and S. aureus, respectively. Conclusion: Nanoemulsion technique could improve antibacterial activity of essential oil nanoemulsions by increasing the solubility and stability of essential oils. Our findings shed light on the potential use of essential oil nanoemulsions as an alternative to chemical sanitizers in food protection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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