The stability of three different kinds of pUC-derived plasmids, pDsRed, pZsYellow, and pGFPuv, was investigated in Pectobacterium strains to utilize those plasmids as tracers. All three plasmids pDsRed, pZsYellow and pGFPuv showed their specific colors in Pectobacterium strains. Especially, the plasmid pDsRed conferred bright pink colonies on the Pectobacterium strains. When the bacteria lost the plasmid pDsRed, the colonies turned white, suggesting that the plasmid could be a good marker system for Pectobacterium strains on different environmental conditions. The effect of the antibiotic pressure on the stability of the plasmid was different depending on the host bacteria. P. carotovorum subsp. betavasculorum was more sensitive to the antibiotic pressure than P. carotovorum subsp. carotovorum Pcc21. However, temperature change significantly affected plasmid stability on both Pectobacterium strains. Almost all strains lost the plasmids with the shift in temperature from $28^{\circ}C$ to $37^{\circ}C$. Presence of the plasmids did not affect bacterial pathogenicity on their own host plants. Among three plasmids, pZsYellow was not useful as a marker because the yellow fluorescent proteins from pZs Yellow were interfered with the yellow natural fluorescence of the plant tissues induced by the defense system. Since the red color of DsRed can be seen with naked eyes, plasmid pDsRed was applicable as a marker. However, the color change was slow so that additional manipulation to increase the expression speed was necessary. Plasmid pGFPuv could serve as a perfect marker without any problem, tracing the reproduction and spread of the plant pathogens perfectly.
Choi, Won Suk;Seo, Ho Suk;Song, Kyo Young;Yoon, Jung Hwan;Kim, Olga;Nam, Suk Woo;Lee, Jung Yong;Park, Won Sang
Journal of Gastric Cancer
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v.13
no.4
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pp.232-241
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2013
Purpose: Gastrokine 1 plays an important role in gastric mucosal defense. Additionally, the Gastrokine 1-miR-185-DNMT1 axis has been shown to suppress gastric carcinogenesis through regulation of epigenetic alteration. Here, we investigated the effects of Gastrokine 1 on DNA methylation and gastritis. Materials and Methods: Expression of Gastrokine 1, DNMT1, EZH2, and c-Myc proteins, and the presence of Helicobacter pylori CagA protein were determined in 55 non-neoplastic gastric mucosal tissue samples by western blot analysis. The CpG island methylation phenotype was also examined using six markers (p16, hMLH1, CDH1, MINT1, MINT2 and MINT31) by methylation-specific polymerase chain reaction. Histological gastritis was assessed according to the updated Sydney classification system. Results: Reduced Gastrokine 1 expression was found in 20 of the 55 (36.4%) gastric mucosal tissue samples and was closely associated with miR-185 expression. The Gastrokine 1 expression level was inversely correlated with that of DNMT1, EZH2, and c-Myc, and closely associated with the degree of gastritis. The H. pylori CagA protein was detected in 26 of the 55 (47.3%) gastric mucosal tissues and was positively associated with the expression of DNMT1, EZH2, and c-Myc. In addition, 30 (54.5%) and 23 (41.9%) of the gastric mucosal tissues could be classified as CpG island methylation phenotype-low and CpG island methylation phenotype-high, respectively. Reduced expression of Gastrokine 1 and miR-185, and increased expression of DNMT1, EZH2, and c-Myc were detected in the CpG island methylation phenotype-high gastric mucosa. Conclusions: Gastrokine 1 has a crucial role in gastric inflammation and DNA methylation in gastric mucosa.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.10
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pp.1317-1323
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2009
In the present study, we investigated the anti-proliferation activity of Citrus grandis Osbeck peel (CGP) in HL60 (human promyelocytic leukemia) cells. It was found that 80% ethanol extract of CGP could inhibit the cell growth in a dose-dependent manner ($250{\sim}1,000{\mu}g/mL$), which was associated with morphological changes and apoptotic cell death such as depolarized mitochondrial membrane, formation of apoptotic bodies and increased populations of apoptotic sub-G1 phase. The results indicate that CGP extract inhibits the growth of HL60 cancer cells by the induction of apoptosis, which may be mediated by its ability to change the Bcl family proteins and increase the activation of caspase-3 and PARP. Therefore, it is suggested that CGP has the potential to provide a remarkable natural defense against the proliferation of HL60 cells.
Park, Choul-Ji;Min, Byung-Hwa;Kim, Kwan-Sock;Lee, Jang-Wook;Lee, Jeong-Ho;Noh, Jae-Koo;Kim, Hyun-Chul;Park, Jong-Won;Myeong, Jeong-In
The Korean Journal of Malacology
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v.27
no.4
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pp.317-322
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2011
This study was performed to obtain the basic data on physiological responses of low water temperature stress of the cultured Pacific abalone, Haliotis discus hannai. Abalones were exposed at low water temperatures of $7^{\circ}C$ and $4^{\circ}C$. We have investigated survival rate, superoxide dismutase (SOD) activity and total protein (TP) in the abalone by the exposure times (0, 3, 6, 12, 24, 72, 120, 168 and 216 hours). Survival rate of the abalone at $7^{\circ}C$ experiment was 90.8%, whereas at $4^{\circ}C$ experiment was 0% after exposure 10 days. SOD activity was significantly increased until 12 hours after exposure to $4^{\circ}C$, and then was recovered to starting level after 24 hours. However, there was no significant difference between control ($12^{\circ}C$) and $7^{\circ}C$ experiments. TP was significantly increased until 216 hours after 24 hours at $4^{\circ}C$ experiment, but $7^{\circ}C$ experiment showed no significant differences compared to control ($12^{\circ}C$) experiment. Therefore, H. discus hannai was acclimated in low water temperature stress at $7^{\circ}C$, but at $4^{\circ}C$, all abalone died possibly because they exceed the limits of defense ability to too low temperature.
Heo, Seok-Mo;Lee, Sol;Wang, HongTao;Jeong, Jeong Hyeok;Oh, Sang Wook
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.46
no.5
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pp.320-328
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2016
Purpose: Human saliva, as a vital part of the immune defense system, contains a number of distinct proteins and peptides. Recently human common salivary protein 1 (CSP1) has been identified as an abundant salivary protein and may play a role in promoting the binding of cariogenic bacteria to salivary pellicles. However, nothing else is known regarding the role of CSP1 in periodontology. The aim of this study was to quantify and compare CSP1 levels between healthy subjects and periodontal patients. Methods: This controlled clinical study was conducted in periodontally healthy individuals and patients with chronic periodontitis Chonbuk National University Hospital, with Institutional Review Board approval. Whole saliva samples were collected from 36 healthy subjects and 33 chronic periodontitis patients and analyzed. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and immune blotting were conducted to ensure that anti-CSP1 monoclonal antibody (mAb) binds to CSP1 in human saliva. A sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) system was house-fabricated using mAb-hCSP1#14 and mAb-hCSP1#4 as a capture and a detector mAb, respectively. The CSP1 concentrations in saliva from 36 healthy subjects and 33 periodontal patients were quantified using the CSP1 sandwich ELISA system, and the results were analyzed using the Student's t-test. Results: Immunoblot analysis using mAb-hCSP1 as a probe confirmed that CSP1 in human saliva existed as a single band with a molecular weight of approximately 27-kDa. The quantification of CSP1 concentrations by CSP1 ELISA showed that the median values (25th to 75th percentiles) of periodontal patients and healthy subjects were 9,474 ng/mL (range, 8,434.10,139 ng/mL) and 8,598 ng/mL (range, 7,421.9,877 ng/mL), respectively. The Student's t-test indicated the presence of a statistically significant difference between the 2 groups (P=0.024). Conclusions: The presence of a significant difference in CSP1 levels between healthy subjects and periodontal patients suggests that CSP1 may be a potential biomarker for the detection or screening of periodontitis patients.
Calmodulin (CaM), a $Ca^{2+}$ binding protein in eukaryotes, mediates cellular $Ca^{2+}$ signals in response to a variety of biotic and abiotic external stimuli. The $Ca^{2+}$-bound CaM transduces signals by modulating the activities of numerous CaM-binding proteins. As a CaM binding protein, AtCBP63 ($\b{A}$rabidopsis thaliana $\b{C}$aM-binding protein $\underline{63}$ kD) has been known to be positively involved in plant defense signaling pathway. To investigate the pathogen resistance function of AtCBP63 in potato, we constructed transgenic potato (Solanum tuberosum L.) plants constitutively overexpressing AtCBP63 under the control of cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter. The overexpression of the AtCBP63 in potato plants resulted in the high level induction of pathogenesis-related (PR) genes such as PR-2, PR-3 and PR-5. In addition, the AtCBP63 transgenic potato showed significantly enhanced resistance against a pathogen causing bacterial soft rot, Erwinia carotovora ssp. Carotovora (ECC). These results suggest that a CaM binding protein from Arabidopsis, AtCBP63, plays a positive role in pathogen resistance in potato.
Selenium (Se), which is natural materials existing was known as an important component of selenoprotein, one of the important proteins responsible for the redox pump of a living body. Selenium was orally administered to Rat and irradiated with 10 Gy of radiation. Then, the thyroid gland was used as a target organ for 1 day, 7 days and 21 days to investigate the radiation protection effect of selenium (Se) through changes of blood components, thyroid hormones (T3, T4), antioxidant enzyme (GPx) activity and thyroid tissue changes. As a result, there was a significant protective effect of hematopoietic immune system(hemoglobin concentration, neutrophil, platelet)(p<0.05). The activity of Glutathione Peroxidase (GPx), the antioxidant enzyme, and the activity of the target organ, thyroid hormone (T3, T4), also showed significant activity changes (p<0.05). In the observation of tissue changes, it was confirmed that there was a protective effect of thyroid cell damage which caused the cell necrosis by radiation treatment. Therefore, it is considered that selenium(Se) can be utilized as a radiation defense agent by inducing immunogenic activity effect of a living body.
Abeliophyllum distichum Nakai is deciduous shrubs of flowering plant in Oleaceae. It is important plant resources and consists of one species in the world. Also the endemic plant of A. distichum has been protected and designed endangered plant in Korea. For this reason, study on the immature seeds of A. distichum (ADS) hasn't progressed. In the present study, we evaluated the antioxidant activity and inhibitory effects on proteins and mRNA levels were related in the whitening effect in B16F10 cells. ADS was effective for reaction oxygen species (ROS). ROS causes various diseases such as aging, inflammation, cancer, and etc. Antioxidant properties were evaluated DPPH, ABTS radical scavenging activity and Reducing power. Plants were known that contained phenolic compounds were related in antioxidant activity. Phenolic compounds were phytochemicals commonly named natural polyphenols. These are secondary metabolites of plants involved in the defense against different types of stresses. In results, ADS suppressed the expression and transcription of Tyrosinase, TRP-1, TRP-2, and Microphthalmia-associated transcription factor (MITF). Tyrosinase, tyrosinase-related protein 1 (TRP-1), tyrosinase-related protein 1 (TRP-2) are known to play an important role in melanin biosynthesis. MITF regulated the expression and transcription of Tyrosinase, TRP-1, and TRP-2. In conclusion, ADS was effective in both antioxidant activities and whitening effects. Also, they were associated with the content of phenolic compounds. We suggested that ADS can be use antioxidants and skin-whitening functional cosmetics material derived from natural plant resources.
Multidrug-resistant super bacterial, fungal, viral, and parasitic infections are major health threaten pathogens. However, to overcome the present healthcare situation, among the leading alternatives to current drugs are antimicrobial peptides (AMPs), which are abundantly produced via various species in nature. AMPs, small host defense proteins, are in charge of the innate immunity for the protection of multicellular organisms such as fish, amphibian, reptile, plants and animals from infection. The number of AMPs identified per year has increased steadily since the 1980s. Over 2,000 natural AMPs from bacteria, protozoa, fungi, plants, and animals have been listed into the antimicrobial peptide database (APD). The majority of these AMPs (>86%) possess 11–50 amino acids with a net charge from 0 to +7 and hydrophobic percentages between 31–70%. This report classified AMP into several categories including biological source, biological functions, peptide properties, covalent bonding pattern, and 3D structure. AMP functions not only antimicrobial activity but facilitates cell biological activity such as chemotatic activity. In addition, fibroblastic reticular cell (FRC) originated from mouse lymph node stroma induced the expression of AMP in inflammatory condition. AMP induced from FRC contained whey acidic protein (WAP) domain. It suggests that the classification of AMP will be done by protein domain.
Lignin is a complex phenylpropanoid polymer abundant in the cell walls of vascular plants. It is mainly presented in conducting and supporting tissues, assisting in water transport and mechanical strength. Lignification is also utilized as a defense mechanism against pathogen infection or wounding to protect plant tissues. The monolignol precursors of lignin are synthesized by cinnamyl alcohol dehydrogenase (CAD). CAD catalyzes cinnamaldehydes to cinnamyl alcohols, such as p-coumaryl, coniferyl, and sinapyl alcohols. CAD exists as a multigenic family in angiosperms, and CAD isoforms with different functions have been identified in different plant species. Multiple isoforms of CAD genes are differentially expressed during development and upon environmental cues. CAD enzymes having different functions have been found so far, showing that one of its isoforms may be involved in developmental lignification, whereas others may affect the composition of defensive lignins and other wall-bound phenolics. Substrate specificity appears differently depending on the CAD isoform, which contributes to revealing the biochemical properties of CAD proteins that regulate lignin synthesis. In this review, details regarding the expression and regulation of the CAD family in lignin biosynthesis are discussed. The isoforms of the CAD multigenic family have complex genetic regulation, and the signaling pathway and stress responses of plant development are closely linked. The synthesis of monolignol by CAD genes is likely to be regulated by development and environmental cues as well.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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