In this study, we analyzed the phylogenetic classification, epitope prediction, and pathogenicity of red sea bream iridovirus (RSIV) isolated from rock bream between 2019 and 2023. Phylogenetics based on genes encoding MCP and ATPase indicated that all five RSIV isolates belonged to RSIV subtype II. The deduced amino acid sequence of the MCP for the amplicons (1362 bp) obtained from RSIV isolates had a length of 453 amino acids. Among these, the amino acid sequences of the RSIV-19, 21, 22, and 23 isolates showed 100% identity, while the RSIV-20 isolate showed 99.78% identity with one residue difference at position 306. As a result of antigenicity analysis based on amino acid sequence, the antigenicity score of the RSIV-20 isolate was 0.6386 and the other RSIV isolates were 0.6365. Additionally, the prediction of their antigenic determinants resulted in a total of 17 identical antigenic plots. When each RSIV was inoculated into rock bream, no significant differences were observed with 100% cumulative mortality in all groups. This study provides data on the potential for genetic variation of RSIV isolated in the same marine area over the past five years, and the antigenicity and pathogenicity results of each isolate are expected to be useful information for selecting future vaccine strains.
Kim, Yu-Jin;Lee, Jung-Hye;Jung, Dae-Young;Sathiyaraj, Gayathri;Shim, Ju-Sun;In, Jun-Gyo;Yang, Deok-Chun
The Plant Pathology Journal
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제25권4호
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pp.400-407
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2009
A pathogenesis-related protein (PgPR5) gene that isolated from the leaf of Panax ginseng was characterized. The ORF is 756 bp with a deduced amino acid sequence of 251 residues. The calculated molecular mass of the matured protein is approximately 27.5 kDa with a predicated isoelectric point of 7.80. A GenBank BlastX search revealed that the deduced amino acid of PgPR5 shares highest sequence similarity to PR5 of Actinidia deliciosa (80% identity, 87% similarity). PgPR5 has a C-terminal and N-terminal signal peptide, suggesting that it is a vacuolar secreted protein. The expression of PgPR5 under various environmental stresses was analyzed at different time points using real-time PCR. Our results reveal that PgPR5 is induced by salt stress, chilling stress, heavy metal, UV, and pathogen infection. These results suggest that the PgPR5 could play a role in the molecular defence response of ginseng to abiotic and pathogen attack. This is the first report of the isolation of PR5 gene from the P. ginseng.
Kim, Yu-Jin;Lee, Jung-Hye;Lee, Ok-Ran;Shim, Ju-Sun;Jung, Seok-Kyu;Son, Na-Ri;Kim, Ju-Han;Kim, Se-Young;Yang, Deok-Chun
Journal of Ginseng Research
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제34권4호
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pp.296-303
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2010
A peroxiredoxin cDNA (PgPrx) was isolated and characterized from the leaves of Panax ginseng. The cDNA is 716 nucleotides long and has an open reading frame of 489 base pairs with a deduced amino acid sequence of 162 residues. The calculated molecular mass of the mature protein is approximately 17.4 kDa with a predicted isoelectric point of 5.37. A GenBank BlastX search revealed that the deduced amino acid sequence of PgPrx shares a high degree homology with type II peroxiredoxin (Prx) proteins in other plants. The PgPrx gene was highly expressed in leaves, and expressed at a low level in the stem. To analyze the gene expression of PgPrx in response to various abiotic stresses, we utilized real-time quantitative RT-PCR. Our results reveal that PgPrx expression is induced by ultraviolet irradiation, low temperature, and salt. The induction of PgPrx in response to abiotic stimuli suggests that ginseng Prx may function to protect the host against environmental stresses.
더덕의 뿌리로부터 aluminum스트레스와 관련이 있는 aluminum induce protein(ClAIP)유전자를 분리하였다. ClAIP 유전자의 염기서열를 분석한 결과 906 bp 길이로, 236개의 아미노산으로 번역되는 711bp의 ORF를 가지고 있으며, A. marina(84%), G. hirsutum(84%), V. radiata(83%), A. thaliana(80%), B. hapus(78%), T. aestivum(68%) 등 다른 식물에서 밝혀져 있는 aluminum induce protein과 높은 상동성을 나타내었고, N-terminal에는 Asn synthetase영역이 존재하고 있다. 더덕에서 분리한 aluminum induced protein(ClAIP)을 aluminum처리 농도와 시간에 따른 ClAIP유전자의 발현양상을 알아보고자 50uM $Al^{3+}$ 를 처리 후 시간대별로 RT-PCR을 수행한 결과 시간이 지남에 따라 ClAIP유전자의 발현이 증가되는 것으로 나타났다 중금속, 염 , 온도에 대한 유전자의 발현양상을 조사하기 위 해 50uM CdCl,$_2$, 20 uM CuSO$_4$, 50uM Fe$_2$O$_3$, 100 uM NaCl를 2일과 42$^{\circ}C$에서 4시간 처리 후 발현량을 조사한 결과 카드뮴(Cd)에 대해서 특이적으로 반응하는 것으로 나타났다.
A Lactobacillus sp. has been isolated from infant feces and characterized according to its physiological properties and identified as Lactobacillus acidophilus KLA1012. A gene coding surface layer protein (SLP) has been cloned and the sequence has been determined. The nucleotide sequence of slpA was 1,338 bp in size and was identical to that of L. acidophilus ATCC 4356 (100%). Amino acid sequence of SLP-A was deduced from the nucleotide sequence and it had signal sequence at N-terminal, consisting of positively charged amino acid mainly lysine. slpA was cloned and heterologously expressed in E. coli M15 and the 45.2 kDa surface-layer protein band was examined by SDS-PAGE and confirmed by Western blotting using polyclonal antibody against L. acidophilus KLA 1012 SLP-A protein.
Xanthobacter flavus strain UE15 was isolated in wastewater obtained from the Ulsan industrial complex, Korea. This strain functions as a 1,2-dichloroethane (1,2-DCA) degrader, via a mechanism of hydrolytic dechlorination, under aerobic conditions. The UE15 strain was also capable of dechlorinating other chloroaliphatics such as 2-chloroacetic acid and 2-chloropropionic acid. The dhlA gene encoding 1,2-DCA dechlorinase was cloned from the genomic DNA of the UE15 strain, and its nucleotide sequence was determined to consist of 933 base pairs. The deduced amino acid sequence of the DhlA dechlorinase exhibited 100% homology with the corresponding enzyme from X. autotrophicus GJ10, but only 27 to 29% homology with the corresponding enzymes from Rhodococcus rhodochrous, Pseudomonas pavonaceae, and Mycobacterium sp. strain GP1, which all dechlorinate haloalkane compounds. The UE15 strain has an ORF1 (1,356 bp) downstream from the dhlA gene. The OFR1 shows 99% amino acid sequence homology with the transposase reported from X. autotrophicus GJ10. The transposase gene was not found in the vicinity of the dhlA in the GJ10 strain, but rather beside the dhlB gene coding for haloacid dechlorinase. The dhlA and dhlB genes were confirmed to be located at separate chromosomal loci in the Xanthobacter flavus UE15 strain as well as in X. autotrophicus GJ10. The dhlA and transposase the UE15 strain were found to be parenthesized by a pair of insertion sequences, 181247, which were also found on both sides of the transposase gene in the GJ10 strain. This unique structure of the dhlA gene organization in X. flavus strain UE15 suggested that the dechlorinase gene, dhlA, is transferred with the help of the transposase gene.
This study examined the expression of heat shock protein 70 (Hsp70) in red seabream Pagrus major infected by the, acanthocephalan parasites Longicollum pagrosomi. We cloned the full-length Hsp70 cDNA from the liver of the red seabream. The full-length cDNA had a 1,950 bp open reading frame (ORF) that encoded a protein of 650 amino acids. The deduced amino acid sequence of Hsp70 contained all of the conserved Hsp70 family signature sequences and an adenosine triphosphate (ATP)/guanosine triphosphate (GTP) binding motif, including the EEVD (consensus sequence that terminates in Hsp70 family) consensus sequence. The expression of Hsp70 mRNA was upregulated int the fish head-kidney and liver, as determined by quantitative real-time PCR. We quantified the Hsp70 mRNA expression in normal red seabream and fish infected fish by L. pagrosomi. The expression of Hsp70 mRNA was significantly higher in the infected red seabream. These results suggest that Hsp70 play a role of protection against stress and inflammation caused by the parasite and may help maintain homeostasis.
Among the panel of monoclonal antibodies (mAb) against Toxoplasma gondii, mAb of Tg621 (Tg621) clone blotted 38 kDa protein which localized in the cytoplasm of tachyzoites by immunofluorescence microscopy The protein was not released into the parasitophorous vacuole during or after invasion. The cDNA fragment encoding the protein was obtained by screening a T. gondii cDNA expression library with Tg621. The full length cDNA sequence was completed with 5’-RACE as 1,592 bp, which contained open reading frame of 942 bp. The deduced amino acid sequence of Tg621 consisted of a polypeptide of 313 amino acids, with significant homology to ribosomal P proteins (RPP) of other organisms especially high to those of apicomplexan species. The expressed and purified TgRPP was assayed in western blot with the sera of toxoplasmosis patients and normal sera, which resulted in the 74.0% of positive reactions in toxoplasmosis patients whereas 8.3% in normal group. Therefore, the antibody formation against TgRPP in toxoplasmosis patients was regarded as specific for T. gondii infection and suggested a potential autoantibody.
Rhodopsin, a dim-light receptor, is a model system for the study of G protein-coupled receptors that transduce extracellular signals into cells. To study the molecular mechanisms of visual systems in fish, the rod opsin gene of olive flounder Paralichthys olivaceus was characterized. The full-length P. olivaceus opsin gene was obtained by PCR amplification of genomic DNA, as well as cDNA synthesis. A comparison of clones obtained from both methods indicated that the olive flounder rod opsin gene lacks introns. Sequence analysis of the opsin gene indicated that it contains a 1,056-bp open reading frame encoding 352 amino acids. The deduced amino acid sequence contains features of typical rod opsins, such as sites for Schiff's base formation (K296) and its counterion (E113), disulfide formation (C110 and C187), and palmitoylation (C322 and C323). An opsin sequence alignment showed the highest similarity between P. olivaceus and Solea solea (95.1%), followed by Hippoglossus hippoglossus (94.5%). An opsin phylogenetic tree revealed a close relationship between olive flounder and teleost rod opsins.
The entire nucleotide sequence of the xylose reductase (XR) gene in Candida milleri CBS8195 sourdough yeast was determined by degenerate polymerase chain reaction (PCR) and genome walking. The sequence analysis revealed an open-reading frame of 981 bp that encoded 326 amino acids with a predicted molecular mass of 36.7 kDa. The deduced amino acid sequence of XR of C. milleri was 64.7% homologous to that of Kluyveromyces lactis. The cloned XR gene was expressed in Saccharomyces cerevisiae, and the resulting recombinant S. cerevisiae strain produced xylitol from xylose, indicating that the C. milleri XR introduced into S. cerevisiae is functional. An enzymatic activity assay and semiquantitative reverse transcription-PCR revealed that the expression of CmXR was induced by xylose. The GenBank Accession No. for CmXR is KC599203.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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