천연물을 이용하여 생리활성이 있는 성분을 추출 분리하여 그 유효 성분을 탐색함으로써 질병 예방 및 치료제로 이용하고자 하는 연구가 최근 활발히 진행되고 있다. 본 연구에서는 예부터 혈액 순환을 돕고, 지혈 작용에 효과가 있는 것으로 알려져 있는 식탁에 상용되는 야채인 부추를 이용하여 4종의 인체 암세포주인 HepG2, HeLa, MCF7 및 SK-N-MC를 이용하여 암세포 증식억제 및 암예방 QR 유도활성 효과를 측정하였다. MTT assay를 이용한 암세포 증식억제 실험 결과, 4종의 암세포주 모두 ethylether층인 ATMEE에서 아주 높은 농도 의존적이 암세포 증식억제 효과를 보였다. 즉 본 실험에 사용된 인체 암세포주 4종에서 시료의 농도가 $150\;{\mu}g/mL$일 때 각 세포주 모두 약 90% 이상의 높은 암세포 증식억제 효과가 나타났으며, 특히 신경아종세포주인 SK-N-MC 에서는 ethylether층의 시료 농도를 다른 층을 첨가시의 농도보다 적은 $100\;{\mu}g/mL$ 첨가에서도 이미 99.8%의 아주 높은 암세포 증식억제 효과를 나타내었다. 또 신경아종세포인 SK-N-MC에서는 ethylacetate층인 ATMEA의 경우에서도 최종 첨가 시료농도를 $200\;{\mu}g/mL$ 첨가했을 때 이미 91%의 높은 암세포 증식억제 효과가 나타났다. 암예방 quinone reductase(QR) 유도활성을 측정한 결과, 시료의 butanol 분획물 ATMB를 $50\;{\mu}g/mL$ 첨가했을 때 시료무처리구인 대조군을 1.0으로 한 경우 암예방 QR유도 효과가 아주 높은 3.92배의 활성이 나타났다. 본 연구 결과, 인체암세포 4종류에 대한 암세포 증식억제(cytotoxicity) 효과는 부추의 ethylether 분배층(ATMEE)에서 제일 뚜렷하였고, 암예방 QR 유도활성 효과는 butanol 분배층(ATMB)에서 가장 유도효과가 좋았다. 나아가 단계적인 생리활성 물질의 분리 동정이 계속 이루어져야 할 것으로 사료된다.
Objectives: This study was conducted to confirm the anticancer effect of Torilis Japonica (TJ) on cervical cancer and to determine whether the effect was apoptosis. Methods: In this study, the effect of TJ extract on toxicity, mitochondrial morphology, nuclear morphological changes, Extracellular signal-regulated kinase (ERK) and p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway were investigated in HeLa cell, human cervical cancer cell. Results: The cytotoxicity, ratio of cells with nuclear changes to the total number of cells, and P38 phosphorylation increased in a concentration-dependent manner after administration of TJ extract. The length of mitochondria and ERK phosphorylation in HeLa cells decreased in a concentration-dependent manner after administration of TJ extract. Conclusions: TJ extract has an anticancer effect on cervical cancer cells, which is presumed to be due to apoptosis, and showed potential as a future cervical cancer treatment.
식품중에서 분리한 Penicillium 속에 대하여 Hela cell과 ICR-mouse를 이용한 독성 여부를 관찰하였던 바 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 총 실험균주 Penicillium 속 31주 가운데 Helacell에 대하여 독성을 나타내는 균주는 9주(P-32, P-47, P-56. P-63, P-66, P-67, N$_1$-3, N$_1$-12 및 RC-8)이었다. 2. 실험균주중 ICR-mouse에 대하여 독성 및 병변을 유발한 것은 31주 중에서 7주(P-32, P-63, P-66, P-67, $N_2$-1 N$_1$-2 및 RC-8)이였다. 3. Hela cell을 이용하여 진균의 유독성 여부를 screering 하는것은 가능한 방법이라고 생각된다.
산천어 70% 에탄올 추출물(MSE)이 암세포 성장억제와 Balb/c 마우스에서의 종양 성장 억제에 미치는 영향을 알아보았다. 인간 자궁암(HeLa), 간암(HepG2), 유방암(MCF-7), 위암(AGS), 폐암(A549) 세포 그리고 인간신장 정상세포 (293)에 MSE을 처리했을 때 세포생존율이 감소하였고 이들 감소율을 MTT assay로 알아보았다. MSE는 정상세포 293에서보다 인간 암세포주인 MCF-7, A549, HepG2, AGS 그리고 HeLa세포에서 현저하게 더 높은 세포독성이 나타났다. 시료 최고농도인 1 mg/mL를 인간 폐암세포(A549), 유방암세포(MCF-7), 간암세포(HepG2) 및 위암세포(AGS)에 처리한 결과 각각 9.2%, 12.7%, 14.6% 및 16.9%의 세포 생존율을 나타내었다. 더하여 복수암 세포(sarcoma-180)를 이용한 실험동물(Balb/c mice)에서의 고형암 성장 억제 효과를 알아보았으며, 각각 25 mg/kg body weight와 250 mg/kg body weight의 MSE를 투여하였을 때 종양 성장 억제율은 각각 44.7%와 55.7%였다. 따라서 우리는 MSE가 암 예방을 위해 인간에게 유익한 기능성 소재일 것이라는 것을 제안하였다.
This study was performed to determine the antimutagenic and cytotoxic effect of the Phellinus linteus methanol extract on Salmonella typhimurium TA98, TA100 and human cancer cell lines. In the Ames test, methanol extract of P. linteus alone did not exhibit any mutagenicity but showed substantial inhibitory effects against mutation induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG), 4-nitroquinoline-nitroquinoline-1-oxide(4NQO), 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrdo[4,3-blindol(Trp-P-1) and benzo(α)pyrene(B(α)P). The methanol extracts of P. linteus(200㎍/plate) showed approximately 78.3%, 78.7% and 88.1% inhibitory effect on the mutagenesis induced by 4NQO, Trp-P-1 and B(α)P. The anticancer effects of P. linteus extract against human breast adenocarcinoma(MCF7), human lung carcinoma (A549), human fibrosarcoma (HT1080), human hepatocelular carcinoma (Hep3B) and human epitheloid carcinoma (HeLa) were investigated. The treatment of 1mg/mL P. linteus extracts had the highest cytotoxicity against MCF7 (92.0%), followed by Hep3B (84.9%), A549 (84.2%) and HT1080 (82.9%). In contrast 1mg/mL treatment of P. linteus extracts had only 10∼40% cytotoxicity on normal human liver cell (WRL68).
The purpose of this research was to investigate the effect of reaction-precipitate from Coptidis Rhizoma and Glycyrrhizae Radix aqueous mixture(CGP) on the cytotoxicity. The effects of CGP on the growth of tumor cells, Balb/c 3T3 cell, mouse spleen cell and human lymphocyte were compared with those of berberine, glycyrrhizin and berberine glycyrrhizinate(BG), which were estimated by MTT colorimetric assay or cell counting. CGP, berberine and BG inhibited the growth of several tumor cells, such as Hep G2, A549, Raji, MCF-7, HeLa and KHOS-NP. Whereas, glycyrrhizin inhibited the growth of Raji and MCF-7, CGP did not affect on Balb/C 3T3 cells, mouse spleen cells and human lymphocyte at $10^{-6}{\sim}10^{-5}g/ml$. CGP increased the number of leukocyte in mice. This results indicate that CGP have the inhibitory action of the growth of human tumor cells, and the side effect of CGP is less than berberine and BG.
The anti-Helicobacter pylori activity, cytotoxicity, and anti-inflammatory activity of white ginseng extract (WGE) were investigated in vitro in this study. The antimicrobial effects of WGE toward H. pylori strains 52 J99, SSI, and 51 were tested using the disk diffusion method. Among these H. pylori strains, H. pylori 52 was the most sensitive, having the largest inhibition zone (19 mm), followed by J99, SSI, and 51. The zone of inhibition due to WGE increased significantly with increasing dosage. The cytotoxicity of WGE toward the human cancer cell lines A-549 (human lung carcinoma), HEC-1-B (human endometrial adenocarcinoma), HeLa (human uterin adenocarcinoma), and SW-156 (human kidney carcinoma) was measured using the 3-(4,5-dimethylthizol-2-yl)-2,5-diphenylate-tetrazolium bromide (MTT) assay. WGE exhibited an inhibitory effect on cell growth at 2.0 mg/mL for all tumor cell lines. An analysis of anti-inflammatory activity using the RAW 264.7 cell line showed that the inhibition of nitric oxide (NO) production increased as the WGE content increased. These results demonstrate the potential of WGE to be used as a health-promoting substance.
본 연구는 다른 산채류에 비해 칼슘이 칼슘이 특히 많은 우수한 식품으로 예부터 물김치나 겉절이 무침, 돌나무 김치로 많이 이용되어온 돌나물의 암세포 증식억제 및 암예방 효과를 검색하고 나아가 도라지 추출물과의 암세포 증식억제 상승효과를 보기 위하여 실시하였다. 돌나물의 암세포 증식억제 효과를 MTT assay로 실험한 결과, 3종의 암세포주(HepG2, HeLa, MCF-7) 모두 돌나물의 ethylether 분획층(SSMEE)에서 아주 높은 암세포 증식억제 효과를 보였으며, ethylacetate 분획층(SSMEA)에서도 유의적인 암세포 증식억제 효과를 나타내었다. 또한, 돌나물 분획물의 암예방 QR유도 활성을 HepG2 세포주를 이용하여 실험한 결과, 다른 분획층에 비해 비극성 용매층인 ethylether 분획층(SSMEE)과 hexane 분획층(SSMH)에서 유의적으로 QR유도 활성을 증가시키는 것으로 나타났다. 한편, 돌나물과 도라지와의 일정비 조합을 통해 상승효과를 본 결과, $IC_{50}$/이 되는 도라지의 butanol층 (PGMB)dfm 일정량 첨가했을 때 용매별 돌나물의 분획층 모두에서 암세포 증식억제를 상승시키는 효과를 나타내었고, 암예방 QR 유도활성 효과도 훨씬 상승하였으므로, 돌나물 조리시 유사한 부재료를 사용하는 도라지의 성분을 일정량 첨가하여 겉절이 무침이나 김치로 이용될 때 돌나물 성분의 생리활성 효과가 더욱 상승될 것으로 사료되며, 이후 돌나물의 생리활성 물질 구조 및 기전 규명에 유익한 자료가 될 것으로 사료된다.
An Actinomycete strain isolated from Mt. Dea-Dun had a strong antifungal activity. The culture brith produced by isolated strain showed only antifungal activity against fungi with the exception of yeast and bacteria. It was heat stable, dissolved in ehtylacetate. The concentrated antifungal agent showed cytotoxicity against HEP-2 and HeLa as tumor cell line, and showed weak cytotoxicity against VERO 36 as normal cell line. Morphological and physiological characteristics were tested with isolated strain. The spore color of isolated strain was gray. It had a short chain and produced brown colored lytic substance in yeast extract-malt agar. The cell wall of isolated strain was composed of meso-DAP, and we suggested it as genus Actinomadura. In the existing of chemical inhibitor, isolated strain grew on the condition of 0.0001% crystal violet, 0.1% phenol, 0.01% sodium azide and 10% sodium chloride. Carbon utilization of isolated strain was shown that glucose, sucrose, manitol and sodium citrate were well utilized.
예부터 약용 또는 식용으로 쓰였으며, 사람의 체질을 강하게 하고, 혈관연화, 콜레스테롤 저하작용 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있는 구기자를 추출, 분획하여 4종의 암세포 주(HepG2, HeLa, MCF-7, C6)를 이용하여 암세포 증식억제 실험을 한 결과, 4종의 암세포주 모두에게 구기자의 ethyl-ether층(LFMEE)이 아주 높은 암세포 증식억제 효과가 나타났으며, 특히 유방암세포주인 MCF-7에서도 hexane층 (LFMH)에서 아주 높은 암세포 증식억제 효과가 나타났다. 한편, 인체 간암세포인 HePG2를 이용하여 quinone reductase 효소 유도 활성 여부를 측정한 결과 분획물 첨가농도 100 $\mu\textrm{g}$/mL에서 1.85배의 높은 효과가 나타났다. 구기자에 미치는 비타민 C의 암세포 성장억제 상승효과를 실험한 결과, 구기자와 비타민 C를 각각 혼합 처리시 낮은 농도에서도 아주 높은 암세포 증식억제 효과가 나타났다. 즉, HeLa와 MCF-7 암세포주에서도 정도의 차이는 있었으나, 구기자 성분과 비타민 C의 조합에 의해 암세포 증식이 억제 또는 사멸되는 나타났으며 본 연구에서 사용한 2종류의 암세포주 모두 구기자와 비타민 C 혼합물의 투여로 인해 증식억제가 현저히 상승됨을 보여주었다. 본 실험을 통해, 구기자의 hexane층(LFMH)과 ethylether층(LFMEE)에서 높은 암세포 증식억제 효과와 암예방 효과가 있는 것으로 추정되며, 비타민 C와 함께 첨가했을 때 낮은 농도의 첨가 시료에서도 높은 암세포 증식억제 상승효과가 나타났음을 알 수 있었다. 구기자의 항암 효과를 상승시키기 위해서는 비타민 C 일정량을 함께 첨가하는 것이 효과적임을 본 실험 결과를 통해 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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