• Journal of Animal Science and Technology
• /
• 제46권4호
• /
• pp.547-554
• /
• 2004

텔로미어란 진핵세포에 존재하는 DNA-protein 복합체로서 염색체의 말단부에 tandem repeated DNA 서열(TTAGGG)n과 특정 단백질로 구성되어 있으며 세포 분열이 진행함에 따라 이의 길이가 짧아지게 되고 일정 길이 이하가 되면 세포의 사망이 유기된다. 텔로미어의 역할은 게놈의 보호자로서 염색체의 안정성에 본질적으로 작용할고 감수분열시 상동염색체간의 접합에 주된 작용을 하는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 소와 돼지의 성축에 대한 텔로미디어의 핵형과 각 염색체상 텔로미어의 양적 분포 양상을 제시하고자 Holstein과 Landrace를 공시하고 이들로부터 섬유아세포 배양으로 중기상을 획득한 다음 human telomeric DNA probe를 이용하여 형광접합보인법(FISH)으로 분석하였다. 실험 결과 소와 돼지의 모든 염색체의 양 말단부에 뚜렷한 텔로미어 프로브의 접합 양상을 발견할 수 있었다. 소의 경우 염색체들 간 텔로미디어의 양적 변이가 나타났으며 돼지의 경우는 모든 분석된 세포에서 특이적으로 6q1의 위치에 interstitial telomere가 존재하였다. 양적형광접합보인법(Q-FISH) 분석 결과 일부 염색체에서 한쪽 말단의 텔로미어 함량이 유의적으로 높은 것으로 분석되었고, 전체적으로 거의 모든 염색체에서 소, 돼지 공히 q-arm 말단주의 함유율이 p-arm 말단부에 비해 높은 것으로 나타났다. 또한, 염색체상 텔로미어의 상대적 함유율은 소가 돼지에 비해 높게 나타났으며, 전체 염색체 중 텔로미어의 상대적 함유율은 소, 돼지 모두 Y 염색체에서 가장 높았다.

• Journal of Animal Science and Technology
• /
• 제51권2호
• /
• pp.163-170
• /
• 2009

초유는 신생 송아지에게 완전식품으로 제공된다. 반추동물에서 초유는 송아지에게 처음 제공되는 후천적 면역물질의 유일한 공급원이다. 따라서 초유는 반추동물의 숙주방어에서 중요한 역할을 한다. 소의 초유는 신생 송아지에게 처음 24시간 동안 수동 면역물질을 공급하고, 일반적으로 생후 처음 3일 동안 공급된다. 초유는 저장 후 사용을 위해 냉각, 냉동 또는 대기온도에서 발효 또는 화학처리에 의해 보관할 수 있다. 초유관리 조사는 경기와 충남지역에 있는 67개 낙농가로부터 자료 수집을 통하여 조사하였다. 분만 후 5일 동안 생산한 초유의 총 생산량은 평균 80.4 kg이었고, 송아지에게 급여한 포유량은 평균 20.9 kg이었다. 조사결과에 따르면, 남는 초유의 처리방법은 그냥 버린다가 17.9%, 다른 송아지 포유용으로 이용한다가 37.3%, 저장 이용한다가 22.4%, 다른 가축에게 준다가 20.9%, 기타방법으로 처리한다가 1.5%로 확인되었다. 초유의 품질향상을 위해서는 분만전후의 항생제 사용자제와 건유연고의 올바른 선택, 착유 초기동안 착유량을 증대해야 할 것으로 나타났다.

• Journal of Pharmaceutical Investigation
• /
• 제31권4호
• /
• pp.241-256
• /
• 2001

Alginate microspheres, containing fluorescein isothiocyanate-bovine serum albumin (FITC-BSA) or green fluorescent protein (GFP) were prepared and used as a model drug to develop the oral vaccine delivery system. The alginate microspheres were coated with poly-L-lysine or chitosan. Two methods, w/o-emulsion and spray, were used to prepare alginate microspheres. To optimize preparation conditions, effects of several factors on the particle size and particle morphology of microsphere, and loading efficiency of model antigen were investigated. In both preparation methods, the particle size and the loading efficiency were enhanced when the concentration of sodium alginate increased. In the w/o-emulsion preparation method, as the concentration of Span 80 was increased from 0.5% to 2%, the particle size was decreased, but the loading efficiency was increased. The higher the emulsification speed was, the smaller the particle size and loading efficiency were. The concentration of calcium chloride did not show any effect on the particle size and loading efficiency. In the spray preparation method, the particle size was increased as the nozzle pressure $(from\;1\;kgf/m^2\;to\;3\;kgf/m^2)$ and spray rate was raised. Increasing calcium chloride concentration (<7%) decreased the particle size, in contrast to no effect of calcium chloride concentration on the w/o-emulsion preparation method. Alginate microspheres prepared by two methods were different in the particle size and loading efficiency, the particle size of microspheres prepared by the spray method was about $2-6\;{\mu}m$, larger than that prepared by the w/o emulsion method $(about\;2{\mu}m)$, and the loading efficiency was also higher with spray method. Furthermore, drying process for the microspheres prepared by the spray was simpler and easier, compared with the w/o emulsion preparation. Therefore, the spray method was chosen to prepare alginate microspheres for further experiments. Release pattern of FITC-BSA in alginate microspheres was evaluated in simulated intestinal fluid and PBS (phosphate buffered saline). Dissolution rate of FITC-BSA from alginate/chitosan microsphere was lower than that from alginate microsphere and alginate/poly-L-lysine microsphere. By confocal laser scanning microscope, it was revealed that alginate/FITC-poly-L-lysine microspheres were present in close apposition epithelium of the Peyer's patches of rabbits following inoculation into lumen of intestine, which proved that microspheres could be taken up by Peyer's patch. In conclusion, it is suggested that alginate microsphere prepared by spray method, showing a particle size of & $10\;{\mu}m$ and a high loading efficiency, can be used as a model drug for the development of oral vaccine delivery system.

• 대한후두음성언어의학회지
• /
• 제16권2호
• /
• pp.113-117
• /
• 2005

Background and Objective : Vocal fold augmentation by injectable material under direct visual control is an easy and simple operation. However, when autologous fat or bovine collagen is used, the resoiption creates a problem. And autologous fascia is debating about absorption now days. We previously reported on the one year results of injected autologous auricular cartilage for volumetric augmentation in paralyzed canine vocal cord. This study evaluates the long-term histomorphologic results of injected autologous auricular cartilage for the augmentation of the paralyzed canine vocal fold at two year. Material and Methods . A prospective trial of autologous cartilage augmentation of vocal cord in animal model. Three dogs were operated upon. A piece of auricular cartilage was harvested from the ear and minced into tiny chips with a scalpel. Fat was harvested from inguinal area and minced with a scalpel. The minced cartilage and fat-paste (0.2ml) was injected using a pressure syringe into the paralyzed thyroarytenoid muscle using direct laryngoscopy. Three animals were sacrificed at 2 years. Each subject underwent laryngectomy and serial coronal sections of paraffin blocks from the posterior vocal fold were made. Results There was no significant complication perioperatively and during follow-up. The injected cartilage which appeared to have lost viability existed in the vocalis muscles until 24 months. Fibrotic change was exhibited in the surrounding injected cartilage. Conclusion : The autologous auricular cartilage graft is well tolerated and may be very effective material for volumetric augmentation on paralyzed vocal cord.

• 한국초지조사료학회지
• /
• 제18권1호
• /
• pp.61-68
• /
• 1998

본 시험은 Holstein종 수소를 조기에 외과적 거세 후 SR-rbST 투여시 사육 단계별 건물 및 영양분 섭취량 변화에 미치는 영향을 구명하기 위하여 Holstein 수소 32두를 공시 하여 얻어진 주요 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 건물 섭취량은 비거세구와 거세구는 큰 차이 가 없었지만 rbSTl구와 rbST2구는 각각 7.88kg과 7.65kg으로 비거세구와 거세구에 비해 6~9% 정도 건물 섭취량이 적었다. 2. NRC 비육우 요구량 대비 건물 섭취율은 전체 시험 기간동안 88.5~97.7%로서 요구량을 완전히 충족시키지 못하였지만, 정미 애너지 섭취율은 건물과 달리 rbST 투여구들이 비육 후기에만 약간 부족한 반면 비거세구와 거세구는 전기간 요구량에 충족되었다. 3. 체중대비 농후사료 섭취 비율은 전체 시험기간 동안 거세구가 1.94%로 가장 높았고 rbST 투여구들 이 1.87~1.89%를 섭취하여 비거세구의 1.80% 보다 높온편이었다. 4. 사료 이용 효율은 비거세구, rbSTl구 및 rbST2 구가 각각 8.29kg, 8.l8kg 및 7.60kg으로 거세구의 9.32kg 보다 12.4%, 13.9% 및 22.6%가 개선되었다.

• Journal of Dairy Science and Biotechnology
• /
• 제18권1호
• /
• pp.1-8
• /
• 2000

본 실험은 산양유 casein의 조성 및 분별 그리고 이화학적 성질에 관하여 연구하고자 산양유의 일반성분을 분석하고 초유와 정상유로 산 casein을 제조하였으며 chymosin 작용과 전기영동에 의한 분리특성 및 DEAE-cellulose column chromatography에 의한 분별을 실시하였다. 그 결과, 산양 정상유의 단백질, 지방, 유당 함량은 각각 2.70${\pm}$0.27%, 3.82${\pm}$0.51% 및 4.10${\pm}$0.29%이었으며 정상유 casein보다 초유 casein에서chymosin처리에 의해 더 많은 NPN 함량이 유리되었다. 우유 및 산양유 casein을 chymosin 처리하여 전기영동을 실시한 결과 casein 조성이 서로 다르게 나타났으며 그 분리양상 또한 차이를 보였다. 산양 정상유 casein을 0.03${\sim}$0.25 M NaCl linear gradient로 DEAE-cellulose column chromatography를 실시한 결과 명확히 분별되지 않아 농도 기울기를 달리한 0.08${\sim}$0.18 M NaCl linear gradient로 column chromatography를 실시한 결과 5개의 Peak로 분리되었고 그 비율은 각각 5.27%, 26.07%, 25.97%, 30.40%및 12.29%이었다. 또한, 순수한 동정, 특히 n-casein 분획을 확인하기 위하여 chymosin을 처리한 산양 정상유 casein을 동일한 조건에서column chromatography를 실시한 결과 6개의peak로 분리되었으며 그 비율은 각각 17.06%, 9.10%, 17.85%, 20.11%, 27.03% 및 8.85%로 나타났다.

• 한국동물번식학회:학술대회논문집
• /
• 한국동물번식학회 2001년도 발생공학 국제심포지움 및 학술대회 발표자료집
• /
• pp.37-43
• /
• 2001

1. About fifty thousand of cattle embryos were transferred and 16000 ET-calves were born in 1999. Eighty percents of embryos were collected from Japanese Black beef donors and transferred to dairy Holstein heifers and cows. Since 1985, we have achieved in bovine in vitro fertilization using immature oocytes Collected from ovaries of slaughterhouse. Now over 8000 embryos fertilized by Japanese Black bull, as Kitaguni 7 -8 or Mitsufuku, famousbulls as high marbling score of progeny tests were sold to dairy farmers and transferred to their dairy cattle every year. 2. Embryo splitting for identical twins is demonstrated an useful tool to supply a bull for semen collection and a steer for beef performance test. According to the data of Dr.Hashiyada (2001), 296 pairs of split-half-embryos were transferred to recipients and 98 gave births of 112 calves (23 pairs of identical twins and 66 singletons). 3. A blastomere-nuclear-transferred cloned calf was born in 1990 by a joint research with Drs.Tsunoda, National Institute of Animal Industry (NIAI) and Ushijima, Chiba Prefectural Farm Animal Center. The fruits of this technology were applied to the production of a calf from a cell of long-term-cultured inner cell mass (1998, Itoh et al, ZEN-NOH Central Research Institute for Feed and Livestock) and a cloned calf from three-successive-cloning (1997, Tsunoda et al.). According to the survey of MAFF of Japan, over 500 calves were born until this year and a half of them were already brought to the market for beef. 4. After the report of "Dolly", in February 1997, the first somatic cell clone female calves were born in July 1998 as the fruits of the joint research organized by Dr. Tsunoda in Kinki University (Kato et al, 2000). The male calves were born in August and September 1998 by the collaboration with NIAI and Kagoshima Prefecture. Then 244 calves, four pigs and a kid of goat were now born in 36 institutes of Japan. 5. Somatic cell cloning in farm animal production will bring us an effective reproductive method of elite-dairy- cows, super-cows and excellent bulls. The effect of making copy farm animal is also related to the reservation of genetic resources and re-creation of a male bull from a castrated steer of excellent marbling beef. Cloning of genetically modified animals is most promising to making pig organs transplant to people and providing protein drugs in milk of pig, goat and cattle.

• Journal of Animal Science and Technology
• /
• 제48권5호
• /
• pp.719-726
• /
• 2006

본 실험은 가수분해 시킨 유청단백질과 Lb. casei HY2782의 세포 추출물을 인간 전립선 세포에처리하여 세포 내 glutathione 농도 상승효과와 산화제 tbutyl hydroperoxide (TBHP)에 의한핵산 손상 방지 효과를 알아보기 위한 실험으로 전립선 세포 RWPE1 cells와 PC3MMM2 cells에 hydrolyzed WPI(500g/m)를 48시간 동안 처리 시, 가수분해 시키지 않은 WPI 보다 각각 28.2%, 38.4%씩 GSH 농도가 증가하는 것을 유의적으로 확인할 수 있었고(p<0.05), 카제인의 경우 RWPE1 cells and PC3MMM2 cells에 처리 시 가수분해 시킨 카제인과의 유의차가 보이지 않았으며 (p<0.05), glutathione 합성저해제인 Buthionine sulfoximin (BSO) 처리 시 Glutathione 농도가 현저하게 낮아지는 것을 확인할 수가 있었다(Anderson, 1998). 전립선 세포 RWPE1 cells 와 PC3MMM2 cells에 Lb. casei HY2782 세포 추출물 처리 시 PC3MMM2 cell에서는 GSH의 농도가 유의적으로 증가하는 것을 확인 할 수 있었고(p<0.05), RWPE1 cell에서는 증가 성향을 확인 할 수가 있었다.가수분해 시킨 유청단백질과 Lb. casei cell 세포추출물 처리 시 산화제에 의한 세포의 DNA 손상 억제정도와 사멸율의 변화를 확인 한 결과, 가수분해 WPI를 처리 후 Oxidant tbutyl hydroperoxide (TBHP)(500mM)를 이용하여 PC3MMM2 세포에 산화적인 스트레스를 주었을 시, TBHP만 처리한 구에서는 62.0%의 생존율을 나타내었고, glutathione 합성저해제인 BSO를 첨가시킨 처리구에서는 33.7%의 생존율을 나타내었다. 가수분해 시킨 WPI와 카제인 처리구에서는 각각 86.7%, 63.6%의 생존율을 나타내었고, WPI와 BSO를 함께 처리한 구에서는 71.5%의 생존율을 나타내었다. 이는 BSO에 의해 GSH의 생성이 저해되어 나타난 결과로 보여지며(Anderson, 1988), 가수분해시킨 WPI 가 가수분해 시킨 카제인보다는 높은 생존율을 나타내는 것을 유의적으로 확인할 수가 있었다. (p<0.05) Lb. casei 세포 추출물처리에 의한 생존율에서는 가수분해시킨 WPI와 유사한 수준의 82.4%의 생존율을 보였다. 가수분해시킨 유청단백질과 Lb. casei cell 세포추출물에 의한 세포에서의 glutathione 농도 증가에 의해 산화제에 의한 DNA의 손상이 적었던 것으로 사료되어지고, 이로 인해 생존율이 높았던 것으로 판단된다.

• Journal of Animal Science and Technology
• /
• 제52권3호
• /
• pp.175-186
• /
• 2010

The aim of this study was to analyze the proteome expressions of proliferating stromal vascular cells from Hanwoo omental, subcutaneous and intramuscular depots subjected to hormone deprivation and IGF-1, Estradiol-$17{\beta}$ addition. For hormone deprivation or addition studies, the cells were either grown in 10% charcoal-dextran stripped fetal bovine serum (CD-FBS) or in 10% FBS supplemented medium. Further, to analyze the effect of insulin like growth factor (IGF-1) and $17\beta$-Estradiol (E2), cells were grown in 10% CD-FBS containing IGF-1 (10 ng/ml) or E2 (10 nM). The results showed that hormone deprivation had a negative impact on proliferation among the cells from all depots without any growth difference. On comparison of proliferation levels, higher levels were observed in cells that were grown in 10% FBS than in 10% CD-FBS alone or with IGF-1/E2. Proteome expression from preadipocytes grown in hormone deprivation conditions were compared by 2D-DIGE and MALDIToF/ToF. A total of twelve different proteins were found to be differentially expressed under hormone deprivation conditions. Further, our proteomic analysis with DIGE under IGF-1 and E2 addition revealed four proteins with differential expression levels. Moreover, the results highlighted in this study offer a role for each differentially expressed protein with respect to their effect in positive or negative regulation on proliferation.

• Journal of Animal Science and Technology
• /
• 제50권4호
• /
• pp.445-456
• /
• 2008

텔로미어란 염색체 말단부에 TTAGGG의 반복 염기서열과 특정 단백질로 구성되어 있는 것으로 핵 내 염색체의 안정성에 작용을 하며 세포의 노화, 사멸 및 암의 발생과 관련이 있다. 텔로머레이스는 텔로미어의 길이를 일정하게 유지하기 위한 직접적 효소로서 telomeric DNA 합성에 관여하는 ribonucleoprotein이다. 본 연구에서는 한우와 Holstein종 136두를 대상으로 백혈구 세포를 이용하여 연령 별, 품종 별, 성 별 텔로미어 함량을 분석하였다. 또한 동일 연령에서 혈액, 간, 뇌, 심장, 신장 및 생식선 조직들의 텔로미어 함량과 텔로머레이스 활성도도 비교 분석하였다. Telomeric DNA의 양적분석은 양적형광접합보인법(Q-FISH)을 이용하였고, 텔로머레이스 활성도의 분석은 TRAP방법을 이용하였다. 분석 결과, 소의 백혈구 세포들에 있어 개체의 연령이 증가함에 따라 텔로미어의 함유율이 점진적이며 유의적으로 감소되는 양상을 보였고, 한우가 Holstein에 비해 텔로미어 함유율이 높게 나타나 품종 간 유의적 차이가 있었으며, 성 간에도 수컷이 암컷에 비해 유의적으로 높은 텔로미어 함유율을 나타내었다. 반면 동일 연령의 간, 심장, 신장, 폐, 혈액 세포내 텔로미어의 함유율은 차이가 없는 것으로 나타났다. 텔로머레이스 활성도는 태아의 모든 조직에서 비교적 강한 활성을 보였지만, 성 성숙이 된 18개월령에서는 생식선 조직을 제외한 나머지 조직에서 텔로머레이스 활성도는 현저하게 떨어져 조직별 세포의 증식성 특이성과 텔로머레이스 활성도간에는 밀접한 연관성이 있는 것으로 나타났다. 이상의 결과로서 세포내 텔로미어 양적 분포 양상 및 텔로머레이스 활성도를 이용하여 개체의 연령 지표 또는 생리적 표지의 개발 가능성을 제시하고 자 한다.