• 제목/요약/키워드: agar concentration

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인삼 잿빛곰팡이병균의 procymidone에 대한 감수성 변화와 carbendazim/diethofencarb 합제와의 다중 저항성 (Monitoring for the Resistance of Botrytis cinerea Causing Gingseng Gray Mold to Procymidone and Its Multiple resistance with the Mixture of Carbendazim/Diethofencarb)

  • 이선욱;김주형;민지영;배영석;김흥태
    • 식물병연구
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    • 제13권3호
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    • pp.170-176
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    • 2007
  • 인삼의 잎에서 발생한 잿빛곰팡이병의 병반으로부터 병원균인 Botrytis cinerea의 224개 균주를 단포자 분리하여 실험에 사용하였다. 분리한 B. cinerea는 한천희석법을 사용하여 procymidone, carbendazim, carbendazim과 diethofencarb 합제의 균사생장 억제 효과를 $EC_{50}$(균사생장을 50% 억제하는 농도)과 MIC(균사생장을 100% 억제하는 최소농도) 값을 조사하였다. Procymidone에 대한 MIC값을 가지고서 병원균을 분류하면 0.8과 $4.0{\mu}g/ml$ 사이에 속하는 그룹과 $20{\mu}g/ml$ 이상인 그룹으로 크게 분류할 수 있었다. 2005년에 분리한 균주들은 지역별로 procymidone에 대한 감수성의 변화가 매우 다양하게 나타났다. 실험에 사용한 procymidone의 각각의 농도에 대한 균사 생장 억제 양상을 가지고 병원균을 각각 감수성($EC_{50}$ 값이 $2.0{\mu}g/ml$ 이하), 중도저항성($EC_{50}$ 값이 2.0과 $5.0{\mu}g/ml$ 사이), 저항성($EC_{50}$ 값이 $5.0{\mu}g/ml$ 이상) 등의 3개의 그룹으로 분류할 수 있었다. 이 기준으로 분류하였을 때, procymidone에 대해서 저항성인 B. cinerea의 비율은 2005년에 19.3%가 2006년에는 27.5%로 상승하였으며, 저항성 그룹의 평균 $EC_{50}$ 값도 $10.0{\mu}g/ml$에서 $237.3{\mu}g/ml$으로 상승하였다. Procymidone과 carbendazim의 경우에 다중저항성을 보이는 균주는 90개로 전체의 40.2%이었으며, 합제와의 다중저항성을 보이는 균주는 9개 밖에 없었다.

Alternaria brassicicola에 의한 무 검은무늬병에 대한 효율적인 저항성 검정법 개발 (Development of an Effective Method for Testing Resistance to Black Spot of Radish Caused by Alternaria brassicicola)

  • 이지현;장경수;최용호;김헌;최경자
    • 원예과학기술지
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    • 제35권2호
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    • pp.210-219
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    • 2017
  • 본 연구는 Alternaria brassicicola에 의해 발생하는 무 검은무늬병에 대한 효율적인 저항성 검정법을 확립하기 위하여 수행되었다. A. brassicicola 7균주의 포자 형성량과 병원성을 검정하였다. 실험한 균주 중, A. brassicicola KACC 40036과 43923 균주는 V-8 juice agar 배지에서 가장 많은 포자를 생산하였다. 그리고 실험한 균주 모두는 무 유묘에 대하여 강한 병원력을 나타냈다. 시판 중인 무 61개 품종의 A. brassicicola KACC 40036 균주에 대한 저항성 스크리닝을 수행하였다. 실험한 품종 중 높은 저항성을 보이는 품종은 없었으나 '금봉'과 '새롬'같이 약한 저항성을 나타내는 품종이 발견되었다. 이들 결과로부터 추후 실험을 위해 저항성 반응에 차이를 보이는 4개 품종을 선발하였다. 이들 4개 품종의 접종하는 무의 생육 시기, 접종원 농도 그리고 접종 후의 재배 온도에 따른 검은무늬병 발생을 조사하였다. 실험한 모든 품종은 어린 유묘일수록 검은무늬병에 대한 감수성이 증가하였으며, 더 많은 A. brassicicola 포자를 접종할수록 검은무늬병이 더 많이 발생하였다. 그리고 접종한 유묘를 $25^{\circ}C$의 습실상에서 배양하였을 때에는 $20^{\circ}C$$30^{\circ}C$에서 배양하였을 때보다 검은무늬병 발생이 증가하였다. 이들 실험의 결과로부터 무 품종의 검은무늬병에 대한 저항성을 검정하기 위해서는 무 종자를 파종하고 온실($25{\pm}5^{\circ}C$)에서 16일 동안 재배하고, 이 유묘에 A. brassicicola 균주의 포자현탁액($2.0{\times}10^5spores{\cdot}mL^{-1}$)을 분무하여 접종하고, 접종한 식물은 $25^{\circ}C$ 습실상에 24시간 동안 배양한 후에 $25^{\circ}C$, 상대습도 80%의 생육상에서 재배하고, 접종 2일 후에 병반면적율을 조사하는 것을 제안한다.

자두 탄저병균에 대한 살균제의 활성 (In vitro Antifungal Activities of Fungicides against Japanese Plum Fruit Anthracnose Fungi)

  • 정병룡;이태이;박민정;하다희;정종배;이용세
    • 한국환경농학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.34-40
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    • 2018
  • 탄저병이 발생한 자두에서 분리된 C. acutatum 6개와 C. gloeosporioides 5개 균주에 대한 benoomyl, prochloraz manganese complex, azoxystrobin, pyraclostrobin, tebuconazole 및 dithianon의 균사생장억제효과와 포자발아억제효과를 in vitro에서 검정하였다. 포장 권장사용농도를 기준으로 비교하면, prochloraz manganese가 탄저병 균주의 균사생장을 가장 효과적으로 억제하였다. 포자발아억제에서는 dithianon과 pyraclostrobin의 효과가 가장 높았다. Benomyl, prochloraz manganese complex, azoxystrobin 및 tebuconazole은 포자의 발아를 억제하지는 않았으나, 발아 후 비정상적인 발아관의 신장을 유기하여 균사생장 억제하였다. 본 연구의 결과를 통해 자두 탄저병에 대하여 dithianon은 예방효과, prochloraz manganese, azoxystrobin, tebuconazole 등은 치료효과, pyraclostrobin은 예방 및 치료효과가 높은 약제로 판단되며, 포장 적용시험을 통해 자두의 탄저병을 효과적으로 방제할 수 있는 약제를 선발해야 할 것이다.

모자반 에탄올 추출물의 항균활성과 열 및 pH 안정성 (Antimicrobial Activity of the Sargassum fulvellum Ethanol Extract and the Effect of Temperature and pH on Their Activity)

  • 윤소영;이소영;김꽃봉우리;송유진;이소정;이청조;박나비;정지연;곽지희;남기완;안동현
    • 한국식품과학회지
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    • 제42권2호
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    • pp.155-159
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    • 2010
  • 본 연구에서는 국내 자생 해조류인 모자반의 항균활성을 조사하기 위하여 paper disc법과 MIC(Minimum Inhibitory Concentration) test를 이용하여 식품의 부패 및 식중독 관련 미생물 16종에 대한 항균활성을 조사하였다. 그 결과 물추출물에서는 항균효과를 나타내지 않았으나 에탄올 추출물은 4 mg/mL 농도에서 실험에 사용된 모든 그람 양성균, Saccharomyces cerevisiae와 Candida tropicalis에 대해 항균활성을 나타내었는데, 특히 Bacillus subtilis, Clostridium perfringens, Listeria inoccua 및 Listeria monocytogenes 및 C. tropicalis에 대하여 높은 항균활성을 보였다. 그러나 그람 음성균, Candida albicans 및 곰팡이 2종에는 항균 효과가 나타나지 않았다. 모자반 에탄올 조추출물에 대한 MIC test를 실시한 결과, 0.0063% 농도에서 C. perfringens와 C. tropicalis의 생육을 억제하였으며, 0.0125% 농도에서 L. monocytogenes의 생육을 억제하였다. 또한 0.025% 농도에서 B. subtilis, L. inoccua 및 Lactobacillus plantarum의 생육을 효과적으로 억제하였다. 열 및 pH 안정성 실험결과, $121^{\circ}C$에서 15분간 열처리와 pH 2-10 처리에도 항균활성이 감소하지 않는 것으로 보아 모자반 에탄올 추출물은 열과 pH에 비교적 안정하다고 사료된다.

효모의 구성적 Promoter들에 의한 Inulinase 유전자의 발현 (Expression of Inulinase Gene by Yeast Constitutive Promoters)

  • 김연희;남수완
    • 생명과학회지
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    • 제9권2호
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    • pp.153-159
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    • 1999
  • S. cerevisiae의 대표적인 구성적 promoter로 GAPDH, ADH1 및 ENO1를 사용하고 이들 promoter 하류에 INUl의 ORF를 in frame으로 연결한 각각의 plasmid pYIGP, pADHl-lNU 및 pENO-INU를 구축하였다. 이들 plasmid 를 함유한 재조합 S. cerevisiae SEY2102 균주들을 sucrose 함유 평판배지에서 선별한 후, 초기 포도당 농도가 2$\%$ 또는 4$\%$인 배지에서 배양했을 때, 모든 균주들은 12시간 이후부터 정지기에 들어갔으며, 정지기에서도 느리지만 균체증식과 inulinase 발현은 계속되었다. 4% 포도당 배지에서 inulinase 총발현량은 ADH1 promoter 계를 제외하고 GAPDH와 ENO1 promoter의 경우 2$\%$ 포도당 배지 때 보다 약 2배 증가한 2.0 unit/mL과 1.4 unit/mL를 각각 보였다. 단위균체농도당 inulinase 활성 즉, 비활성은 GAPDH와 ENOl promoter계의 경우 포도당 농도가 4$\%$일 때 2$\%$때보다 약 63$\%$ 정도의 비활성 증가를 나타내었다. 하지만 ADH1 promoter의 경우는 오히려 비활성이 약 40$\%$ 감소하였다. 그러나, plasmid 안정성 측면에서는 ADH1과 ENO1 promoter 발현계가 GAPDH promoter 경우의 34$\%$보다 훨씬 뛰어난 80$\%$이상을 보였다. 결론적으로 높은 포도당 농도에서 구성적 promoter의 활성 (발현능)은 GAPDH, ENO1, ADH1 promoter 순으로 나타났지만, 초기 포도당 농도가 높을 때나 에탄을 생산이 심각한 유가식 배양에서는 ENO1 promoter가 inulinase의 구성적 발현ㆍ생산에 더 적합할 것으로 사료된다.

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고추냉이 신초의 생육에 미치는 배지의 Salt Strength, Sucrose 농도 및 NH4/NO3 비율의 영향 (Effect of Salt Strength, Sucrose Concentration and NH4/NO3 Ratio of Medium on the Shoot Growth of Wasabia japonica in Vitro Culture)

  • 박윤영;조문수;정종배
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제34권3호
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    • pp.263-269
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    • 2007
  • 식물 세포나 조직의 배양에서 배지의 salt strength, sucrose 농도, 질소 함량과 질소원의 종류 및 그 비율 등이 세포 또는 조직의 생장에 영향을 미친다. 본 연구에서는 Agar를 함유한 MS 기본배지와 BA 1 mg/L를 첨가한 MS 기본 액체배지에서 계대배양을 통하여 생산한 다신초를 액아와 본엽이 $2{\sim}3$매 되도록 분할한 신초를 이용하여 MS 액체배지의 salt strength와 sucrose 농도 및 $NH_4/NO_3$ 비율이 고추냉이 신초의 생육에 미치는 영향을 조사하여 고추냉이 유묘의 생산에 필요한 최적 배지조건을 구명하였다. 고추냉이 신초의 증식에는 MS 액체배지의 salt strength는 기본조성이 가장 적합한 것으로 나타났으며, $1/4{\sim}1/2x$ 또는 2x MS 배지에서는 고추냉이 유묘의 생장이 크게 억제 되었다. 기본조성의 MS 액체배지에 sucrose 3%를 첨가하였을 때 고추냉이 신초의 생장이 가장 우수한 것으로 나타났으나 sucrose 농도 $1{\sim}6%$ 범위에서 신초의 수와 길이는 유의성 있는 차이를 보이지 않았다. 기본조성의 MS 액체배지에서 질소원으로 ${NH_4}^+$${NO_3}^-$의 비율을 10:50으로 조절하였을 때 고추냉이 신초의 생장이 가장 우수한 것으로 나타났으며, ${NH_4}^+$의 비율이 증가할수록 생장은 억제되었다.

토복령알코홀추출물의 항진균작용 (Effects of Chinae Rhizoma Extracts on the Growth of the Dermatophytes)

  • 이종화;송병숙;조선희;김정일
    • 대한약리학회지
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    • 제9권2호
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    • pp.39-45
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    • 1973
  • The majority of drugs used in the treatment of superficial fungal infections has limited values due to its low efficacy or development of resistance. For the purpose of searching efficacious agent on the superficial fungal infections induced by dermatophytes which is regarded as the most malicious one, authors examined whether Chinae Rhizoma Extracts have significant on it. Extracts from Smilax china Linne used for the study are water extract (CRWE), ethanol extract (CREE) and methanol extract (CRME). In in vitro studies, the spores of the dermatophytes were inoculated on Sabouraud's glucose agar media which contained three extracts of Chinae Rhizoma in each concentration of $500\;{\mu}g/ml$, $1,000\;{\mu}g/ml$ and $5,000\;{\mu}g/ml$ respectively, and also $1,000\;{\mu}g/ml$ of salicylic acid and undecylenic acid $1,000\;{\mu}g/ml$ as comparable drugs. The growth of the dermatophytes were observed for 3 weeks. The species of the dermatophytes used in this experiment were Epidermophyton floccosum, Microsporum canis, Microsporum cookei, Microsporum gypseum, Microsporum nanum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Trichophyton tonsurans and Trichophyton verrucosum distributed from The Institute of Tropical Medicine in Belgium. The results of the studies were as follows: 1. The growth of M. canis, M. nanum, T. mentagrophytes, T. rubrum & T. tonsurans were slightly inhibited in CRWE $1,000\;{\mu}g/ml$ and CRWE $5,000\;{\mu}g/ml$, and only slight inhibition on the growth of E. floccosum, M. canis and M. gypseum were observed in CRWE $5,000\;{\mu}g/ml$. 2. Complete inhibition of T. rubrum, moderate inhibition of M. nanum & T. tonsurans, and slight inhibition of E. floccosunl, M. canis, M. cookei & T. mentagrophytes in growth were observed in concentration of CREE $500\;{\mu}g/ml$. The growth of M. gypseum was slightly inhibited, moderate inhibition on the growth of M. canis, M. cookei & T. mentagrophytes, and complete inhibition of E. floccosum, M. nanum, T. rubrum & T. tonsurans in growth were observeed by CREE $1,000\;{\mu}g/ml$. With $5,000\;{\mu}g/ml$ of CREE, the growth of E. floccosum, M. canis, M. cookei, M. gypseum, T. mentagrophytes, T. rubrum & T. tonsurans were completely inhibited except T. verrucosum being showed slight inhibition. 3. In CRME $500\;{\mu}g/ml$, slight inhibition of T. verrucosum, moderate inhibition of M. gypseum and complete inhibition of E. floccosum, M. canis, M. cookei, T. mentagrophytes, T. rubrum & T. tonsurans in growth were observed. The growth of E. floccosum, M. canis, M. cookei, M. gypseum, M. nanum, T. mentagrophytes, T. rubrum & T. tonsurans were completely inhibited except T. verrucosum being showed moderate inhibition in both CRME $1,000\;{\mu}g/ml$ and CRME $5,000\;{\mu}g/ml$. 4. In $1,000\;{\mu}g/ml$ of undecylenic acid, slight inhibition of T. verrucosum and complete inhibition of E, floccosum, M. canis, M. cookei, M. gypseum, M. nanum, T. mentagrophytes, T. rubrum & T. tonsurans in growth were observed. From the above results, it was found that Chinas Rhizoma Alcoholic Extracts(CREE & CRME) exerted significant antifungal activity, and their effects were probably derived from the pharmacological actions of triterpenoidal saponin and steroidal saponin.

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Staphylococcus epidermidis를 억제하는 Graviola 추출물의 항균활성 (Antibacterial Activity of Graviola extract to inhibit the Staphylococcus epidermidis)

  • 최종화;옥승호
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제18권5호
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    • pp.667-673
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    • 2017
  • 본 연구는 그라비올라 (Graviola; Annona muricata Linn.) 잎의 항균소재 개발 목적으로 병원성 세균에 대한 항균효과를 검증하기 위해 시행된 실험 연구이다. 그라비올라 잎의 추출 온도를 $60^{\circ}C$, $80^{\circ}C$, $98^{\circ}C$ 달리하여 열수 추출하여 수율 및 추출 조건을 찾았으며 실험 균주 S. epidermidis, S. aureus 및 E. coli TOP 10에 대한 항균 활성은 한천 배지 확산법으로 평가하였다. 추출 온도 $60^{\circ}C$, $80^{\circ}C$, $98^{\circ}C$에서 3.02%, 14.73%, 20.76% 수율을 얻었고, S. epidermidis, S. aureus 및 E. coli TOP 10에 대한 항균 활성은 S. epidermidis에서 항균 활성이 나타났으며 $98^{\circ}C$에서 추출한 그라비올라 잎 시료 중 200 mg/mL에서 13 mm, 500 mg/mL에서 20 mm 투명환이 나타났다. MIC는 100 mg/mL이다. 추출 온도, 농도가 높을수록 우수한 성장억제효과를 확인하였다. 위 결과로 천연물속에 함유되어 있는 천연 항균 성분이 피부 상재균에서 우수한 항균력은 앞으로 피부미용 기초자료와 화장품 소재로서의 활용 가능성이 높을 것으로 사료된다.

Investigation on Antibacterial and Antioxidant Activities, Phenolic and Flavonoid Contents of Some Thai Edible Plants as an Alternative for Antibiotics

  • Lee, J.H.;Cho, S.;Paik, H.D.;Choi, C.W.;Nam, K.T.;Hwang, S.G.;Kim, Soo-Ki
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제27권10호
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    • pp.1461-1468
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    • 2014
  • This study was aimed to examine the antibacterial and antioxidative properties of seven edible plants from Thailand to develop alternative antibiotics as feed additives. The plants include Citrus aurantifolia Swingle (Lime) fruits and its leaves, Sesbania grandiflora L. (Agati sesbania) leaves, Piper sarmentosum Roxb (Wild betal) leaves, Curcuma domestica Valeton (Turmeric) roots, Morinda citrifolia L. (Beach mulberry) leaves, Cassia siamea britt (Siamea cassia) leaves, and Cocos nucifera L. (Coconut) peels. The plants were extracted by methanol, n-hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water. Antibacterial activities with minimum inhibitory concentration (MIC) were determined by agar diffusion assay against Escherichia coli, Burkholderia sp., Haemopilus somnus, Haemopilus parasuis, and Clostridium perfringens that were considered pathogenic strains in livestock infection. Methanol extracts of C. aurantifolia Swingle fruits and leaves showed the broadest spectrum of antibacterial activities except for C. perfringens. Butanol extract of S. grandiflora L. leaves showed the strongest activity against Burkholderia sp. with MIC, $135{\mu}g/mL$. P. sarmentosum Roxb leaves showed antibacterial activities against E. coli, Burkholderia sp. and H. parasuis. Ethyl acetate and water extracts from C. domesitca Valeton roots showed MIC of $306{\mu}g/mL$ and $183{\mu}g/mL$, respectively against only C. perfringens. Antioxidative activity was determined by 2-diphenyl-2-picryl hydrazyl photometric assay. The methanol extracts of C. aurantifolia Swingle fruits and P. sarmentosum Roxb leaves showed the highest antioxidant activity among all the extracts with 3.46 mg/mL and 2.70 mg/mL effective concentration 50% ($EC_{50}$) values, respectively. Total contents of phenolics and flavonoids were measured from the plant extracts. Methanol extracts of S. grandiflora L. and chloroform extracts of C. domestica Valeton were found to have the highest amount of total phenolics, 41.7 and $47.8{\mu}g/mL$, respectively. Flavonoid content of methanol extracts in S. grandiflora L. T was $22.5{\mu}g/mL$ and the highest among plant extracts tested. These results indicated that C. aurantifolia Swingle, S. grandiflora L., P. sarmentosum Roxb, and C. domestica Valeton have antibacterial and antioxidant activities and can be used as alternative antibiotics or potential feed additives for the control of animal pathogenic bacteria.

국내 벼 키다리병균의 Benomyl 약제에 대한 감수성 기준 및 저항성 변화 (Baseline Sensitivity and Monitoring for the Resistance to Benomyl of Fusarium Species Causing Bakanae Disease in Korea)

  • 최효원;이용환;홍성기;이영기;이재금;김효원
    • 한국균학회지
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    • 제43권4호
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    • pp.260-266
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    • 2015
  • 국내에 분포하는 벼 키다리병균의 benomyl에 대한 저항성 정도를 조사하기 위하여 연도별로 균주를 수집하고, 병원성을 검정하였으며, 한천희석법을 사용하여 각 균주의 benomyl에 대한 MIC값과 $EC_{50}$값을 조사하였다. 그 결과, 2006년부터 2007년에 분리한 균주의 MIC값은 1.5625~3.125 ug/mL인 균주가 가장 높은 빈도로 분포하였고, 2013년부터 2014년 분리균의 MIC값은 25 ug/mL 이상의 농도에서 분포비율이 가장 높았다. 또한 2006년부터 2007년 분리균의 평균 $EC_{50}$값은 1.6397 ug/mL이었으며, 2013년부터 2014년 분리균은 2.4892 ug/mL로 조사되었다. 국내 벼 키다리병균의 benomyl에 대한 저항성 기준은 MIC값이 25ug/mL 이상이고, $EC_{50}$값이 2.4 ug/mL 이하일 때는 중도저항성으로, $EC_{50}$값이 2.4 ug/mL 이상일 때는 저항성으로 하는 것이 타당할 것으로 생각된다. 이 기준에 의한 저항성 균주의 비율은2006년부터 2007년에 12.5%에서 2013년부터 2014년에는 36.4%로 증가하였다. 한편, prochloraz와 benomyl에 모두 저항성을 보이는 균주가 20.3%인 것으로 나타나 벼 키다리병균의 다중저항성이 증가하는 것으로 조사되었다.