• 한국미생물·생명공학회지
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• 제36권3호
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• pp.201-208
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• 2008

장수상황버섯(Phellinus baumii) 균사체를 이용한 한약재의 고체발효를 통한 기능성 강화 한약재 생산을 목적으로, 항산화 활성 또는 혈류 개선활성이 우수하다고 알려진 36종의 한약재를 멸균 후, 장수상황버섯 균사체를 접종하여 고체발효 가능성을 검토하였다. $2^{\circ}C$, 상대습도 90% 배양기에서 20일간 발효시킨 결과, 감국, 대추, 백부자, 신이 및 황정을 제외한 31종에서 양호한 발효가 진행되었으며, 발효 가능여부는 한약재 식물체의 사용부위의 구조적 견고성, 영양조건 및 항진균 활성 등과 연관되리라 판단된다. 한약재의 고체발효 이후, 발효전과 비교하였을 때 평균 수분함량은 $30.84{\pm}15.67%$에서 $67.21{\pm}11.43%$로 2.2배 증대되었으며, 평균 메탄올 추출효율과 평균 pH는 $13.91{\pm}12.22%$ 및 $5.06{\pm}0.87$에서 각각 $11.16{\pm}7.06%$ 및 $4.83{\pm}0.73$ 다소 감소하는 경향을 나타내었다. 각각의 메탄올 추출물을 이용한 항혈전 활성 및 항산화 활성을 측정한 결과, 골쇄보, 천련자, 도엽, 와송의 경우에는 트롬빈 저해 활성이 각각 발효전에 비하여 31.38, 23.63, 22.57, 13.85% 증가되었으며, 원지, 현삼, 백지, 향부자, 골쇄보 및 육종용에서는 DPPH 소거능이 발효전에 비해 각각 58.9, 49.8, 48.1, 32.8, 24.1, 20.7% 증가되어 장수상황버섯 균사체 발효 한약재의 긍정적 생리활성 증가를 확인하였다. 본 연구결과는 상황버섯 균사체를 이용한 한약재의 고체발효를 통해, 특정 기능성의 강화 원재료를 생산할 수 있으며, 골쇄보의 경우와 같이 항혈전 활성 및 항산화 활성이 동시에 증대된 한약재 생산이 가능함을 제시하고 있다.

• 생명과학회지
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• 제21권10호
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• pp.1355-1363
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• 2011

많은 임상 실험을 통해 마늘(Allium sativum)이 심혈관 질환에 유효한 효과가 알려져 있다. 흑마늘(AGE)은 항산화, 항염증, 항암 효과 등 다양한 생물학적 효과가 보고되었다. 그러나, 흑마늘의 심혈관계 질환과의 상관관계에 대한 연구는 아직 미흡한 실정이다. 흑마늘과 그 유래 성분이 혈소판에 미치는 영향을 조사하였다. 백서의 혈액을 얻어, 흑마늘과 그 유래 성분의 thrombin에 의해 유도되는 혈소판 응집에 대한 억제 효과를 조사한 결과, 흑마늘과 diallyl sulphides는 농도의존적으로 혈소판 응집을 억제함을 관찰하였다. 또한 in vivo 실험에서도 마늘 오일과 S-Allylmercapto-cystein (SAMC)는 thrombin과 ADP에 의해 유도되는 혈소판 응집을 유의성 있게 억제하는 것을 관찰하였다. 흑마늘 유래 SAMC와 diallyl sulphides가 혈소판 응집 억제 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 흑마늘이 심혈관계 질환의 예방을 위한 건강보조식품으로의 새로운 가능성을 제시한다.

• 한국식품과학회지
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• 제29권1호
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• pp.161-166
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• 1997

식용버섯류를 대상으로 혈액응고계를 활성화시키는데 주된 역할을 하는 것으로 알려진 단백질인 tissue factor에 대한 저해활성을 시험관내에서 측정하였으며 몇 가지 유기용매를 이용하여 추출분획을 조제하고 이들의 TF에 대한 저해활성을 비교 검색하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 검색된 버섯류의 메탄올 추출물들은 모두 TF에 대한 저해활성을 나타내었으며 특히 표고버섯은 비교적 강한 저해활성을 나타내었고 양송이버섯과 영지버섯 역시 TF 저해활성을 갖는 것으로 나타났다. 양송이버섯의 메탄올 추출물의 $IC_{50}$은 in vitro에서 $1.30\;{\mu}g$이었고 영지버섯은 $4.32\;{\mu}g$, 표고버섯은 $0.25\;{\mu}g$으로 각각 조사되었다. 유기용매를 이용하여 용매분획을 실시하고 각 용매분획의 TF 저해활성을 측정한 결과 표고버섯의 에틸아세테이트 분획에서 강한 TF 저해활성이 확인되었고 영지버섯의 에틸아세테이트 분획에서도 TF에 대한 저해활성이 나타났으며 표고버섯의 에틸아세테이트 분획에서 얻은 결정성 물질 역시 TF를 저해하는 활성을 나타내었다. 모든 버섯의 물층에서는 활성이 확인되지 않았으며 영지버섯의 에틸아세테이트 분획의 $IC_{50}$은 $107\;{\mu}g$, 표고버섯의 경우 $770\;{\mu}g$의 값을 나타냈고 표고버섯의 에틸아세테이트 분획으로부터 얻은 결정성물질의 $IC_{50}$은 10.2 mg이었다.

• 생명과학회지
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• 제25권4호
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• pp.425-432
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• 2015

각각의 나라는 민족의 공감성과 문화성이 깃든 고유의 술을 가지고 있으며, 우리나라에는 고유의 전통주 막걸리(탁주)가 있다. 본 연구에서는 주박을 이용한 고부가가치 향장소재 개발을 목표로, 상업적 시설에서 대량생산된 우국생 주박의 ethanol 및 열수 추출물로부터 n-hexane, ethylacetate, butanol을 이용한 순차적 유기용매 분획물과 물 잔류물을 조제한 후, 이들의 혈액응고 저해활성, 혈소판 응집저해 활성 및 인간 적혈구 용혈활성 및 항산화 활성을 평가하였다. 우국생 주박의 수분함량은 80.3%, pH 3.94, brix 13.0 및 알코올 함량은 약 1.8%이었으며, ethanol 추출의 경우 추출효율은 6.62%로 열수 추출의 2.1%보다 3.15배 높은 수율을 나타내었다. 총폴리페놀 및 총플라보노이드 함량 분석결과 주박 ethanol 추출물의 ethylacetate 분획물에서 가장 높은 함량을 나타내었으며, 특히 폴리페놀 함량은 매우 높게 나타났다(128 mg/g). 혈액응고 저해활성을 평가한 결과, ethanol 추출물의 ethylacetate 분획물에서는 5 mg/ml 농도에서 TT, PT, aPTT 모두 15배 이상의 연장된 응고시간을 나타내어 매우 강력한 thrombin, prothrombin 및 coagulation factor 저해활성을 나타내었다. 혈소판 응집저해능 평가에서는 ethanol 추출물의 butanol 분획 및 물 잔류물에서 항혈전제로 사용되고 있는 aspirin 보다 우수한 응집저해능을 확인하였다. 상기 10종 시료들은 0.5 mg/ml 농도까지 적혈구 용혈활성이 나타나지 않았으며, 양호한 radical 소거능을 나타내었다. 본 연구결과는 사료 및 비료로 활용되고 있는 우국생 주박의 활성분획물을 이용하는 경우 고부가가치 항혈전제 개발이 가능함을 제시하고 있다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제35권6호
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• pp.1763-1768
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• 2014

In the course of our program to search for antithrombotic and anti-inflammatory agents from plants, twelve phenolics (1-12) were isolated from the stems of Parthenocissus tricuspidata. Their structures were elucidated on the basis of spectroscopic (1D and 2D NMR, and MS) data analyses, and comparison with published data. At the concentration of $100{\mu}g/ml$, compounds 2, 4, 6 and 10 possessed potential effects on anti-blood coagulation, with inhibitory percentage of 216, 174, 148 and 225%, respectively; while aspirin used as positive control showed 181% inhibition at the same concentration. Furthermore, the anti-inflammatory activity of isolated compounds (1-12) was investigated on lipopolysaccharide (LPS)-induced murine macrophage cells (RAW264.7). Compounds 2, 4 and 6 also potential inhibited the production of nitric oxide, with $IC_{50}$ values of $11.9{\pm}0.3$, $2.9{\pm}0.2$ and $29.0{\pm}0.6{\mu}M$, respectively. Celastrol, the positive control used, gave an $IC_{50}$ value of $1.0{\pm}0.1{\mu}M$.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제27권6호
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• pp.619-623
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• 2004

Tissue factor (TF, tissue thromboplastin) is a membrane bound glycoprotein, which acceler-ates the blood clotting, activating both the intrinsic and the extrinsic pathways to serve as a cofactor for activated factor VII (Vila). The TF-factor Vila complex (TF/VIIa) proteolytically activates factors IX and X, which leads to the generation of thrombin and fibrin clots. In order to isolate TF inhibitors, by means of a bioassay-directed chromatographic separation technique, from the leaves of Eriobotrya japonica Lindley (Rosaceae), a known sesquiterpene glycoside (2) and ferulic acid (3) were isolated as inhibitors that were evaluated using a single-clotting assay method for determining TF activity. Another sesquiterpene glycoside (1) was also isolated but was inactive in the assay system. Compound 3 was yielded by alkaline hydrolysis of compound 2. The structures of compounds 1, 2, and 3 were identified by means of spectral analysis as $3-O-{\alph}-L-rhamnopyranosyl-(1{\rightarrow}4)-a-L-rhamnopyranosyl-(1{\rightarrow}2)-[{\alph}-L-rhamnopyrano-syl-(1{\rightarrow}6)]-{\beta}-D-glucopyranosyl nerolidol$ (1), $3-O-{\alph}-L-rhamnopyranosyl-(1{\rightarrow}4)-{\alph}-L-rhamnopyr-anosyl-(1{\rightarrow}2)-[{\alph}-L-(4-trans-feruloyl)-rhamnopyranosyl-(1{\rightarrow}6)]-{\beta}-D-glucopyranosyl$ nerolidol (2) and ferulic acid (3), respectively. Compounds 2 and 3 inhibited 50% of the TF activity at con-centrations of 2 and $369{\;}\mu\textrm{m}/TF$ units, respectively.

• 한국식품영양과학회지
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• 제38권2호
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• pp.136-141
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• 2009

스피루리나를 세포벽 가수분해효소와 단백질 가수분해효소로 처리하여 조제한 스피루리나 가수분해물(enzymatic hydrolysate of spirulina, EHS)의 생리활성을 조사하였다. 효소처리 가수분해물의 유산균 증식효과, 항산화능, 암세포 증식저해 활성, 항혈전 활성을 분석한 결과 EHS는 유산균 증식활성과 항산화능에 큰 영향을 미치지 않았으며, 자궁경부암세포(HeLa)에 대해 1.42 mg/L의 농도에서 15% 미만의 증식저해효과를 나타내었다. 반면 항혈전 활성을 공통 경로(common pathway), 내인성 경로(intrinsic pathway), 외인성 경로(extrinsic pathway)로 구분하여 측정한 결과, 공통경로, 내인성 경로와 유사한 항혈전 활성이 있음을 확인하였다. 공통 경로를 thrombin time assay로 측정한 결과 EHS의 농도가 100 mg/L일 때 155.6초를 나타내었다. 내인성 경로는 activated partial thromboplastin time assay로 측정하였고, EHS의 농도가 1000 mg/L일 때 95.8초를 나타내었다. 외인성 경로를 prothrombin time assay로 측정한 결과 EHS의 농도가 1000 mg/L일 때 10.6초를 나타내었다. 결과적으로 스피루리나 효소가수분해물(EHS)이 항혈전경로 중 공통경로와 내인성 경로에 활성이 있음을 알 수 있었으며, 이를 토대로 신규의 항혈전 기능성 원료로 개발될 수 있을 것으로기대된다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제21권2호
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• pp.132-140
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• 1997

The effects of ginsenosides purified from red ginseng on platelet aggregation were investigated. Preincubation of washed platelets from rats with either ginsenoside Rg3, ginsenosides non-polar fraction (G-NPF), ginsenoside Rg1(Rg1) or ginsenosides polar fraction(G-PF) reduced the plytelet aggrelation induced by collagen in a dose-dependent manner, whereas ginsenoside Rg2 failed to inhibit the aggregation. Their IC50 values of Rg3, G-NPF, Rgl, and G-PF were 8.7$\pm$1.0, 150.3$\pm$0.1, 369.9$\pm$ 1.0, 606.211.3 $\mu\textrm{g}$/ml, respectively. Aggrelation induced by thrombin was also inhibited by Rg3 and G-NPF with IC50 being 5.2$\pm$ 1.1 and 66.5$\pm$0.8 $\mu\textrm{g}$/ml, respectively. The alterations of Intracellular Ca2+ concentration in platelets were monitored using fura-2 as a fluorescent Ca2+ indicator. Both Ca2+ release from internal stores and Ca2+ influx into cytosol were suppressed by Rg3. Rg3 also inhibited granular release of ATP and TXA2 formation induced by thrombin in a dose-dependent manner in the washed platelets. Rg3 also inhibited Aggregation and ATP release from human platelets induced by collagen to a similar extent as were observed in rat platelets. In conclusion, Rg3 is a Potent anti-aggregating component in ginsenosides and may exert its anti-aggrega1ing activity by decreasing TXAa formation and granular secretion in platelets, most likely by inhibiting Ca2+ influx and Ca2+ mobilization from intracellular stores. Thus ginseng may contribute to the prevention and treatment of thrombosis.

• 생명과학회지
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• 제26권3호
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• pp.289-295
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• 2016

마가목은 울릉도를 대표하는 약용식물 중 하나이다. 본 연구에서는 마가목을 이용한 혈행개선 기능성을 가진 고부가가치 음료 제조를 위해 마가목의 미숙과, 성숙과, 줄기 및 잎의 열수 추출물을 제조하고, 이를 대상으로 기존에 보고된 바 없는 항혈전 활성 및 항산화 활성을 검토하였다. 마가목 줄기의 경우 추출효율은 3.99%, pH 5.5이었으며, 열수 추출물은 총 폴리페놀 89.2 mg/g, 총 플라보노이드 28.3 mg/g의 함량을 나타내었다. 다양한 부위의 마가목 추출물들은 0.5 mg/ml 농도까지 인간 적혈구 용혈활성을 나타나지 않았다. 혈액응고 저해활성 평가결과, 줄기 추출물에서만 강력한 트롬빈, 프로트롬빈, 혈액응고인자 저해가 확인되었으며, 인간 혈소판 응집저해활성은 인정되지 않았다. 한편 혈전 생성억제와 관련된 항산화 활성 평가 결과, 줄기 추출물에서 강력한 DPPH 음이온, ABTS 음이온 소거능, nitrite 소거능을 확인하였으며, 각각의 RC₅₀는 각각 119.7, 53.3, 및 117.5 μg/ml으로 계산되었다. 항산화제인 vitamin C의 DPPH 음이온, ABTS 양이온 및 nitrite 소거능에 대한 RC₅₀가, 각각 13.7, 5.2, 및 14.9 μg/ml임을 고려할 때, 마가목 줄기 추출물은 정제되지 않은 상태에서도 우수한 항산화 활성을 나타내었으며, 환원력 역시 다른 부위에 비해 강력하였다. 본 연구결과는 강력한 항응고 활성과 항산화 활성을 나타내는 마가목 줄기 추출물이 신규의 항혈전 천연물 소재로 이용가능 함을 제시하고 있다.

• 생명과학회지
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• 제24권5호
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• pp.515-521
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• 2014

한방에서 지혈 및 어혈 제거용으로 사용되고 있는 눈개승마는, 최근 약용 산채로 그 수요가 급증하고 있다. 본 연구에서는 눈개승마의 항혈전 활성을 평가하고자 눈개승마 지상부로부터 에탄올 추출물 및 이의 순차적 유기용매 분획물을 조제하여 이들의 혈액응고 저해활성 및 혈소판 응집저해 활성을 평가하였다. 그 결과, 눈개승마의 에탄올 추출물(0.5 mg/ml)에서 1.4~2.3배의 우수한 TT, PT, aPTT 연장효과를 확인하였으며, 특히 내인성 혈액응고 인자 저해효과가 우수함을 확인하였다. 분획물에서는 ethylacetate 분획에서 가장 우수한 aPTT 연장효과를, butanol 분획에서는 혈액응고 촉진효과를 확인하였다. 혈소판 응집저해 활성평가의 경우, 눈개승마 에탄올 추출물은 임상에서 사용하는 항혈소판제인 아스피린에 필적하는 효과를 나타내었으며, 특히 butanol 분획은 0.25 mg/ml 농도에서 아스피린 0.5 mg/ml 에 해당하는 강력한 혈소판 응집저해능을 나타내었다. 상기의 에탄올 추출물과 활성 분획물들은 0.5 mg/ml 농도까지 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 나타내지 않아, 눈개승마가 천연물 유래의 항혈전제로 개발 가능함을 확인하였으며, 특히 상기 활성분획들이 높은 함량의 total polyphenol, total flavonoid, total sugar를 포함함을 고려할 때, 활성물질의 정제시에는 더욱 강력한 항혈전 활성을 나타내리라 판단된다. 본 연구결과는 눈개승마의 항혈전 활성의 최초 보고이다.