농작물에 심각한 피해를 주는 phytotoxin을 생산하는 S. scabiei ATCC 49173의 분자 유전학적인 연구를 위해 대장균으로부터 S. scabiei로 plasmid DNA를 도입하는 접합 전달법을 이용한 형질전환법을 확립하였다. 본 연구를 통해 확인된 S. scabiei의 접합전달용 최적배지는 50 mM의 $MgCl_2$를 첨가한 MS배지이며 접합전달에 사용되는 DNA 수용체인 포자는 $45^{\circ}C$의 열처리와 $5{\times}10^7$이상의 plasmid DNA 공여체가 필요하다는 것을 확인하였다. 또 얻어진 접합전달체에 대하여 Southern blot hybridization과 벡터가 삽입된 염색체부분의 염기서열분석을 통해 attB site의 특성을 분석한 결과 S. scabiei 염색체의 pirin 상동체를 코드하는 ORF내에 단일위치로 존재하고 있으며 이미 밝혀진 다른 방선균유래 attB site의 염기서열에 대해 86.3%~96.1%의 상동성을 보였다.
본 연구는 시판되고 있는 10종의 녹비작물로부터 추출한 추출물을 이용하여 감자 더뎅이병균(Streptomyces scabiei)에 대한 항균활성을 검정함으로서 감자 더뎅이병 경감을 위한 녹비작물 선발의 기초자료로 활용하고자 하였다. 10종의 녹비작물에 대하여 hexane, ether, ethylacetate, methanol 및 water로 순차적으로 용매분획을 하였다. 그 결과 DPPH free radical 소거능은 ether, methanol 및 water 추출물에서 소거능이 높게 나타났다. 감자 더뎅이병균(Streptomyces scabiei)에 대한 항균활성은 methanol, ethylacetate, ether 및 water 용매를 이용한 모든 녹비작물 추출물의 0.25 mg/mL 농도에서부터 높은 항균활성을 나타내었다. 특히, methanol 용매를 이용한 하우스솔고 추출물은 감자 더뎅이병균에 대하여 다른 녹비작물 보다 더 높은 항균력을 나타내었다. 이상의 결과들로부터 하우스솔고의 이용은 감자 더뎅이병 경감을 위한 최적의 녹비작물로 생각되었다.
Streptomycete isolator strain M0137 showed cytotoxic effect on THP-1 cells. One of the purified substances produced from the strain was identified as nonadecanoic acid. Morphological and physiological properties, phylogenetic analysis, and genomic fingerprinting of strain M0137 were determined. Strain M0137 showed a high similarity with Streptomyces scabiei, phenotypically and phylogenetically. In contrast, genomic fingerprinting and G+C content analysis revealed that strain M0137 could be distinguished from S. scabiei ATCC49173$\^$T/. We propose to name strain M0137 as Streptomyces scabiei Subsp.
Potato common scab disease is caused by pathogens belonging to Streptomyces spp. and results in a serious yield loss worldwide. Despite decades of research aimed at disease management, a definitive control method remains undiscovered. This study aims to explore the correlation between the C/N ratio and urea application with potato common scab pathogen dynamics and disease severity. We applied sawdust with a high C/N ratio and urea into the soil prior to potato cropping, both in pot and field experiments. Disease severity assessments and quantification of the TxtB gene were conducted at the harvest stage. Furthermore, culture experiments were performed to assess the direct impact of urea on the pathogen. Our findings revealed that higher disease severity was correlated with a high C/N ratio application and pathogenic gene quantity. Urea exhibited a direct influence on S. scabiei activity, reducing the disease severity in pot experiments. However, the effects of urea application on disease suppression in the conductive field were inconclusive. Although the results of urea application experiments displayed inconsistencies between pot and field trials, urea worked as the control to suppress S. scabiei activity. Further investigations are needed under various field conditions to confirm these findings.
The actinomycete strain PK-A41 was isolated from a soil sample from pepper fields in Ko-yang, Korea. The strain PK-A41 inhibited the mycelial growth of some plant pathogenic fungi and oomycete, Alternaria mali, Colletotrichum orbiculare, Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici, Magnaporthe grisea, Rhizoctonia solani, and Phytophthora capsici. The presence of LL-diaminopi-melic acid in the cell wall extract and the nucleotide sequence of the 16S rDNA region of the strain PK-A41 was assigned to Streptomyces scabiei. Further morpho-logical, biochemical, and pathological analyses also confirmed the strain PK-A41 to be S. scabiei, which is pathogenic to potato tubers. The maximum antibiotic production of the strain PK-A41 was achieved when grown on the glycerol peptone broth (GPB) medium for 9 days.
The substance 0116p, which exhibits cytotoxicity against human macrophage cell line THP-1, was isolated from a mycelial extract of Streptomyces scabiei subsp. chosunensis M0137. The cytotoxic substance was purified by Diaion-HP2O adsorption, solvent extraction, Sephadex LH-20 column chromatography, and silica-gel column chromatography. The molecular formula is C$\_$19/H$\_$38/O$\_$2/ (MW301.10) based on elemental and spectrometric analysis. It was identified as nonadecanoic acid by NMR spectral data. It exhibits cytotoxic activities in various human cancer cell lines, including A549, SK-OV-3, SK-MEL-2 and HCT-15. In addition, 0116p also inhibits IL-12 production in lipopolysaccharide-activated macrophages.
Through in vitro screening for biocontrol agents (BCAs) against Streptomyces scabiei causing potato (Solanum tuberosum) common scab, 19 streptomycete and 17 fungal isolates with antagonistic activity were selected as BCA candidates. For the selection of BCA candidates which are highly resistant to 10 kinds of antibiotics or pesticides, chemical susceptibility testing was initially performed in vitro. A remarkable degree of variation in susceptibility to antibiotics or pesticides was observed among the isolates tested. Streptomycete A020645 isolate was highly resistant to all the tested chemicals except neomycin up to 5,000 ppm. On the other hand, out of 36 antagonistic microbes subjected to in vivo pot tests using cultivar Daejima, four streptomycete isolates namely, A020645, A010321, A010564, and A020973, showed high antagonistic activity with >60% and 55% control value, respectively, and high chemical resistance to 10 kinds of chemicals. Therefore, these isolates were selected as potential BCAs for the control of potato common scab.
대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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pp.334.1-334.1
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2002
Streptomyces scabiei subsp. chosunensis M0137. nonadecanoic acid producer. showed the highest protease activity when grown in OSY medium (oatmeal 1.5%, soybean meal 2%, dried yeast 1 %) supplemented with. glycerol (1 %) and CaCO3 (0.1 %). Two forms of protease(SS-1 and SS-2) were fractionated and purified through Ultrogel AcA 54 gel filtration and DEAE-sepharose CL-6B column chromatography. Both proteases were practically stable in the pH range of 6-10. The optimal pH for the activities of both protease 88-1 and 8S-2 were 7.5 and 8.0. respectively. (omitted)
감자더뎅이병 방제용 생물제제(biocontrol agenL BCA)를 개발하기 위하여 국내 토양으로부터 분리된 5,000여 방선균 균주를 대상으로 더뎅이병 관련 병원균(Streptomyces scabiei및 S. turgidiscabies)에 대한 in vitro또는 in vivo 활성검정을 실시하였다. 활성검정 결과 길항력이 우수한 균주로서 9균주가 선발되었으며 실제 재배포장에서 사용되고 있는 dazomet및 mancozeb 등 농약에 대한 감수성 시험을 실시하여 A020645 균주가 길항활성 뿐만 아니라 약제저항성이 가장 높음을 확인하고 더뎅이병 방제용 BCA 균주로 선발하였다. 본 균주로부터 항균활성물질을 분리하기 위하여 액체배양액으로부터 음이온교환 크로마토그래피(anion exchange chromatography), solidphase(ODS) extraction, TLC, 역상 HPLC 등을 실시하여 최종적으로 compound A와 B를 순수 분리하였다. Compound A와 B는 NMR 분석 결과 nucleoside계 화합물로 판단된다.
Lee, Mee Youn;Kim, Hyang Yeon;Lee, Sarah;Kim, Jeong-Gu;Suh, Joo-Won;Lee, Choong Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권8호
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pp.1265-1274
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2015
Secondary metabolite-based chemotaxonomic classification of Streptomyces (8 species, 14 strains) was performed using ultraperformance liquid chromatography-quadrupole-time-offlight-mass spectrometry with multivariate statistical analysis. Most strains were generally well separated by grouping under each species. In particular, S. rimosus was discriminated from the remaining sevens pecies (S. coelicolor, S. griseus, S. indigoferus, S. peucetius, S. rubrolavendulae, S. scabiei, and S. virginiae) in partial least squares discriminant analysis, and oxytetracycline and rimocidin were identified as S. rimosus-specific metabolites. S. rimosus also showed high antibacterial activity against Xanthomonas oryzae pv. oryzae, the pathogen responsible for rice bacterial blight. This study demonstrated that metabolite-based chemotaxonomic classification is an effective tool for distinguishing Streptomyces spp. and for determining their species-specific metabolites.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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