International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제24권2호
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pp.57-61
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2012
The Indian Oak Tasar silkworm, Antheraea proylei J. is a beneficial insect with great economic importance in India for its silk production. In this study, six populations of Antheraea proylei and A. frithi Moore (as an out group) were subjected to inter simple sequence repeat (ISSR) marker analysis in order to assess its genetic diversity. Fifteen ISSR primers produced 91 markers among different breeds of A. proylei and A. frithi of which 89 are polymorphic, generating 97.8% polymorphism. The dendrogram constructed using the Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean (UPGMA) and cluster analysis made using Nei's genetic distance resulted in the formation of one major group containing four sub-groups separating the breeds. This result suggests that ISSR amplification is potentially useful for molecular characterization of oak tasar silkworm genotypes.
한국산 제비꽃속 32분류군과 일본산 2집단 등 총 34집단에 대한 유연관계를 알아보기 위하여 RAPD(randomly amplified polymorphic DNA), ISSR(inter simple sequence repeat) 및 PCR-RFLP(restriction fragment length polymorphism) 분석을 실시하였다. RAPD 분석에서는 40개의 primer 중 6개가 분류군 전체에서 반응을 보였고 이로부터 총 70개(98.6%)의 다형화 밴드를 얻었으며, ISSR 분석에서는 4개의 primer로 부터 28개(96.6%)의 다형화밴드를 얻었다. 엽록체 DNA의 non-coding부분을 이용한 PCR-RFLP 분석에서는 반응이 일어난 4지역에서 증폭된 약 6.78 kb의 DNA 각각에 대하여 15가지 제한효소를 처리한 결과 총 80개의 restriction site를 얻었으며 그중 16 site는 polymorphic하게 나타나 20%의 다형화를 보였다. 본 연구에서 다룬 3가지 형질에 의한 유집분석 결과 각각의 형질에 의해서는 서로 일치하지 않는 유집형태를 보였지만 3가지 형질을 통합한 결과는 진정제비꽃절(sect. Nomimium)내 아절과 계열간 구분이 명확하게 나타났으며 무경종과 유경종도 구별이 가능하여 외부형태형질에 의한 기존의 분류체계와 일치하였다. 그러나 노랑제비꽃절(sect. Chamaemelanium)은 진정제비꽃절과 독립적인 군을 형성하지 않고 진정제비꽃절 내 무경종그룹인 Patellares아절과 Vaginatae아절 사이에 위치하여 나타났다. 형태적인 변이가 매우 심한 분류군으로 알려진 태백제비꽃군(V. albida complex)은 Patellares아절 내에서 하나의 군으로 유집되어 Pinnatae계열로 처리하는 것이 타당할 것으로 생각된다. 본 연구에서 사용한 3가지 형질 중 RAPD 분석방법은 ISSR과 PCR-RFLP 분석보다 제비꽃속의 종간 유연관계를 밝히는데 더 유용한 것으로 판단된다.
ISSR마크를 사용하여 고려 인삼의 품종 및 계통간 분자적 인증과 유전적 다형현상을 조사하였다. 56개의 ISSR 프라이머 중 5개가 일곱 품종 및 계통간 명확하고 재현성이 높은 DNA분절을 나타내는 최적 프라이머로 선택되었다. 전체 43밴드는 250 bp - 1,700 bp의 분자량을 가지며 프라이머당 8.6개의 밴드를 나타내었다. 고려 인삼에서 다형현상 정도는 20.9%였다. 특히 천풍 품종이 가장 높은 다형현상을 나타낸 반면 다른 품종은 거의 다형현상을 나타내지 않았다. 결론적으로 DNA수준에서 ISSR마크로 천풍이 다른 고려 인삼의 품종 및 계통인 연풍, 황숙종, 자경종과 구분에 이용될 수 있음이 판명되었다.
Inter simple sequence repeat (ISSR) markers were performed in order to analyse the phylogenetic relationships of eight Hypericum electum populations in Korea. The six primers were produced 37 reproducible ISSR bands. Analysis of ISSR from individual plants of Korean H. erectum resulted in 22 polymorphic bands with 59.5%. Across populations, the mean number of alleles per locus was 1.348 and Shannon's information index was 0.203.Population Mt. Gyeryong had the highest expected genetic diversity (0.175) among all populations. When species were grouped by eight populations, within group diversity was 0.140 (Hs), while among group diversity was 0.472 (G$_{ST}$) on a per locus basis. The estimated gene flow (Nm) for H. erectum was very low (0.561). It is suggested that reproductive isolation by the isolation of geographical distance among H. electum populations and genetic drift may have played roles in shaping the population structure of this species. In phonetic tree, all populations were well separated from each other. Thus, ISSR markers are very effective in classifying natural population levels of genus Hypericum in Korea.
Mohandas, T.P.;Vijayan, K.;Kar, P.K.;Awasthi, A.K.;Saratchandra, B.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제8권2호
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pp.211-215
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2004
Genetic diversity within the natural populations of Daba ecorace of Antheraea mylitta Drury was studied using individual silkworms collected from the South Singhbhum district of Jharkhand state of India with 21 inter simple sequence repeat (ISSR) primers. A total of 148 bands were produced, of which 79% was polymorphic. The pair wise genetic distance among the individuals varied from 0.186 to 0.329. The dendrogram grouped the individuals into 3 major clusters. Nei's heterozygosity analysis revealed 0.265 ${\times}$ 0.18 variability within the population. The high genetic variability present within the natural population of Daba ecorace of A. mylitta is indicative of their adaptational strategy in nature and have much importance for in situ conservation as well as utilization in breeding programs.
Morphologically, nine different slow-growing protoclones were screened from regenerated protoplasts of heterokaryotic Agaricus bisporus. As such, the present study is the first report on differentiating homo- and heterokaryotic protoclones using random amplified polymorphic DNA (RAPD) and inter-simple sequence repeat (ISSR) markers. Among 80 primers tested, the seven ISSR and seven RAPD primers selected for the analysis generated a total of 94 ISSR and 52 RAPD fragments, respectively. The ISSR fingerprinting also detected more polymorphic loci (38.29%) than the RAPD fingerprinting (34.61%). A principal coordinate analysis (PCA) was employed to evaluate the resolving power of the markers as regards differentiating protoclones. As a result, the mean polymorphism information content (PIC) for each marker system (i.e., 0.787 for RAPD and 0.916 for ISSR) suggested that ISSR is more effective for determining polymorphisms. The dendrograms constructed using RAPD, ISSR, and an integrated RAPD and ISSR marker system were highly correlated with one another as revealed by a high Mantel correlation (r= 0.98). The pairwise similarity index values also ranged from 0.64 to 0.95 (RAPD), 0.67 to 0.98 (ISSR), and 0.67 to 0.98 (RAPD and ISSR), whereas the mean similarity index values of 0.82, 0.81, and 0.84 were obtained for the RAPD, ISSR, and combined data, respectively. As there was a good correspondence between the RAPD and ISSR similarity matrices, ISSR would appear to be an effective alternative to RAPD in the genetic diversity assessment and accurate differentiation of homo- and heterokaryotic protoclones of A. bisporus.
ISSR분자 마커를 이용하여 왕대속 대나무의 유연관계를 분석 실시하였다. 전세계적으로 왕대속에 속하는 4종은 경제학적, 생태학적으로 중요한 식물 자원중 하나이다. 총 11개의 ISSR 프라이머 중 9개의 프라이머에서 증폭이 일어 났으며 총 64개의 밴드를 확인 할 수 있었다. ISSR분석결과 왕대속 4종의 대나무에서 70.49%인 43개의 다형현상이 나타났다. 4개의 분류군으로 분류된 왕대속 대나무의 집단내 다양성(Hs)은 0.092,집단간 다양성(Gst)은 0.499로 나타났다. 각 종에 대한 유전자 유동(Nm)은 0.559로 나타났다. 따라서 왕대속에 속하는 4종의 유전자 유동(Nm)은 아주 낮음을 알 수 있었다 4종의 분류군에 대한 유전자 다양성(Ht)은 0.291로 낮게 나타났으며 ISSR 마커로 명확하게 그들은 분류가 되었다. 또한 왕대속의 4종은 단일계통임을 확인할 수 있었다.
Recently, new ginseng cultivars having superior agricultural traits have been developed in Korea. For newly developed plant cultivars, the identification of distinctiveness is very important factors not only in plant cultivar management but also in breeding programs. Thus, eighty-five inter simple sequence repeat (ISSR) primers were applied to detect polymorphisms among six major Korean ginseng cultivars and two foreign ginsengs. A total of 197 polymorphic bands with an average 5.8 polymorphic bands and 2.9 banding patterns per assay unit across six Korean ginseng cultivars and foreign ginsengs from 236 amplified ISSR loci with an average 6.9 loci per assay unit were generated by 34 out of 85 ISSR primers. Three species of Panax ginseng including the Korean ginseng cultivars, P. quinquefolius, and P. notoginseng, could be readily discriminated using most tested primers. UBC-821, UBC-868, and UBC-878 generated polymorphic bands among the six Korean ginseng cultivars, and could distinguish them from foreign ginsengs. Sequence characterized amplified region (SCAR) marker system was introduced in order to increase the reproducibility of the polymorphism. One SCAR marker, PgI821C650, was successfully converted from the randomly amplified polymorphism by UBC-821. It showed the expected dominant polymorphism among ginseng samples. In addition, the specific polymorphism for Sunwon was generated by treating Taq I restriction enzyme to polymerase chain reaction products of PgI821C650. These results will serve as useful DNA markers for identification of Korean ginseng, especially Sunwon cultivar, seed management, and molecular breeding program supplemented with marker-assisted selection.
Faba bean (Vicia faba L.) is one of the most important legume crops in Egypt. However, production of faba bean is affected by several diseases including fungal diseases. Fusarium wilt incited by Fusarium oxysporum Schlecht. was shown to be the most common wilt disease of faba bean in Assiut Governorate. Evaluation of 16 faba bean genotypes for the resistance to Fusarium wilt was carried out under greenhouse conditions. Three molecular marker systems (inter-simple sequence repeat [ISSR], sequence related amplified polymorphism [SRAP], and simple sequence repeat [SSR]) and a biochemical marker (protein profiles) were used to study the genetic diversity and detect molecular and biochemical markers associated with Fusarium wilt resistance in the tested genotypes. The results showed that certain genotypes of faba bean were resistant to Fusarium wilt, while most of the genotypes were highly susceptible. The percentage of disease severity ranged from 32.83% in Assiut-215 to 64.17% in Misr-3. The genotypes Assiut-215, Roomy-3, Marut-2, and Giza2 were the most resistant, and the genotypes Misr-3, Misr-1, Assiut-143, Giza-40, and Roomy-80 performed as highly susceptible. The genotypes Assiut-215 and Roomy-3 were considered as promising sources of the resistance to Fusarium wilt. SRAP markers showed higher polymorphism (82.53%) compared with SSR (76.85%), ISSR markers (62.24%), and protein profile (31.82%). Specific molecular and biochemical markers associated with Fusarium wilt resistance were identified. The dendrogram based on combined data of molecular and biochemical markers grouped the 16 faba bean genotypes into three clusters. Cluster I included resistant genotypes, cluster II comprised all moderate genotypes and cluster III contained highly susceptible genotypes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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