Rock bream iridovirus (RBIV) is a member of the Megalocytivirus genus that causes severe mortality to rock bream (Oplegnathus fasciatus) with characteristic clinical signs of spleen enlargement. In this study, we assessed spleen size and RBIV copy number patterns in RBIV-infected rock bream to determine lethal and safe levels of virus copy number/spleen index that may define disease progress. We found that rock bream infected with RBIV ($1.1{\times}10^7virus\;copy\;number/100{\mu}l$) and held at 29, 26, 23 or $20^{\circ}C$ exhibited significantly higher levels of spleen size compared to $17^{\circ}C$. In dead condition (100% mortality at $20{\sim}29^{\circ}C$), the spleen index ($spleen\;weight/fish\;weight{\times}100$) and virus copy number were 3.00~5.38 and $10^6{\sim}10^8/{\mu}l$, respectively. Conversely, in survived condition (0% mortality at $17^{\circ}C$), spleen index and virus copy number was as low as not-infected control ($0.34{\sim}1.22/10^0{\sim}10^1/{\mu}l$, respectively). These findings suggest that spleen index can be an indicator of disease severity of RBIV disease.
Rock bream iridovirus (RBIV) causes high mortality and economic losses in rock bream (Oplegnathus fasciatus) aquaculture industry in Korea. Although, the immune responses of rock bream under RBIV infection have been studied, there is not much information at the different stages of infection (initial, middle and recovery). Gene expression profiling of rock bream under different RBIV infection stages was investigated using a microarray approaches. In total, 5699 and 6557 genes were significantly up- or down-regulated over 2-fold, respectively, upon RBIV infection. These genes were grouped into categories such as innate immune responses, adaptive immune responses, complements, lectin, antibacterial molecule, stress responses, DNA/RNA binding, energy metabolism, transport and cell cycle. Interestingly, hemoglobins (α and β) appears to be important during pathogenesis; it is highly up-regulated at the initial stage and is gradually decreased when the pathogen most likely multiplying and fish begin to die at the middle or later stage. Expression levels were re-elevated at the recovery stage of infection. Among up-regulated genes, interferon-related genes were found to be responsive in most stages of RBIV infection. Moreover, X-linked inhibitor of apoptosis (XIAP)-associated factor 1 (XAF1) expression was high, whereas expression of apoptosis-relate genes were low. In addition, stress responses were highly induced in the virus infection. The cDNA microarray data were validated using quantative real-time PCR. Our results provide novel inslights into the broad immune responses triggered by RBIV at different infection stages.
Mothishri, M.S.;Umasuthan, Navaneethaiyer;Thulasitha, William Shanthakumar;Whang, Ilson;Lee, Jehee
한국어병학회지
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제28권2호
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pp.99-107
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2015
Despite its economic importance as an aquaculture species, the molecular and genetic information regarding physiologically important elements in rock bream (Oplegnathus fasciatus) is not completely understood. Rab proteins play a vital role in cellular mechanisms and immunity as one of the key regulators of membrane trafficking. In this investigation, a Rab gene, named as RbRab-5C-like, was identified from Oplegnathus fasciatus. RbRab-5C-like protein exhibited high homology with Rab proteins of other species and possessed signature characteristics of Rab proteins with four conserved cysteine residues. Phylogenetic analysis showed that RbRab-5C-like clustered with other fish counterparts. The RbRab-5C-like genomic sequence possesses six exons and five introns. Transcriptional analysis revealed that RbRab-5C-like was ubiquitously expressed in all examined tissues with the highest expression occurring in the liver. While the structural and homologic characteristics of RbRab-5C-like suggest a strong conservation of this element in different species, its mRNA distribution implies a wide range of biological significance in rock bream.
We constructed a rock bream Oplegnathus fasciatus leukocyte cDNA library and a total of 795 expressed sequence tag (EST) clones were generated. Gene annotation procedures and homology searches of the sequenced ESTs were locally done by BLASTX for amino acid similarity comparisons. Of the 795 EST clones, 491 different ESTs showed significant homology to previously described genes while 304 ESTs were unidentified, hypothetical, or unnamed proteins. Encoding 121 different sequences were identified as putative bio-defense genes or genes associated with immune response.
Jeong, Ye Jin;Kim, Young Chul;Min, Joon Gyu;Jeong, Min A;Kim, Kwang Il
한국어병학회지
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제34권2호
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pp.149-159
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2021
Genus Megalocytivirus cause red sea bream iridoviral disease (RSIVD) and scale drop disease (SDD). Based on the phylogeny of the major capsid protein (MCP) and adenosine triphosphatase (ATPase) genes, megalocytiviruses except for SDD virus (SDDV) could be three different genotypes, red sea bream iridovirus (RSIV), infectious spleen and kidney necrosis (ISKNV), and turbot reddish body iridovirus (TRBIV). In this study, primary cells derived from the caudal fin of rock bream (Oplegnathus fasciatus) grew at 25℃ in Leibovitz's medium supplemented with 10% (v/v) fetal bovine serum and primocin (100 ㎍/mL). Rock bream fin (RBF) cells exhibited susceptibility to infections by different genotypes of megalocytiviruses (RSIV, ISKNV and TRBIV) with the appearance of cytopathic effects with an increase in the viral genome copy number. Furthermore, compared to grunt fin (GF) cells, even though 10 times lower number of RSIV genome copies were inoculated in RBF cells, viral genome copy number produced on RBF cells were 44 times higher than that of GF cells at 7 d post-inoculation. As the isolated RBF cells are sensitive to different genotypes of megalocytiviruses (RSIV, ISKNV and TRBIV), they can be used for future studies regarding in vitro viral infection and subsequent diagnosis.
This study investigated diurnal fasting and postprandial total ammonia nitrogen (TAN) excretion rates in juvenile Oplegnathus fasciatus (rock bream; mean body weight 45.8±1.1 g) at three temperatures (15, 20, and 25℃) in a recirculating system (three replicates). The fish were hand-fed twice daily (09:00 and 17:00 h) with commercial food (46.7% protein) until satiation. The results showed that the fasting and postprandial TAN excretion rates were temperature-dependent. The mean hourly rates were 7.7 (15℃), 10.2 (20℃), and 11.9 (25℃) mg kg fish-1 h-1 for fasting and 34.0 (15℃), 47.8 (20℃), and 60.2 (25℃) mg kg fish-1 h-1 for postprandial. At each temperature, two postprandial TAN excretion peaks were observed 2-4 h after feeding; the second peak was always higher. The TAN loss to nitrogen consumption ratio was 41.1-46.8 % and increased significantly with increasing temperature. Temperature affected fasting and postprandial TAN excretion in juvenile rock bream, providing insight for culture management.
Kim, Ju-Won;Park, Hyung-Jun;Baeck, Gun-Wook;Park, Chan-Il
한국어병학회지
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제23권2호
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pp.229-238
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2010
We constructed a rock bream (Oplegnathus fasciatus) liver cDNA library and a total of 1533 expressed sequence tag (EST) clones were generated. Gene annotation procedures and homology searches of the sequenced ESTs were analyzed using BLASTX. Of the 1533 EST clones, 1165 different ESTs showed significant homology to previously described genes while 368 ESTs were unidentified, hypothetical, or unnamed proteins. Encoding 106 different sequences were identified as putative bio-defense genes or genes associated with immune response.
To determine whether rock bream Oplegnathus fasciatus can be protected from rock bream iridovirus (RBIV) infection by intramuscular injection of long double-stranded RNAs (dsRNAs), we compared protective effect of virus-specific dsRNAs corresponding to major capsid protein (MCP), ORF 084, ORF 086 genes, and virus non-specific green fluorescent protein (GFP) gene. Furthermore, to determine whether the non-specific type I interferon (IFN) response was associated with protective effect, we estimated the activation of type I IFN response in fish using expression level of IFN inducible Mx gene as a marker. As a result, mortality of fish injected with dsRNAs and challenged with RBIV was delayed for a few days when comparing with PBS injected control group. However, virus-specific dsRNA injected groups exhibited no significant differences in survival period when compared to the GFP dsRNA injected group. Semi-quantitative analysis indicated that the degree of antiviral response via type I IFN response is supposedly equal among dsRNA injected fish. These results suggest that type I IFN response rather than sequence-specific RNA interference might involve in the lengthened survival period of fish injected with virus-specific dsRNAs.
Min, Joon Gyu;Jeong, Ye Jin;Jeong, Min A;Kim, Jae-Ok;Hwang, Jee Youn;Kwon, Mun-Gyeong;Kim, Kwang Il
한국어병학회지
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제34권1호
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pp.1-7
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2021
Red sea bream iridovirus (RSIV), belonging to the genus Megalocytivirus, is the predominant cause of mortality in marine fishes in Korea, including rock bream (Oplegnathus fasciatus). Rockfish (Sebastes schlegelii) are the host fish for RSIV, exhibiting no clinical signs or mortality. Cohabitation challenges, which mimicked natural transmission conditions, were performed to evaluate viral transmission between rock bream and rockfish, and to determine the pathogenicity and viral loads. In cohabitation challenge, artificially RSIV-infected rock bream were the viral donor, and healthy rockfish were the recipient. The results showed that although the donor rock bream had 95-100 % cumulative mortality (>108 viral genome copies/mg of spleen 7-14 days after viral infection), the recipient rockfish did not die, even when the viral genome copies in the spleen were >105 copies/mg. These results indicated asymptomatic infections. Notably, in a reverse-cohabitation challenge (artificially RSIV-infected rockfish as the viral donor and healthy rock bream as the recipient), RSIV horizontally infected from subclinical rockfish to rock bream (107 viral genome copies/mg of spleen 21 days after cohabitation) with 10-20% cumulative mortality. These results suggest that an asymptomatic, infected rockfish can naturally transmit the RSIV without being sacrificed.
본 실험은 TBT에 노출된 돌돔의 성장 및 혈액학적 변동을 검토하기 위하여 실시하였다. 돌돔은 TBT 0, 1, 2, 4, $8{\mu}g/L$ 농도에서 4주간 노출하였다. 돌돔의 성장은 $8{\mu}g/L$ TBT 농도에서 유의한 감소를 나타냈다. RBC count, hematocrit 값, hemoglobin 농도, 혈청 glucose 농도는 $8{\mu}g/L$ TBT 농도에서 유의한 감소를 나타낸 반면, 총 단백질 농도는 유의한 증가를 나타냈다. 또한 GOT 및 GPT 활성은 $8{\mu}g/L$ TBT 농도에서 유의한 증가를 나타냈다. 따라서 해역에 TBT 농도 $8{\mu}g/L$ 이상의 존재할 경우에는 돌돔의 성장 및 혈액학적 변동이 예상된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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