• 한국응용과학기술학회지
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• 제38권1호
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• pp.309-317
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• 2021

본 연구는 침출차 원료로 레드비트를 활용하기 위해서 세포독성, 항염증 및 항산화 등의 활성을 조사하고자 설계되었다. 항산화 효능은 DPPH 및 ABTS 라디컬 소거 활성을 분석하여 평가하였다. RAW 264.7 세포를 통해 MTT 분석으로 세포 생존율을 평가하고 LPS로 유도하여 활성산소종과 염증매개체(일산화질소, TNF-α, IL-6 등)의 생성량을 확인하였다. 그 결과, DPPH 및 ABTS 라디컬 소거활성은 농도 의존적으로 증가하였으며, 모든 농도에서 세포독성이 없음을 확인하였다. 또한, LPS로 유도한 RAW 264.7 세포에서 활성산소종(ROS)과 일산화질소(NO), IL-6, TNF-α 생성량을 유의적으로 감소시켰다. 따라서 이러한 결과는 레드비트가 안전한 항산화 및 항염증 효과를 가진 침출차의 원료로서 높은 잠재력을 가지고 있음을 시사한다.

• 생명과학회지
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• 제32권2호
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• pp.125-134
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• 2022

본 연구는 노니(Morinda citrifolia)에 함유된 주요 생리활성물질이 RAW 264.7 세포에서 JAK/STAT 신호전달 경로를 통하여 항염증 작용에 관여하는 것을 조사하였다. 건조된 M. citrifolia 열매의 MeOH 추출에 의한 유기용매의 순차 분획에서 얻은 EtOAc 분획물(Mc-EtOAc)에서 가장 높은 항산화 활성을 확인하였고, H₂O₂로 유도된 RAW 264.7 세포의 산화적 스트레스에 대한 세포보호 효과는 처리 농도의존적으로 세포독성을 차단하였다. LPS 처리로 71.6%의 RAW 264.7 세포 생존율에서 240 ㎍/ml의 Mc-EtOAc를 전처리한 군에서 84.5%의 세포 생존율 증가를 보였다. LPS로 유도된 RAW 264.7 세포의 NO 생성 저해활성은 240 ㎍/ml의 Mc-EtOAc에서 양성 대조군의 절반 수준으로 NO의 생성양을 감소시켰다. Mc-EtOAc 처리로 iNOS의 발현량은 농도의존적으로 유의하게 감소하였고, COX-2의 발현은 LPS 유도로 3배 정도로 증가되었으나, 120, 240 ㎍/ml의 Mc-EtOAc를 전처리시 농도의존적으로 유의하게 감소시켰다. 또한 pro-inflammatory cytokine IL-1β와 TNF-α의 mRNA 발현도 억제하였다. 이러한 Mc-EtOAc의 항염증 작용이 상위 신호전달 경로인 JAK/STAT 신호전달 경로 통해 일어나지를 조사한 결과, Mc-EtOAc의 전처리로 LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에서 pJAK1과 pSTAT3의 인산화 정도가 유의성 있게 감소하였다. 따라서 RAW 264.7 세포에서 Mc-EtOAc의 항염증 효과는 JAK1/STAT3 신호전달 경로를 통해 염증반응을 억제하는 것으로 사료된다.

• 한방안이비인후피부과학회지
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• 제20권2호통권33호
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• pp.68-76
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• 2007

Objectives : This experimental study was performed to investigate the effects of Sulfur extract on anti-inflammation and anti-Propionibacterium acnes. Methods : The cytotoxicity of Sulfur extract about viability of Raw 264.7 cell were tested using a colorimetric tetrazolium assay(MTT assay). To investigate the anti-inflammation effects of Sulfur extract on LPS-induced macrophage Raw 264.7 cell, we used ELISA kit and Western blots. We evaluated anti-oxidation effects of Sulfur extract on HaCaT cell by Enzyme recycling method. And we investigated the inhibitory effects of Sulfur extract on Propionibactrium acnes using paper disk diffusion method. Results: 1. Sulfur extract has a little cytotoxicity in Raw 264.7 cell. 2. Concentration of $100\;{\mu}g/m{\ell}$ Sulfur extract inhibited the production of NO in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 3. Sulfur extract showed a oxidation inhibition effect by decreasing the DPPH radicals. 4. Sulfur extract has not the significant inhibition effect of Propionibactrium acnes. Conclusions: These results indicate that Sulfur extract has anti-inflammation and anti-oxidation effects. If further study is performed, the use of Sulfur extract will be valuable and benificial in the therapy of Propionibactrium acnes.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제29권3호
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• pp.218-223
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• 2006

Erythropoietin (EPO), a hematopoietic factor, is required for normal erythrocyte developments, but it has been demonstrated to have many other functions, and its receptor is localized in other tissues. In the present study, we investigated whether EPO can promote other cell proliferation and possible molecular mechanisms. EPO restored the inhibition of the RAW264.7 and PC12 cell growth by fetal bovine serum (FBS) withdrawal in a dose dependent manner, but not that of other cell types tested. The restoring effect of EPO was completed when the RAW264.7 cells were cultured in the medium containing as low as 3% of FBS, and 10 U/mL EPO could replace FBS. The restoring effect of EPO in the RAW264.7 cells was associated with the increased of c-Fos and c-Jun expression as well as AP-1 activation. These data demonstrate that EPO can stimulate RAW264. 7 cell as well as PC12 cell growth even when the cells were cultured without FBS or in the presence of small amounts of FBS in the medium, and this stimulating effect is associated with the activation of AP-1 transcription factor.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제29권10호
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• pp.890-897
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• 2006

In inflammatory responses, induction of cytokines and other immune regulator genes in macrophages by pathogen-associated signal such as lipopolysaccharide (LPS) plays a crucial role. In this study, the gene expression profile changes by LPS treatment in the macrophage/monocyte lineage cell line RAW264.7 was investigated. A 60-mer oligonucleotide microarray of which probes target 32381 mouse genes was used. A reverse transcription-in vitro translation labeling protocol and a chemileuminescence detection system were employed. The mRNA expression levels in RAW264.7 cells treated for 6 h with LPS and the control vehicle were compared. 747 genes were up-regulated and 523 genes were down-regulated by more than 2 folds. 320 genes showing more than 4-fold change by LPS treatment were further classified for the biological process, molecular function, and signaling pathway. The biological process categories that showed high number of increased genes include the immunity and defense, the nucleic acid metabolism, the protein metabolism and modification, and the signal transduction process. The chemokine-cytokine signaling, interleukin signaling, Toll receptor signaling, and apoptosis signaling pathways involved high number of genes differentially expressed in response to LPS. These expression profile data provide more comprehensive information on LPS-target genes in RAW264.7 cells, which will be useful in comparing gene expression changes induced by extracts and compounds from anti-inflammatory medicinal herbs.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제16권4호
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• pp.299-306
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• 2011

The present study was designed to evaluate the inhibitory effects of fermented Liriope platyphylla extract on the production of inflammation-related mediators (NO, ROS, NF-${\kappa}B$, iNOS and COX-2) and pro-inflammatory cytokines (TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6) in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 macrophages. Freeze-dried Liriope platyphylla was fermented by Saccharomyces cerevisiae and extracted with 70% ethanol. In lipopolysaccharide-stimulated macrophage cells, the treatment with fermented Liriope platyphylla extract decreased the generation of intracellular reactive oxygen species dose-dependently and increased antioxidant enzyme activities, including superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase. Fermented Liriope platyphylla extract also inhibited NO production in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 cell. The expressions of NF-${\kappa}B$, iNOS, COX-2 and pro-inflammatory cytokines were inhibited by the treatment with fermented Liriope platyphylla extract. Thus, this study shows the fermented Liriope platyphylla extract could be effective at inhibiting the inflammation process.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제44권3호
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• pp.383-390
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• 2016

본 연구는 대식세포에서 LPS를 이용하여 염증 유사 세포 모델을 만들고 염증 유사 대식세포 모델에서 성체줄기세포의 면역 조절 능력을 평가하였다. LPS 자극에 의해 증가된 IL-1β, TNF-α 및 IL-10의 생성은 성체줄기세포를 공배양한 실험군 뿐만 아니라 성체줄기세포를 배양한 상층 배양액을 처리한 실험군에서도 동일한 효과를 나타내었으며, 또한 성체줄기세포 유래 엑소좀을 염증 유사 대식세포 모델에 처리하여 유사한 결과를 관찰하였다. 이 결과는 성체줄기세포 자체의 염증 억제 기능보다는 성체줄기세포 유래 엑소좀을 포함하여 성체줄기세포가 분비하는 bioactive molecules에 의해 세포 간 신호 전달이 이루어지고 있음을 의미하며, 이러한 엑소좀은 염증 관련 질환 분야에 치료적 적용이 가능하고 또한 새로운 염증 치료제 개발의 툴로 사용될 수 있음을 시사한다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제41권12호
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• pp.1671-1676
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• 2012

9 종류의 종자 중 대식세포를 자극하여 NO 생성능이 높은 메밀, 민들레, 봉선화, 해바라기 4종의 종자를 선별하였다. 선별된 4종의 종자 추출물이 RAW 264.7 세포를 활성화시켜 면역을 증진시키는 효과를 알아보기 위해 RAW 264.7 세포와 T세포를 이용하여 면역 활성능 관련 지표를 조사하였다. 4종의 종자를 대식세포에 처리하였을 때 면역 활성의 지표가 되는 NO, cytokine(TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, IL-10)의 생성이 추출물을 처리하지 않은 대조군에 비해 증가되었고, Molt-4 세포에 처리하였을 때 대조군에 비해 세포가 증식되었다. 이와 같은 결과는 종자 추출물을 섭취하였을 때 외부로부터의 어떠한 자극이 있기 이전에 체내의 모든 조직에 분포하면서 1차적으로 이물질을 제거하는 대식세포를 자극하여 cytokine 등의 면역매개물질을 생성하여 인체의 비특이적 면역반응을 증가시킴으로써 항원을 공격, 제거하는 등의 작용을 통해 자연 면역반응에 있어 중요한 역할을 할 수 있을 것으로 판단된다.

• Korean Journal of Acupuncture
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• 제26권3호
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• pp.69-76
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• 2009

Objectives : 본 연구의 목적은 제습, 해독, 통리관절등의 효능이 있는 토복령이 RAW264.7 대식세포주에서 lipopolysaccharide(LPS)로 처치하여 생성되는 nitric oxide(NO)와 prostaglandin $E_2$($PGE_2$)에 억제작용이 있는지 관찰하고자 하는 것이다. Methods : 토복령이 RAW264.7 대식세포주에 세포독성이 유무를 관찰하기 위하여 농도별 MTT assay를 수행하여 세포생존율을 측정하였다. 또한 LPS로 염증유발된 RAW264.7 대식세포주에서 토복령의 농도별 처치가 NO 및 $PGE_2$ 생성억제에 미치는 영향을 관찰하고자 NO 및 $PGE_2$ assay를 수행하였다. Results : 토복령의 농도별 처치가 RAW264.7 대식세포주에서 세포독성을 유발하는지 MTT assay로 측정한 결과 세포독성은 관찰되지 않았으며, 토복령은 LPS처치로 인하여 증가된 NO 및 $PGE_2$ 생성을 통계학적으로 유의하게 감소시킴을 관찰하였다. Conclusions : 본 연구를 통하여 토복령은 RAW264.7 대식세포주에서 LPS로 유도된NO 및 $PGE_2$ 생성을 효과적으로 억제시킴으로써 추후 염증질환의 치료제로서 가능성을 확인하였다.

• 대한한방부인과학회지
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• 제34권3호
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• pp.15-28
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• 2021

Objectives: This study was designed to examine the anti-cancer activity by innate immunomodulating and anti-inflammatory effects of liriopis tuber water extract (LPE). Methods: Cell cytotoxicity was tested with 4T1 mouse mammary carcinoma cells, spleen cells, macrophage, and RAW264.7 cells. To investigate innate immunomodulating effects of LPE on macrophage, we measured tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin-12 (IL-12), and interleukin-10 (IL-10). To investigate innate immunomodulating effects of LPE on RAW264.7 cell, we measured TNF-α, interleukin-6 (IL-6). In addition, TNF-α and nitric oxide (NO) induced by lipopolysaccharide (LPS) were measured after treating with LPE to observe innate immunomodulating effect of LPE on RAW264.7 cell. Also, mitogen-activated protein kinase (MAPK) and nuclear factor κB (NF-κB) were examined by western blot analysis. Results: In an in vitro cytotoxicity analysis, LPE affected tumor cell growth above specific concentration. As compared with the control group, the production of TNF-α, IL-12, and IL-10 were increased in macrophage. As compared with the control group, the production of TNF-α and IL-6 were increased in RAW 264.7 cell. The expression of TNF-α and NO induced by LPS after treating LPE was decreased. In addition, treatment of RAW 264.7 cell with LPE increased the phosphorylation levels of p-extracellular signal-regulated kinase (p-ERK), p-Jun N-terminal kinase (p-JNK), and p-p38. Conclusions: LPE might have impact on the anti-cancer effect by activation of innate immune system and inflammation control.