Ko Jeong-Ae;Choi Jeong-Ran;Xudong He;Kim Hyun-Soon
Korean Journal of Plant Resources
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v.19
no.3
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pp.432-435
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2006
A rapid and mass propagation method for multiple shoots and plant regeneration using bulb scales of Muscari comosum var. plumosum were developed. In vitro different parts of bulb scale as explants were cultured on 11 kinds of MS (1962) media supplemented with various plant growth regulators to induce shoot and callus. A combination of 2.0 mg/L 6-BA and 2.0 mg/L IBA on MS medium was the most favorable and induced the highest production (80%) of shoot formation after 30 days. We also found that the middle part of bulb scale was the best for mass propagation of Muscari comosum var. plumosum of which production could reach 64.4%.
An efficient regeneration system was developed using leaf, petiole, and internode explants. Highly embryogenic callus was obtained following cultivation on MS basal nutrient supplemented with 2 $mg/{\ell}$ 2,4-D. Globular, heart, torpedo and cotyledon shaped somatic embryo were produced from the surface of embryogenic callus. Direct shoot regeneration without intermediate callus formation has been achieved on MS medium supplemented NAA and BAP. The percentage of response varies with different concentration of auxin and cytokinin treated individually or in combination. The best shoot regeneration response (54.28%) and number of shoot per explant (12.67) were achieved on the medium supplemented with 0.1 $mg/{\ell}$ NAA and 1 $mg/{\ell}$ BAP. The regenerated shoot transformed into young plant when cultured into elongation and root induction medium. More than 90% of in vitro propagated plants could survive when transferred to the greenhouse for acclimation. This optimized regeneration system can be used for rapid shoot proliferation and genetic transformation.
Avalos-Ruiz, Diane;Ten, Leonid N.;Kim, Chang-Kil;Lee, Seung-Yeol;Jung, Hee-Young
The Plant Pathology Journal
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v.38
no.4
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pp.403-409
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2022
In biological particles such as Fusarium species, ice nucleation activity (INA) has been observed. Fusarium strains isolated from apple declined trees in Korea were identified with a multilocus sequence analysis using the tef1 and rpb1 genes. Droplet-freezing and tube-freezing assays were used to determine the INA of the strains, using Pseudomonas syringae pv. syringae KACC 21200 as a positive control and resulting in seven INA+ fungal strains that were identified as F. tricinctum (KNUF-21-F17, KNUF-21-F18, KNUF-21-F29, KNUF-21-F32, KNUF-21-F38, KNUF-21-F43, and KNUF-21-F44). The effect of Fusarium INA+ KNUF-21-F29 was compared to that of INA- strains on Chrysanthemum morifolium cv. Shinma explants. A higher callus formation and no-shoot formation were observed, suggesting that fungal INA could play a role in cold injuries and be a factor to consider in rapid apple decline. To the best of our knowledge, this is the first report of INA fungal strains isolated in Korea.
The insecticidal protein gene in the pKL-20-1 clone derived from Bacillus thuringiensis serovar. kurstaki plasmid was subcloned in the plant shuttle vector, pGA643. The 7.3 kb fragment was cloned in the BglII and Hpal sites of pGA643 vector and expressed in E. coli S17-1, which produced insecticidal proteins killing Bombyx mori larvae. The clone was named pHL-20. The protoplast formation, calli induction and plantlet regeneration of Nicotiana tabacum was carried out. A tremendous number of mesophyll protoplasts of N. tabacum were formed, up to 7$\times$105 protoplast per ml, for 20 hours in darkness in the enzyme solution of 0.5% cellulase and 0.1% macerosin, pH 5.8. The viabilities of the protoplasts were maintained above 80% for 6 days in the media containing 2mg/1 of NAA and 1mg/1 of kinetin. Calli were induced from the protoplasts and leaves of the N. tabacum on MS medium containing 0.5mg/1 BAP. Under the culture conditions the protoplasts underwent repeated cell division into calli. Plantlets were regenerated from callus cultures derived from protoplast and leaves. Shoots were induced in a medium containing 1mg/1 of BAP.
Calla lilies (Zantedeschia spp.) are monocotyledonous ornamental plants which belongs to the Araceae family. After the release of elite calla cultivar, an efficient propagation system is needed for commercial use. Despite the use of conventional propagation methods such as splitting of tubers and rhizomes of calla, rapid and efficient propagation system should be developed. In order to achieve this goal, stem segments contained apical meristems derived from calla lily cultivar (cv. Gag-si) were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with various concentrations of cytokinin and auxin. This was aimed at inducing embryogenic calluses, shoots and multiple shoots. As a result, about 25% of induction rates of yellow embryogenic calluses were observed with MS medium containing both $0.5mg{\cdot}L^{-1}\;NAA$ and $1.5mg{\cdot}L^{-1}\;BA$ as growth regulators. In the experiments involving the regeneration from embryogenic calluses through shoot formation, MS medium supplemented with $0.5mg{\cdot}L^{-1}\;IAA$ and $2.0mg{\cdot}L^{-1}\;BA$ showed the highest rates at approximately 85 ~ 90% with regard to the formation of shoots in calla. Moreover, multiple shoots needed for rapid propagation were generated when explants were cultured on MS medium supplemented with $0.5mg{\cdot}L^{-1}\;IAA$ and $2.0mg{\cdot}L^{-1}\;BA$ with 40% of formation rate. In this study, the combination of auxin and cytokinin showed positive effects on both the induction of embryogenic calluses, the formation of shoots as well as multiple shoots in calla. The regeneration system described here can contribute to the development of breeding programs of calla in the future.
Anther cultivation for crop breeding is a method of rapid production of homozygosities by greatly reducing the time required for at least six generations to develop new varieties using conventional breeding methods. This technique of producing anther culture provides an opportunity to obtain more green plants from a methodological point of view, and the techniques that save time and effort in anther culture are also important because they increase the efficiency of culture. This study compared the callus induction rate and green plant regeneration rate of a one-step and a two-step culture that differ in their culture media and culture methods. One-step culture allows callus induction and plant regeneration in one medium, whereas two-step culture requires induction and plant regeneration in two different media. In this study, we compared the callus induction and plant regeneration rates of rice anthers as one-step and two-step cultures. The callus formation rate was 13.0% for one-step cultures and 8.6% for two-step cultures, so the rate was 4.4% higher for one-step cultures than for two-step cultures. The plant regeneration rate was 1.0% in one-step cultures and 3.0% in two-step cultures, so the regeneration rate was three times higher for the two-step cultures than for one-step cultures. This suggests that the two-step cultures are more efficient than the one-step cultures for haploid production.
Macroalgal tissues can be used as indicating materials for environmental assessment using several algal biotechnology techniques. As bioassay test organisms, macroalgal tissues are required as an axenic state for suitable biological indicators. Callus formation and blade regeneration under suitable culture conditions are also useful for the tests. Quantitative method using tetrazolium chloride or $alamarBlue^{TM}$ is devised on a rapid assessment of the seaweed viability. The use of RT-PCR especially differential display technique should provide the means for the detection and isolation of the responding genes induced by the environmental stress. Seaweed thriving in more environmental changes might contain more diverse biologically active substances.
Park, Min Wan;Ryu, Shi Hyun;Lee, Yoon Young;Song, Jae-Mo;Kim, Jin Ho;Ahn, Young-Hee;Bae, Kee Hwa
Journal of Plant Biotechnology
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v.45
no.3
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pp.266-272
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2018
A Polygonatum stenophyllum Maxim. is an important endangered plant belonging to the family Liliaceae. A method was developed for the rapid micropropagation of P. stenophyllum through plant regeneration from rhizome (1-year, 3-years, and 5-years) explant-derived calli. The rhizome segments were cultured in Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with varying concentrations of 2,4-D (0, 0.5, 1.0, $1.5mg{\cdot}L^{-1}$) for callus induction. In media supplemented with $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ of 2,4-D, 87% of 3-years rhizome produced callus. Subsequently, the callus was transferred to 1/2MS medium supplemented with various concentrations of IAA, IBA, NAA, and 2,4-D (0, 0.1, 0.5 and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$) for adventitious shoot formation. The highest percentage of adventitious shoot induction (57%) was observed in 1/2MS medium containing $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ of NAA. Elongation of the adventitious shoot was achieved in 1/2MS medium supplemented with $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ of BA. Rooting was achieved in 1/2MS medium without any hormones. It is hypothesized that the stated in vitro propagation protocol will be useful for conservation and mass propagation of the endangered Polygonatum stenophyllum Maxim. for bioresources.
Lilium cernum Komarvo. is an important endangered plant belonging to the family Liliaceae. A method was developed for the rapid micropropagation of L. cernum through plant regeneration from bulb scales explant-derived calli. The bulb scales segments were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0, 0.5, 1.0, $3.0mg{\cdot}L^{-1}$ kinetin and 0, 0.1, 0.5, $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA or 2,4-D for callus induction. In media with $0.5{\sim}3.0mg{\cdot}L^{-1}$ kinetin and $0.1{\sim}1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA and 2,4-D, 95~100% of explants produced callus. They were then transferred to MS medium supplemented with various concentrations of NAA (0, 0.01, 0.05 and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$) in combination with BA (0, 1.0 and $2.0mg{\cdot}L^{-1}$) for bulbet formation. Bulbet induction (78%), weight (468 mg) and size (15.5 mm) were obtained the highest on MS medium containing $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA. In vitro frequency of plant regeneration was not significantly treated in strength of MS and sucrose concentration. Chlorophyll contents in 1/2MS with $50g{\cdot}L^{-1}$ sucrose treatments were higher than those in control and another treatment. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation and mass propagation of this endangered plant.
This study was performed to investigate the effects of electrical stimulation on femoral fracture healing in dogs. Eight healthy dogs from 4 to 5 $\beta^3$ were used in this experiment. In the treatment group, anode and cathode were connected to proximal and distal site apart from the fracture line by 2 cm and electrical stimulation was applied to the fracture site for l5minutes by 2 V, 25 Hz and for a month. The control group was connected to electrostimulator as the treatment group, but no electrical stimulation was applied. Various parameters were evaluated including radiograph and serum levels of total-ALP(TALP), bone-ALP(BALP) and osteocalcin. The radiography revealed more rapid callus formation in the treatment group than in the control by about a week. The total-ALP levels of the treatment group were higher than those of the control group from the 2nd to the 24th day(p< 0.05). The bone-ALP levels of the treatment group were significantly higher than those of the control from the 2nd to the 24th day(p< 0.05). The bone-ALP/ total-ALP ratios of the treatment group were higher than those of control throughout this experiment but there were no significance. There were no significance in the osteocalcin levels between two groups. In conclusion, the electrical stimulation on femoral fracture site was effective for bone healing in dogs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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