Single spore isolates of Plasmodiophora brassicae e4 and e9 obtained from diseased Chinese cabbage were identified as race 4 and race 9, respectively, by the Williams' differential variety set. To confirm the possibility of variation in same generation and progeny of a single spore isolate of P. brassicae, random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis was conducted using the URP 3, 6 and OPA 7 primers. There was no difference in band type at each part of the gall of Chinese cabbage obtained by inoculation of e4 and e9 and amplification using the URP 3 and 6 primers when the same generation was analyzed. In addition, the progeny analysis, which was expanded to the third generation and conducted using the URP 3 and OPA 7 primers, revealed no differences in the band type of the e4 isolate. Based on these results, the single spore isolate of P. brassicae was genetically stable.
A Lactobacillus isolate was collected from the feces of a healthy Korean individual and named as Lactobacillus ruminus SPM0211. It was further characterized by subjecting it to an antibiotic resistance test and genetic analysis. In the antibiotic resistance test, all tested Lactobacillus spp. were classified as 'high resistance' for multiple antibiotics, such as isoniazid, ethambutol, cycloserine, and vancomycin. L. ruminus SPM0211 was classified as 'high resistance' for streptomycin also, while the other tested Lactobacillus spp. were classified as low resistance. This suggests that the antimicrobial spectra may be a good indicator in the discrimination of this strain among the tested Lactobacillus spp. In a polymerase chain reaction-random amplified polymorphic DNA (PCR-RAPD) analysis using the Microbial Uniprimer kit, L. ruminus SPM0211, and L. suebicus were clustered as a group with a 74.3% similarity level, suggesting that these two species are genetically related. Thus, our data suggest that the PCR-RADP method using the Microbial Uniprimer kit may be valuable in discriminating L. ruminus SPM0211 from other Lactobacillus spp.
In this study, we report genetic characterization of Orobanche cumana, the causal agent of sunflower wilting in Serbia. The genetic diversity of this parasitic plant in Serbia was not studied before. Random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers and partial rbcL gene sequences analysis were used to characterize the O. cumana populations at the molecular level. While phylogenetic analyses of RAPD-PCR amplicons were performed using unweighted pair-group Method analyses, rbcL gene sequences were analyzed using neigbor joining method and minimum spanning tree. Molecular analyses of RAPD-PCR analysis revealed high genetic diversity of O. cumana populations which indicated high adaptive potential of this parasitic weed in Serbia. Further analyses of rbcL gene using minimum spanning tree revealed clear differences among diverse sections of Orobanche genus. Although this molecular marker lacked the resolution to display intrapopulation diversity it could be a useful tool for understanding the evolution of this parasitic plant. Our results suggested that O. cumana has great genetic potential which can lead to differentiation of more virulent races which is important for determining crop breeding strategies for their control.
감귤 '성전온주'(C. unshiu Marc)와 '병감'(C. reticulate Blanco)을 교배하여 얻은 다배성종자에서 교잡실생을 생육초기에 효과적으로 식별할 수 있는 방법 얻고자 PCR 기법에 바탕을 둔 RAPD와 SRAP 방법을 수행하였다. UBC (9, 27, 229, 230, 254) 프라이머와 SRAP (F4/R27, F7/R14, F12/R10, F44/R62) 프라이머 조합들을 사용하여 55개의 교배종자에서 얻은 실생들을 조사한 결과 37개의 종자에서 교잡실생을 식별할 수 있었다. F7/R14프라이머 조합에서는 45.5% (25/55)의 교잡실생을 식별할 수 있었고, UBC27 프라이머에서는 50.9% (28/55)의 식별효율을 보였다. 성전온주와 병감의 교배종자에서 UBC27 프라이머와 F7/R14 프라이머조합을 동시에 적용하였을 때에는 33개(60%, 33/55)의 종자에서 교잡실생을 식별할 수 있었다. 따라서 RAPD와 SRAP를 이용하였을 때 다배성 종자에서 교잡실생을 생육초기에 효율적으로 식별할 수 있었다.
본 연구는 RAPD PCR 분석을 통하여 한국의 서한아 수계(한강, 금강)와 남한아 수계(섬진강, 낙동강)에 서식하는 쉬리 집단들 간의 유전변이를 비교하였다. 4집단들 간의 유전적 변이를 분석한 결과, 사용한 12개의 random primer들 모두에서 서한아 수계 집단과 남한아 수계의 집단들을 구분하여 주는 특이적 PCR 단편들을 확인할 수 있었다. 유전적 유사도 분석에서 한강, 금강의 서한아 수계 집단들과 섬진강, 낙동강의 남한아 수계 집단들의 유전적 유사도는 0.49~0.53로 낮게 나타났고 유전적 거리는 0.63~0.71로 높게 나타났다. 유전적 거리에 기초한 UPGMA dendrogram 분석에서도 서한아 수계와 남한아 수계의 집단들이 명확하게 구분되었다. 따라서 서한아와 남한아 수계의 쉬리 집단은 유전적 구조에 있어 큰 차이가 있으며, 남한아 수계의 쉬리는 서한아 수계 쉬리와 진화적으로 뚜렷하게 구분되는 집단으로 판단된다.
본 연구는 부착규조류에 따른 부착성 요각류 Tigriopus japonicus의 nauplius 생산력을 알아보기 위하여 실시하였다. 실험에 사용된 T. japonicus는 부산 동백섬 부경대학교 수산과학연구소 부근에 있는 tidal pool에서 동물성부유생물망으로 채집하였다. 먹이생물로는 부경대학교 한국해양 미세조류 은행에서 보관중인 부착규조류 중 중형종인 Caloneis schroder를 대표종으로 이와 크기가(14.8~27.5$\mu\textrm{m}$) 유사한 종들을 대상으로 형태를 현미경 하에서 관찰하고, 지역과 분리일자 등을 고려하여 유사종을 선별한 후 최종적으로 종의 유전적 유사성을 밝히기 위하여 RAPD-PCR (random amplified polymorphic DNA polymerase chain reaction)을 실시하였다. 이 중 Caloneis schroder와 유전적으로 유사성이 낮은 Navicula spp. (KMCC B-245, 393, 394, 581) 4종을 선별하여 T. japonicus의 먹이로 사용하여 포란한 암컷의 nauplius 생산력을 3반복 조사하였다. Genomic DNA는 대부분의 종에서 성공적으로 검출되었으며, 종에 따라 PCR 증폭산물이 나타나지 않은 경우도 있었으므로, PCR 산물이 나타난 종에 대해서만 분석하였고, 증폭된 DNA band는 대부분 크기 0.5~2.0kb 범위에서 나타났다. 실험에 사용된 부착규조류 간의 유사성을 알아보기 위하여 similarity matrix를 분석한 결과 F값의 범위는 0.00에서 1.00까지 였으며, Caloneis schroder와 유사성이 낮은 종들에 비하여 유사성이 높은 종들이 더 많이 나타났다. 이들을 먹이로 하여 포란한 T. japonicus의 실험구별 nauplius 평균 개체수를 살펴보면, KMCC B-394가 255.7마리로 가장 높았던 반면 KMCC B-581가 29.7마리로 가장 낮았다. 그 외 KMCC B-245가 120.0마리, KMCC B-393가 76.0마리, Caloneis schroder가 32.3마리 각각 나타났다. 이와같은 결과를 볼 때 T. japonicus의 nauplius 생산력은 규조 종에 따라 큰 차이가 있는 것으로 판단된다.
In, Dong-Su;Kim, Young-Chang;Bang, Kyong-Hwan;Chung, Jong-Wook;Kim, Ok-Tae;Hyun, Dong-Yoon;Cha, Seon-Woo;Kim, Tae-Soo;Seong, Nak-Sul
한국약용작물학회지
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제13권5호
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pp.249-253
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2005
This study was carried out to develop convenient and reproducible methods for identifying the genetic relationship among germplasms of Panax species based on molecular genetics. Using random amplified polymorphic DNA (RAPD) and inter simple sequence repeat (ISSR) analyses, genetic polymorphism of the Panax species was investigated with following cultivars and accessions, such as Chunpoong, Yunpoong, Kopoong, Sunpoong, and Kumpoong in domestic cultivars, Hwangsuk, Jakyung and Suckju in domestic accessions, and Panax quinquefolius L. and Panax japonicus C.A. Meyer in foreign introduced accessions, respectively. Specific DNA fragments ranging from 200 to 3,000 base pairs in size could be obtained with various ISSR and RAPD primers under the optimized PCR conditions. The dissimilarity coefficients among the genetic polymorphisms of ginseng cultivars and accessions were calculated from 0.26 to 0.90 in RAPD and from 0.12 to 0.89 in ISSR analysis, respectively. Eleven plant samples were grouped siblings together with cultivars and parents based on cluster analysis of genetic distance depending on genetic property such as origin of the species. In results, both RAPD and ISSR analyses were useful for identifying the genetic relationship among cultivars and accessions of Panax species at DNA level.
A total of 37 bacterial isolates were obtained from dye-contaminated soil samples at a textile processing factory in Nakhon Ratchasima Province, Thailand, and the potential of the isolates to decolorize and biotransform azo dye Reactive Red 141 (RR141) was investigated. The most potent bacterium was identified as Paenibacillus terrigena KKW2-005, which showed the ability to decolorize 96.45% of RR141 (50 mg/l) within 20 h under static conditions at pH 8.0 and a broad temperature range of 30-40℃. The biotransformation products were analyzed by using UV-Vis spectrophotometry and Fourier-transform infrared spectroscopy. Gas chromatography-mass spectroscopy analysis revealed four metabolites generated from the reductive biodegradation, namely sodium 3-diazenylnaphthalene-1,5-disulfonate (I), sodium naphthalene-2-sufonate (II), 4-chloro-1,3,5-triazin-2-amine (III) and N1-(1,3,5-triazin-2-yl) benzene-1,4-diamine (IV). Decolorization intermediates reduced phytotoxicity as compared with the untreated dye. However, they had phytotoxicity when compared with control, probably due to naphthalene and triazine derivatives. Moreover, genotoxicity testing by high annealing temperature-random amplified polymorphic DNA technique exhibited different DNA polymorphism bands in seedlings exposed to the metabolites. They compared to the bands found in seedlings subjected to the untreated dye or distilled water. The data from this study provide evidence that the biodegradation of Reactive Red 141 by P. terrigena KKW2-005 was genotoxic to the DNA seedlings.
Le, Duy;Nguyen, Chon M.;Mann, Richard K.;Yerkes, Carla N.;Kumar, Bobba V.N.
Journal of Plant Biotechnology
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제44권4호
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pp.472-477
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2017
Barnyardgrass (Echinochloa crus-galli) is one of the worst weeds in rice (Oryza sativa), but there are few reports about the genetic diversity and herbicide resistance of barnyardgrass in Vietnam. In this study, we used random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis and greenhouse testing to study the genetic diversity and quinclorac resistance levels of 15 Echinochloa crus-galli populations in the Mekong Delta, Vietnam, and the state of Arkansas, U.S. The quinclorac resistance of Echinochloa crus-galli populations in Vietnam was confirmed; 9 populations were resistant to quinclorac with R/S ratios ranging from 1.9 to 6.3. Six oligonucleotide primers produced a total of 55 repeatable bands of which 46 were polymorphic (83.3% average) among the 15 populations. Genetic distance was calculated, and cluster analysis separated the 15 populations into 2 main clusters with the genetic distances within the clusters ranging from 0.09 to 0.39. The two main clusters were divided into 7 subclusters, and the quinclorac resistant and susceptible populations were located randomly within each subcluster. Six out of 13 weed populations from Vietnam belonged to one cluster and a single Echinochloa species. The remaining 7 populations were identified as potentially different species in the Echinochloa genus. Nine Echinochloa populations from Vietnam were tested and identified as quinclorac resistant. The connection between quinclorac resistance levels and weed groups defined by RAPD analysis in the study is unclear; the quinclorac resistance of each resistant population could have evolved individually, regardless of differences in genetic diversity and location of the sampled populations.
Morphologically, nine different slow-growing protoclones were screened from regenerated protoplasts of heterokaryotic Agaricus bisporus. As such, the present study is the first report on differentiating homo- and heterokaryotic protoclones using random amplified polymorphic DNA (RAPD) and inter-simple sequence repeat (ISSR) markers. Among 80 primers tested, the seven ISSR and seven RAPD primers selected for the analysis generated a total of 94 ISSR and 52 RAPD fragments, respectively. The ISSR fingerprinting also detected more polymorphic loci (38.29%) than the RAPD fingerprinting (34.61%). A principal coordinate analysis (PCA) was employed to evaluate the resolving power of the markers as regards differentiating protoclones. As a result, the mean polymorphism information content (PIC) for each marker system (i.e., 0.787 for RAPD and 0.916 for ISSR) suggested that ISSR is more effective for determining polymorphisms. The dendrograms constructed using RAPD, ISSR, and an integrated RAPD and ISSR marker system were highly correlated with one another as revealed by a high Mantel correlation (r= 0.98). The pairwise similarity index values also ranged from 0.64 to 0.95 (RAPD), 0.67 to 0.98 (ISSR), and 0.67 to 0.98 (RAPD and ISSR), whereas the mean similarity index values of 0.82, 0.81, and 0.84 were obtained for the RAPD, ISSR, and combined data, respectively. As there was a good correspondence between the RAPD and ISSR similarity matrices, ISSR would appear to be an effective alternative to RAPD in the genetic diversity assessment and accurate differentiation of homo- and heterokaryotic protoclones of A. bisporus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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