To study the resistance mechanism of E. faecalis to LCB01-0371, several resistant mutants to LCB01-0371 or linezolid were isolated by step-wise selection. The frequency of spontaneous mutations resistant to LCB01-0371 was lower than that of linezolid in E. faecalis. The genetic variations in resistant mutants were analyzed by DNA sequencing of domain V of 23S rRNA in each mutant. The first-step mutant to LCB01-0371 had a G2576T point mutation in V domain of 23S rRNA. However, no resistant mutant to LCB01-0371 was isolated in second-step mutant selection.
2002년에서 2004년에 걸쳐, 우리 나라의 넙치 양식장에서 질병의 증상이 보이는 중간 육성 단계의 넙치를 대상으로 다수의 Vibrio속 세균을 분리 동정하였으며 그 중에서 V. ichthyoenteri균이 높은 비율을 차지하고 있었다. 일반적으로 V. ichthyoenteri는 넙치의 자어기 장관백탁증의 원인균으로 잘 알려져 있으며, 미성어의 병어로부터 분리되었다는 점에서 여러 크기의 넙치 및 종묘 생산에 미치는 영향을 알고자 하였다. 본 연구는 미성어 넙치에서 분리된 균주그룹과 장관백탁증에 걸린 넙치 자어에서 분리한 V. ichthyoenteri 참조 균주 두 그룹간의 생화학적 및 생리학적 성상, 유전학적 특성을 비교 분석함으로서 분리 균주를 V. ichthyoenteri로 동정하고, 이들의 어병학적 특성을 조사하였다.실험 결과 시험 균주와 참조 균주간의 생화학적 특성과 생리학적 성상이 거의 동일한 것으로 나타났다.본 연구에서 분리 균주와 참조 균주의 16S-23S rRNA intergenic space (IGS) region을 cloning하여 염기 서열을 분석한결과 3개의 참조 균주와 19개의 분리 균주들은 V. ichthyoenteri 참조 균주와 99.1 ~ 100% 동일하였으며 V. ichthyoenteri는 3개 이상의 PCR products를 보였다. 이들 각각에 대한 tRNA type을 분석한 결과, no-tRNA, tRNAGlu(TTC) type 그리고 tRNAIle(GAT)와 tRNAAla(TGC) 를 coding하는 3 가지 tRNA type을 밝혔다.
Kim, In Hwang;Son, Jee-Soo;Wen, Yancheng;Jeong, Sang-Min;Min, Ga-Young;Park, Na-Young;Lee, Keun-Woo;Cho, Yong-Joon;Chun, Jongsik;Kim, Kun-Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제23권12호
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pp.1791-1801
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2013
Diketopiperazine is produced by various organisms, including bacteria, fungi, and animals, and has been suggested as a novel signal molecule involved in the modulation of genes with various biological functions. Vibrio vulnificus, which causes septicemia in humans, produces cyclo($\small{L}$-phenylalanine-$\small{L}$-proline) (cFP). To understand the biological roles of cFP, the effect of the compound on the expression of the total mRNA in V. vulnificus was assessed by next-generation sequencing. Based on the transcriptomic analysis, we classified the cFP-regulated genes into functional categories and clustered them according to the expression patterns resulted from treatment with cFP. From a total of 4,673 genes, excepting the genes encoding tRNA in V. vulnificus, 356 genes were up-regulated and 602 genes were down-regulated with an RPKM (reads per kilobase per million) value above 3. The genes most highly induced by cFP comprised those associated with the transport and metabolism of inorganic molecules, particularly iron. The genes negatively regulated by cFP included those associated with energy production and conversion, as well as carbohydrate metabolism. Noticeably, numerous genes related with biofilm formation were modulated by cFP. We demonstrated that cFP interferes significantly with the biofilm formation of V. vulnificus.
Objective: The study of Hanwoo (Korean native cattle) has mainly been focused on meat quality and productivity. Recently the field of microbiome research has increased dramatically. However, the information on the microbiome in Hanwoo is still insufficient, especially relationship between vagina and feces. Therefore, the purpose of this study is to examine the microbial community characteristics by analyzing the 16S rRNA sequencing data of Hanwoo vagina and feces, as well as to confirm the difference and correlation between vaginal and fecal microorganisms. As a result, the goal is to investigate if fecal microbiome can be used to predict vaginal microbiome. Methods: A total of 31 clinically healthy Hanwoo that delivered healthy calves more than once in Cheongju, South Korea were enrolled in this study. During the breeding season, we collected vaginal and fecal samples and sequenced the microbial 16S rRNA genes V3-V4 hypervariable regions from microbial DNA of samples. Results: The results revealed that the phylum-level microorganisms with the largest relative distribution were Firmicutes, Actinobacteria, Bacteroidetes, and Proteobacteria in the vagina, and Firmicutes, Bacteroidetes, and Spirochaetes in the feces, respectively. In the analysis of alpha, beta diversity, and effect size measurements (LefSe), the results showed significant differences between the vaginal and fecal samples. We also identified the function of these differentially abundant microorganisms by functional annotation analyses. But there is no significant correlation between vaginal and fecal microbiome. Conclusion: There is a significant difference between vaginal and fecal microbiome, but no significant correlation. Therefore, it is difficult to interrelate vaginal microbiome as fecal microbiome in Hanwoo. In a further study, it will be necessary to identify the genetic relationship of the entire microorganism between vagina and feces through the whole metagenome sequencing analysis and meta-transcriptome analysis to figure out their relationship.
Al-Husseini, Wijdan;Chen, Yizhou;Gondro, Cedric;Herd, Robert M.;Gibson, John P.;Arthur, Paul F.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권10호
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pp.1371-1382
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2016
MicroRNAs (miRNAs) are short non-coding RNAs that post-transcriptionally regulate expression of mRNAs in many biological pathways. Liver plays an important role in the feed efficiency of animals and high and low efficient cattle demonstrated different gene expression profiles by microarray. Here we report comprehensive miRNAs profiles by next-gen deep sequencing in Angus cattle divergently selected for residual feed intake (RFI) and identify miRNAs related to feed efficiency in beef cattle. Two microRNA libraries were constructed from pooled RNA extracted from livers of low and high RFI cattle, and sequenced by Illumina genome analyser. In total, 23,628,103 high quality short sequence reads were obtained and more than half of these reads were matched to the bovine genome (UMD 3.1). We identified 305 known bovine miRNAs. Bta-miR-143, bta-miR-30, bta-miR-122, bta-miR-378, and bta-let-7 were the top five most abundant miRNAs families expressed in liver, representing more than 63% of expressed miRNAs. We also identified 52 homologous miRNAs and 10 novel putative bovine-specific miRNAs, based on precursor sequence and the secondary structure and utilizing the miRBase (v. 21). We compared the miRNAs profile between high and low RFI animals and ranked the most differentially expressed bovine known miRNAs. Bovine miR-143 was the most abundant miRNA in the bovine liver and comprised 20% of total expressed mapped miRNAs. The most highly expressed miRNA in liver of mice and humans, miR-122, was the third most abundant in our cattle liver samples. We also identified 10 putative novel bovine-specific miRNA candidates. Differentially expressed miRNAs between high and low RFI cattle were identified with 18 miRNAs being up-regulated and 7 other miRNAs down-regulated in low RFI cattle. Our study has identified comprehensive miRNAs expressed in bovine liver. Some of the expressed miRNAs are novel in cattle. The differentially expressed miRNAs between high and low RFI give some insights into liver miRNAs regulating physiological pathways underlying variation in this measure of feed efficiency in bovines.
차세대 염기서열 분석기술의 발달로 대량의 전사수준의 단위체들이 발견되었는데, 이것들 중 대부분의 전사체들은 비암호화 RNA들이다. 이들 중 긴 비암호화 RNA (lncRNA)들은 200개 이상의 뉴클레오티드를 가지며 단백질로 번역이 되지 않는 기능적 RNA 분자들이다. 식물의 lncRNA들은 RNA Pol II, Pol III, Pol IV, Pol V에 의해 전사체가 만들어지고, 전사 후 이들 lncRNA들은 추가적인 splicing과 polyadenylation 과정이 일어난다. 식물의 lncRNA들은 그 발현수준이 매우 낮고, 조직 특이적으로 발현 되지만, 이들 lncRNA들은 외부자극에 의해 강한 발현이 유도된다. 환경스트레스를 포함한 각기 다른 외부자극에 의해 많은 식물 lncRNA들의 발현이 유도되었기 때문에 이들 lncRNA들은 식물의 다양한 생물학적 기능과 식물의 생장발달 과정에 있어 새로운 조절 인자로 고려되고 있다. 특히 후성유전학적인 유전자 억제, 크로마틴 변형, 타겟모방, 광형태형성, 단백질 재배치, 환경스트레스 반응, 병원균 감염등에 관련하여 기능을 한다. 또한 어떤 lncRNA들은 short RNA들의 전구체로 역할도 한다. 최근 식물에서 많은 lncRNA들이 분리 동정되었지만, 이들 lncRNA들의 생리학적인 기능에 대한 현재의 이해는 여전히 제한적이고, 이들의 세부적인 조절 메커니즘 연구는 지속적으로 이루어져야 할 것이다. 이 총설에서는 식물 lncRNA들의 생합성 및 조절 메커니즘과 현재까지 밝혀진 분자수준에서의 중요한 기능들을 요약 정리하였다.
The profitability of the dairy and beef industries is largely affected by the actually achieved reproductive efficiency. Although a large proportion of cows worldwide are bred by artificial insemination (AI) services, many potential factors affecting the outcome of pregnancy by AI remain to be addressed. In the present study, we investigated the vaginal microbiota by high-throughput sequencing of 16S rRNA gene and analyzed their association with differential pregnancy outcomes (i.e., pregnant vs. nonpregnant) of multiple AI services in dairy cows. Sequencing of the V3-V4 region totally produced 512,046 high-quality sequences that were computationally clustered into 2,584 operational taxonomic units (OTUs). All OTUs were taxonomically assigned to 10 bacterial phyla. There were statistically significant differences among the three AI service times (T1, T2 and T3) with respect to the Shannon index and number of observed OTUs (p < 0.05). Bray-Curtis distance-based PCoA analysis also revealed that T2 group could be significantly distinguished from T1 and T3. However, no significant difference between the pregnant and nonpregnant cows was found in confidence regarding both alpha diversity and beta diversity. These results could help us better understand the possible influence of vaginal microbial community on pregnancy outcomes of AI service in cows.
Coronavirus disease 2019 caused by severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) has been spreading worldwide since its outbreak in December 2019, and World Health Organization declared it as a pandemic on March 11, 2020. SARS-CoV-2 is highly contagious and is transmitted through airway epithelial cells as the first gateway. SARS-CoV-2 is detected by nasopharyngeal or oropharyngeal swab samples, and the viral load is significantly high in the upper respiratory tract. The host cellular receptors in airway epithelial cells, including angiotensin-converting enzyme 2 and transmembrane serine protease 2, have been identified by single-cell RNA sequencing or immunostaining. The expression levels of these molecules vary by type, function, and location of airway epithelial cells, such as ciliated cells, secretory cells, olfactory epithelial cells, and alveolar epithelial cells, as well as differ from host to host depending on age, sex, or comorbid diseases. Infected airway epithelial cells by SARS-CoV-2 in ex vivo experiments produce chemokines and cytokines to recruit inflammatory cells to target organs. Same as other viral infections, IFN signaling is a critical pathway for host defense. Various studies are underway to confirm the pathophysiological mechanisms of SARS-CoV-2 infection. Herein, we review cellular entry, host-viral interactions, immune responses to SARS-CoV-2 in airway epithelial cells. We also discuss therapeutic options related to epithelial immune reactions to SARS-CoV-2.
The hindgut of horses is an anaerobic fermentative chamber for a complex and dynamic microbial population, which plays a critical role in health and energy requirements. Research on the gut microbiota of Mongolian horses has not been reported until now as far as we know. Mongolian horse is a major local breed in China. We performed high-throughput sequencing of the 16S rRNA genes V4 hypervariable regions from gut fecal material to characterize the gut microbiota of Mongolian horses and compare them to the microbiota in Thoroughbred horses. Fourteen Mongolian and 19 Thoroughbred horses were used in the study. A total of 593,678 sequence reads were obtained from 33 samples analyzed, which were found to belong to 16 phyla and 75 genera. The bacterial community compositions were similar for the two breeds. Firmicutes (56% in Mongolian horses and 53% in Thoroughbred horses) and Bacteroidetes (33% and 32% respectively) were the most abundant and predominant phyla followed by Spirochaete, Verrucomicrobia, Proteobacteria, and Fibrobacteres. Of these 16 phyla, five (Synergistetes, Planctomycetes, Proteobacteria, TM7, and Chloroflexi) were significantly different (p<0.05) between the two breeds. At the genus level, Treponema was the most abundant genus (43% in Mongolian horses vs 29% in Thoroughbred horses), followed by Ruminococcus, Roseburia, Pseudobutyrivibrio, and Anaeroplasma, which were detected in higher distribution proportion in Mongolian horses than in Thoroughbred horses. In contrast, Oscillibacter, Fibrobacter, Methanocorpusculum, and Succinivibrio levels were lower in Mongolian horses. Among 75 genera, 30 genera were significantly different (p<0.05) between the two breeds. We found that the environment was one of very important factors that influenced horse gut microbiota. These findings provide novel information about the gut microbiota of Mongolian horses and a foundation for future investigations of gut bacterial factors that may influence the development and progression of gastrointestinal disease in horses.
본 연구에서는 2002년에서 2004년간 우리 나라 해수 어류 양식장에서 분리되는 세균 중 비브리오 속에 속하는 세균의 종 조성을 조사하였다. 질병의 증상을 보이는 어류로부터 166개의 비브리오속 세균 균주를 수집하였으며, 이들 균주는 넙치 (133 균주), 조피볼락 (8 균주), 참돔 (6 균주), 대하 (5 균주), 감성돔 (4 균주), 전복 (3 균주) 및 기타 해수 어류 (7 균주) 등에서 분리한 균주를 대상으로 하였다. 모든 분리 균주에 대하여 각종 생화학적 성상을 조사하고 그 특성에 따라 분리 균주를 구분하였다. 각 생화화적 성상 group에서 대표 균주를 선정하여 16S rRNA 및 16S-23S rRNA 유전자 서열을 분석하고 이들 결과를 종합하여 분리 균주을 동정하였다. 그 결과 14종 이상의 비브리오 종으로 동정할 수 있었으며, 그 종 조성은 V. ichthyoenteri (45 strains), V. alginolyticus (34 strains), V. harveyi (32 strains), Ph. damselae subsp. damselae (Formerly V. damsela, 10 strains), V. campbellii (6 strains), V. costicola-like (6 strains), V. fisheri (5 stains), V. fluvialis (4 strains) 및 Vibrio spp. (24 strains) 등이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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